盧 山 閆風林

1.信陽市中醫(yī)院兒科 (河南 信陽 464194)

2.信陽市中心醫(yī)院新生兒科 (河南 信陽 464000)

新生兒肝炎指多種原因引起的新生兒肝臟病變，臨床表現(xiàn)為黃疸、肝脾腫大、膽紅素增高等，可侵犯全身各系統(tǒng)器官，引發(fā)嚴重后遺癥，甚至導(dǎo)致新生兒死亡，對新生兒生命健康造成嚴重威脅[1-2]。肝炎相關(guān)病毒感染是新生兒肝炎主要致病因素，常見病毒包括巨細胞病毒、乙型肝炎病毒、EB病毒、單純皰疹病毒、丙型肝炎病毒、甲型肝炎病毒等類型[3-4]。不同肝炎相關(guān)病毒感染對新生兒肝功能可能造成不同程度損傷，目前針對新生兒感染肝炎相關(guān)病毒后對其肝臟損傷的影響研究較少，因此，本文選取信陽市平橋區(qū)中醫(yī)院兒科2017年6月至2020年6月期間100例新生肝炎患兒為研究對象，探討新生兒感染肝炎相關(guān)病毒后對其肝臟損傷的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取信陽市平橋區(qū)中醫(yī)院兒科2017年6月至2020年6月期間100例例新生兒肝炎患兒為研究對象。

納入標準：參考《實用新生兒學(xué)》相關(guān)診斷標準[5]：肝大、質(zhì)地異常，大便色黃，血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶升高；經(jīng)醫(yī)院倫理會通過，患兒家長對本次研究知情同意并簽署知情同意書。排除標準：合并有嚴重心、肺、腎等器官疾??；先天性遺傳疾病。根據(jù)有無肝炎相關(guān)病毒感染分為感染組(n=64)和無感染組(n=36)，并選取同期于我院出生的100例健康新生兒為健康對照組；感染組：男42例，女22例，胎齡31～41(36.28±4.66)周；月齡1～3(1.80±0.12)個月；出生體質(zhì)量2.1～4.4 (3.31±0.62)kg；分娩方式：自然分娩45例，剖宮產(chǎn)例19例。無感染組：男26例，女10例，胎齡31～41(36.77±4.71)周；月齡1～3(1.73±0.10)個月；出生體質(zhì)量2.1～4.5(3.43±0.65)kg；分娩方式：自然分娩28例，剖宮產(chǎn)例8例。對照組：男性61例，女39例，胎齡33～41(37.43±3.50)周；月齡1～3(1.85±0.14)個月；出生體質(zhì)量2.0～4.5(3.22±0.59)kg；分娩方式：自然分娩62例，剖宮產(chǎn)例38例。三組性別、胎齡、出生體質(zhì)量、分娩方式等基線資料比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法確診后次日清晨采集新生兒肝炎患兒空腹靜脈血4mL，加入抗凝劑，充分混勻后置入離心機，3000轉(zhuǎn)/min離心10min，將分離血清置于-80℃冰箱保存。

1.2.1 病毒核酸檢測 采用熒光定量PCR法檢測血清巨細胞病毒與EV病毒，試劑盒由深圳市匹基生物工程公司提供，取1 mL血液標本加入1mL生理鹽水，混勻后沿試管壁緩慢加入裝有500μL淋巴細胞分離液的試管，16097×g離心5min，棄去上清，加入50μL細胞裂解液，100℃水浴10min，16097×g離心5min，保留上清。取出PCR反應(yīng)液，加入處理后樣品，PCR反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性5min，95℃變性40 s，55℃退火30s，72℃延伸1min，共35個循環(huán)，72℃延伸5min。繪制標準曲線，換算巨細胞病毒與EB病毒拷貝值，以拷貝值≥500拷貝/mL定義為陽性。1.2.2 病毒ELISA檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、單純皰疹病毒，試劑盒由杭州艾康生物技術(shù)公司提供，具體操作步驟參考試劑盒說明書，閾值=0.1＋陰性對照吸光度平均值，以樣品吸光度＞閾值為陽性。根據(jù)有無肝炎相關(guān)病毒感染將新生兒肝炎患兒分為感染組與未感染組。

1.2.3 生化檢測 采用全自動生化分析儀(美國貝克曼公司AU5800)檢測所有受檢新生兒血清ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP等肝功能指標。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法選用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 19.0對研究數(shù)據(jù)進行分析和處理，計數(shù)資料采取率以(%)表示，計量資料(±s)表示，組間ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP比較采用t值檢驗，繪制ROC曲線，分析ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP對病毒感染的預(yù)測價值以P＜0.05為有顯著性差異和統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 感染組、無感染組、健康對照組肝功能比較感染組ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP顯著高于無感染組與健康對照組(P＜0.001)。無感染組ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP顯著高于健康對照組(P＜0.001)，見表1。

表1 感染組、無感染組、健康對照組肝功能比較

2.2 單一病毒感染與復(fù)合病毒感染患兒肝功能比較單一病毒感染患兒ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP顯著低于復(fù)合病毒感染患兒(P＜0.05)，見表2。

表2 單一病毒感染與復(fù)合病毒感染患兒肝功能比較

2.3 不同類型單一病毒感染患兒肝功能比較巨細胞病毒、乙型肝炎病毒、其他病毒不同類型病毒感染患者ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，見表3。

表3 不同類型單一病毒感染患兒肝功能比較

2.4 肝功能指標預(yù)測病毒感染的ROC曲線分析ROC曲線分析顯示，ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP預(yù)測病毒感染的曲線面積下均＞0.6(P＜0.05)，見表4。

表4 肝功能指標預(yù)測病毒感染的ROC曲線分析

3 討 論

近年來新生兒肝炎病毒檢測受到越來越多的研究與重視，以病毒學(xué)視角分析新生兒肝炎發(fā)生機制，可以更加深入了解新生兒肝炎病理特點，為新生兒肝炎治療尋找新的方法。隨著實驗室檢查條件改善，檢測技術(shù)提高，巨細胞病毒感染已取代乙型肝炎病毒成為新生兒肝炎主要病毒感染類型[6-8]。巨細胞病毒是一種皰疹病毒組DNA病毒，以其感染細胞腫大及巨大核內(nèi)包涵體而得名，可侵入人體在纖維細胞中增殖，干擾宿主免疫應(yīng)答，導(dǎo)致機體無法順利清除巨細胞病毒。巨細胞病毒作為一種潛伏性病毒，可長期甚至終身潛伏于患者體內(nèi)，在免疫抑制或炎癥刺激下可能激活引發(fā)肝臟、中樞神經(jīng)、泌尿生殖等器官組織感染。本研究納入的100例新生兒肝炎患兒中一共檢出38例巨細胞病毒單一感染及16例巨細胞病毒復(fù)合感染患兒，在新生兒肝炎相關(guān)病毒感染中居首位。巨細胞病毒感染在我國廣泛流行，孕婦感染巨細胞病毒后，受性激素與內(nèi)分泌影響激活巨細胞病毒，經(jīng)由胎盤傳播給胎兒，導(dǎo)致先天性感染。另外孕婦在分娩過程中也可由血液、分泌物等造成圍產(chǎn)期新生兒感染。

乙型肝炎病毒感染曾是我國新生兒肝炎相關(guān)病毒感染最常見類型，受檢查技術(shù)進步、公共醫(yī)療衛(wèi)生條件改善、乙型肝炎疫苗推廣等因素影響，近年來乙型肝炎病毒感染患兒在新生兒肝炎相關(guān)病毒感染中比例已明顯下降[9-10]。本研究中乙型肝炎病毒感染率僅次于巨細胞病毒感染，在新生兒肝炎相關(guān)病毒感染中居第二位。乙型肝炎病毒屬于嗜肝DNA病毒，進入肝細胞后轉(zhuǎn)化為超螺旋的共價、閉合、環(huán)狀DNA分子，長期潛伏于細胞核內(nèi)，目前乙型肝炎病毒只能控制無法徹底清除。目前乙型肝炎疫苗是阻斷乙肝病毒母嬰傳播的有效方法，通過加強產(chǎn)婦孕期檢查，提高家屬醫(yī)療保健意識，可在一定程度上預(yù)防與控制乙肝病毒感染。近年來我國推廣的乙肝免疫球蛋白作為一種被動免疫制劑，對阻斷乙肝病毒垂直傳播與降低乙型肝炎病毒感染的新生兒肝炎也有重要價值。EB病毒是一種皰疹樣病毒，形態(tài)與單純皰疹樣病毒相似，1964年由Eptein與Barr發(fā)現(xiàn)并命名，可通過唾液、血液等傳播造成全身感染[11-12]。絕大部分成人均有EB病毒抗體，EB病毒感染在幼兒階段較為常見，多呈無癥狀感染，部分患兒可能出現(xiàn)發(fā)熱、頸淋巴結(jié)腫大、肝臟腫大、脾臟腫大等癥狀。新生兒感染巨細胞病毒、乙型肝炎病毒、EB病毒等肝炎相關(guān)病毒后易侵及肝臟，造成肝功能損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，新生兒感染肝炎相關(guān)病毒后肝功能指標顯著高于正常參考范圍，表明肝炎相關(guān)病毒感染患者存在不同程度肝臟損傷。本研究比較感染肝炎相關(guān)病毒與未感染肝炎相關(guān)病毒的新生兒肝炎患者肝功能指標，發(fā)現(xiàn)感染組ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP高于無感染組，提示肝炎相關(guān)病毒可直接作用于肝臟內(nèi)肝細胞、血管內(nèi)皮細胞、膽管上皮細胞等多種細胞，加之病毒感染帶來的免疫病理變化，可能造成更嚴重肝臟損傷。且ROC曲線分析顯示，ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA、ALP預(yù)測病毒感染的曲線面積下均＞0.6，提示肝功能指標對病毒感染具有一定預(yù)測價值。值得注意的是，相關(guān)研究顯示病毒感染可使宿主產(chǎn)生免疫抑制，對其他條件致病性感染更加易感[13-15]。因此本研究認為，在臨床診治中應(yīng)重視復(fù)合病毒感染患兒，盡早進行干預(yù)，避免造成更大損害。本研究比較不同類型單一病毒感染患兒肝功能，未發(fā)現(xiàn)明顯差異，可能與納入樣本量較小等因素相關(guān)，下一步將擴大樣本量進一步研究肝炎相關(guān)病毒感染類型與肝臟損傷間關(guān)系。

綜上所述，巨細胞病毒與乙型肝炎病毒是新生兒肝炎重要病因，在臨床診治中可優(yōu)先檢測巨細胞病毒與乙型肝炎病毒，以提高檢測效率。肝炎相關(guān)病毒感染患兒肝功能損傷存在一定聯(lián)系，病毒合并感染可能加重肝臟損傷。