郭志強(qiáng) 李鈺艷 李洪亮 張 敏 何 勇 許斌兵

(四川省遂寧市中心醫(yī)院1 麻醉科，2 內(nèi)分泌科，遂寧市 629000，電子郵箱：guozhiqiang384@163.com)

氧化應(yīng)激與心力衰竭、心律失常和心肌梗死等疾病密切相關(guān)，其過(guò)度激活容易導(dǎo)致心血管疾病的發(fā)生[1]?；钚匝醮厥且唤M活性小分子，在調(diào)節(jié)細(xì)胞的各種功能和生物過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，對(duì)心血管的穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要，但活性氧簇的失衡會(huì)造成心血管損傷，多種心腦血管疾病的發(fā)生都與氧化應(yīng)激有關(guān)，而心血管疾病是導(dǎo)致死亡的主要疾病[2-3]。因此，從氧化應(yīng)激方面開(kāi)展心血管疾病的防治研究，成為近年來(lái)的新趨勢(shì)。在臨床上丙泊酚常作為快速短效的靜脈麻醉藥，除催眠與鎮(zhèn)靜作用外，其還具有降低動(dòng)脈血壓、抑制炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡、改善細(xì)胞能量代謝障礙等功能[4-5]。研究表明，丙泊酚具有抗心肌細(xì)胞氧化損傷的作用，能夠降低心肌細(xì)胞中的活性氧簇含量，減少氧化應(yīng)激條件下心肌細(xì)胞的凋亡[6]。磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3 kinase，PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)信號(hào)通路與氧化應(yīng)激反應(yīng)密切相關(guān)，而丙泊酚能夠通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路減輕炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激，從而抑制腎缺血再灌注損傷，以及改善蛛網(wǎng)膜下腔出血引起的早期腦損傷[7-8]。本研究探討丙泊酚對(duì)過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的大鼠肝Kupffer細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷和PI3K/Akt通路的影響，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：10只SD大鼠，10～12周齡，雌雄均可，體重260～300 g，購(gòu)自重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[許可證號(hào)SCXK(渝)2019-0003]，于本院動(dòng)物房常規(guī)飼養(yǎng)，環(huán)境溫度22 ℃～24 ℃，相對(duì)濕度50%，12 h光照/12 h黑暗交替，自由飲水進(jìn)食。本研究符合國(guó)家實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)法律規(guī)定。

1.1.2 主要試劑和儀器：丙泊酚注射液購(gòu)自四川國(guó)瑞藥業(yè)責(zé)任有限公司(規(guī)格10 mL ∶0.1 g，批號(hào)：20190815)；含10%胎牛血清的杜氏改良伊格爾培養(yǎng)基(Dulbecco′s modified Eagle medium，DMEM)/F12培養(yǎng)基購(gòu)自美國(guó)Gibco公司(批號(hào)：17502-048)；30%過(guò)氧化氫溶液、二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)、MTT、結(jié)合緩沖液和兔抗鼠β-actin單克隆抗體均購(gòu)自美國(guó)Sigma公司(批號(hào)：SD0617M、SL5519K、SD3019、SD7123、SD5413K)；蛋白提取試劑盒、ECL顯色試劑盒和二氨基聯(lián)苯胺顯色試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物科技有限公司(批號(hào)：hz-3101-1、hz-5102-3、hz-4105-6)；膜聯(lián)蛋白Ⅴ-異硫氰酸熒光素(annexin Ⅴ-fluorescein isothiocyanate，Annexin V-FITC)/碘化丙啶(propidium iodide，PI)細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒購(gòu)自嘉美生物技術(shù)有限公司(批號(hào)：s112)；乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)檢測(cè)試劑盒、活性氧簇檢測(cè)試劑盒、過(guò)氧化氫酶(catalase，CAT)檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司(批號(hào)： SC0191-25、S0033M、S0101M)；96孔培養(yǎng)板購(gòu)自上海生工生物工程有限公司(批號(hào)：F603204)；二喹啉甲酸蛋白定量試劑盒購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司(批號(hào)：R21250)兔抗鼠PI3K、Akt、磷酸化PI3K(phosphorylated PI3K，p-PI3K)和磷酸化Akt(phosphorylated Akt，p-Akt)單克隆抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗鼠IgG二抗均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司(批號(hào)：ab01364、ab50113、ab56189、ab70142、ab0019)；SpectraMax iD5型多功能酶標(biāo)儀購(gòu)自上海美谷分子儀器有限公司；VersaDoc 3000型蛋白凝膠成像儀購(gòu)自美國(guó)Bio-Rad公司；CKX41型倒置顯微鏡購(gòu)自日本Olympus公司；FACSCanto型流式細(xì)胞儀購(gòu)自美國(guó)BD公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 Kupffer細(xì)胞的分離與培養(yǎng):參照相關(guān)文獻(xiàn)[9]的方法，使用梯度離心結(jié)合選擇性貼壁法分離大鼠Kupffer細(xì)胞。使用0.3%的戊巴比妥鈉以30 mg/kg的劑量進(jìn)行腹腔注射，麻醉大鼠后固定、消毒，于腹部做十字切口，經(jīng)腹主動(dòng)脈推注肝素(100 U/kg)，結(jié)扎下腔靜脈；切開(kāi)胸腔并夾閉主動(dòng)脈，剪開(kāi)心臟，使血液流入胸腔，灌注不含鈣離子的Hank′s液，使肝臟逐漸變成黃白色；仔細(xì)分離切取肝臟，于無(wú)菌操作臺(tái)上使用不含鈣離子的Hank′s液沖洗，然后用注射器抽取0.05%膠原蛋白酶反復(fù)灌洗肝臟，使肝臟組織松散，呈泥狀；剝離肝包膜，經(jīng)200目網(wǎng)過(guò)濾，除去未消化的組織，得到肝細(xì)胞懸液。將肝細(xì)胞懸液在4 ℃下1 000 r/min離心3 min，取上清；然后4 ℃下10 000 r/min離心5 min，取沉淀；使用不含血清的DMEM/F12培養(yǎng)基重懸，同時(shí)加入1.065 g/mL細(xì)胞分離液，在4 ℃下10 000 r/min離心15 min，取沉淀；再次使用不含血清的DMEM/F12培養(yǎng)基重懸，在4 ℃下1 000 r/min離心5 min，取沉淀。加入含10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基，同時(shí)使用倒置相差顯微鏡鑒定Kupffer細(xì)胞，若細(xì)胞折光性強(qiáng)、呈圓形、體積小，15min后開(kāi)始貼壁、細(xì)胞呈扁圓形、變薄、邊界模糊，4 h后大部分貼壁、胞膜伸展、體積增大、形狀不規(guī)則，24 h后細(xì)胞完全伸展、出現(xiàn)偽足、呈多邊形等不規(guī)則形狀，則該細(xì)胞為Kupffer細(xì)胞。對(duì)Kupffer細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，然后使用含10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基，置于37 ℃、5% CO2、飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞并調(diào)整密度為1×106個(gè)/mL用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞模型的建立及分組處理:參照相關(guān)文獻(xiàn)[10-12]的方法，使用100 μmol/L過(guò)氧化氫誘導(dǎo)Kupffer細(xì)胞，建立氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞模型。將Kupffer細(xì)胞按照2×104個(gè)/孔接種至96孔板中，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)24 h后，加入100 μmol/L過(guò)氧化氫作用24 h。取正常Kupffer細(xì)胞作為對(duì)照組(用不含丙泊酚的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng))，將模型細(xì)胞隨機(jī)分為模型組(不含丙泊酚的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng))、丙泊酚低濃度組(含5 μmol/L丙泊酚的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng))、丙泊酚中濃度組(含25 μmol/L丙泊酚的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng))、丙泊酚高濃度組(含50 μmol/L 丙泊酚的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng))和陽(yáng)性對(duì)照組(含0.1 μmol/L鹽酸右美托咪定的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng))。6組細(xì)胞均于37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12 h。每組均設(shè)6個(gè)平行孔。

1.2.3 MTT法檢測(cè)細(xì)胞活性:收集1.2.2中培養(yǎng)12 h后的細(xì)胞，加入10 μL的MTT繼續(xù)孵育4 h，吸取上清，加入150 μL的DMSO，充分震蕩混勻15 min后用多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔570 nm處吸光度值(即OD570)。細(xì)胞活性=(實(shí)驗(yàn)組OD570/對(duì)照組OD570)×100%。實(shí)驗(yàn)重復(fù)6次。

1.2.4 流式細(xì)胞法檢測(cè)細(xì)胞凋亡:收集1.2.2中培養(yǎng)12 h后的細(xì)胞，1 200 r/min離心5 min，棄培養(yǎng)基并收集細(xì)胞，用磷酸緩沖鹽溶液洗滌2次，每次2 min，用400 μL結(jié)合緩沖液懸浮細(xì)胞，加入5 μL Annexin Ⅴ-FITC染液，輕輕混勻后于2 ℃～8 ℃避光孵育15 min；加入10 μL PI后輕輕混勻，于2 ℃～8 ℃避光孵育5 min；使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，統(tǒng)計(jì)細(xì)胞凋亡率。實(shí)驗(yàn)重復(fù)6次。

1.2.5 檢測(cè)細(xì)胞LDH釋放量:收集1.2.2中培養(yǎng)12 h后的細(xì)胞，嚴(yán)格按照乳酸脫氫LDH試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，使用多功能酶標(biāo)儀測(cè)定490 nm處各孔吸光度值(即OD490)，計(jì)算LDH釋放量。LDH釋放量(%)=(培養(yǎng)液OD490+細(xì)胞勻漿OD490)/培養(yǎng)液OD490×100%。實(shí)驗(yàn)重復(fù)6次。

1.2.6 檢測(cè)細(xì)胞活性氧簇含量：收集1.2.2中培養(yǎng)12 h后的細(xì)胞上清液，按照活性氧檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，使用多功能酶標(biāo)儀測(cè)量各孔的熒光強(qiáng)度，即調(diào)整最佳激發(fā)波長(zhǎng)為488 nm、最佳發(fā)射波長(zhǎng)為525 nm時(shí)顯示的熒光強(qiáng)度，以細(xì)胞培養(yǎng)基的上清液作為空白組。活性氧簇含量=(實(shí)驗(yàn)組熒光強(qiáng)度-空白組熒光強(qiáng)度)/(對(duì)照組熒光強(qiáng)度-空白組熒光強(qiáng)度)×100%。實(shí)驗(yàn)重復(fù)6次。

1.2.7 檢測(cè)CAT活性：收集1.2.2中培養(yǎng)12 h后的細(xì)胞上清液，按照CAT檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。以25 ℃反應(yīng)1 minOD240減少0.1的CAT量為1個(gè)CAT酶活單位，計(jì)算CAT活性。CAT活性(U/mg)=(ΔOD240×VT)/(0.1×VS×t×W)，其中，ΔOD240代表反應(yīng)時(shí)間內(nèi)吸光度的變化，VT代表提取酶液總體積(mL)，W代表樣品重量(mg)，t代表反應(yīng)時(shí)間(min)，VS代表測(cè)定時(shí)所取酶液體積(mL)。實(shí)驗(yàn)重復(fù)6次。

1.2.8 Western blot檢測(cè)PI3K、Akt的磷酸化水平：收集1.2.2中培養(yǎng)12 h后的細(xì)胞，使用蛋白提取試劑盒提取細(xì)胞中的總蛋白。使用二喹啉甲酸蛋白定量試劑盒對(duì)蛋白進(jìn)行定量，然后進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉，將1 ∶500濃度稀釋后的兔抗鼠PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt和β-actin一抗4 ℃過(guò)夜孵育，以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)注的羊抗鼠IgG二抗(1 ∶5 000)室溫孵育2 h，用ECL顯色試劑盒顯色，凝膠成像儀拍照，分析灰度值，以β-actin為參照進(jìn)行半定量分析，PI3K、Akt磷酸化水平分別以p-PI3K/PI3K比值、p-Akt/Akt比值表示。實(shí)驗(yàn)重復(fù)6次。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以(x±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 各組Kupffer細(xì)胞活性的比較 與對(duì)照組相比，模型組Kupffer細(xì)胞活性降低(P<0.05)；與模型組相比，陽(yáng)性對(duì)照組、丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞活性升高(均P<0.05)，而丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與陽(yáng)性對(duì)照組、丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組比較，丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞活性降低(均P<0.05)；陽(yáng)性對(duì)照組、丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組Kupffer細(xì)胞活性的比較(x±s，%)

2.2 各組Kupffer細(xì)胞凋亡率的比較 與對(duì)照組相比，模型組Kupffer細(xì)胞凋亡率升高(P<0.05)；與模型組相比，陽(yáng)性對(duì)照組、丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞凋亡率降低(均P<0.05)，而丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞凋亡率升高(P<0.05)；與陽(yáng)性對(duì)照組相比，丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞凋亡率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞凋亡率升高(P<0.05)；丙泊酚中濃度組、丙泊酚低濃度組、丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞凋亡率依次升高(均P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 各組Kupffer細(xì)胞凋亡率的比較(x±s，%)

2.3 各組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量、活性氧簇含量及CAT活性的比較 與對(duì)照組相比，模型組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量和活性氧簇含量升高，CAT活性降低(均P<0.05)；與模型組相比，陽(yáng)性對(duì)照組、丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量和活性氧簇含量降低，CAT活性升高(均P<0.05)，而丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量和活性氧簇含量升高，CAT活性降低(均P<0.05)；與陽(yáng)性對(duì)照組比較，丙泊酚低濃度組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，活性氧簇含量升高、CAT活性降低(均P<0.05)，丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量、活性氧簇含量、CAT活性差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量和活性氧簇含量升高、CAT活性降低(均P<0.05)；與丙泊酚低濃度組相比，丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量和CAT活性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，活性氧簇含量降低(P<0.05)，丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量和活性氧簇含量升高，CAT活性降低(均P<0.05)；與丙泊酚中濃度組相比，丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量和活性氧簇含量升高，CAT活性降低(均P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 各組Kupffer細(xì)胞LDH釋放量、活性氧簇含量及CAT活性的比較(x±s)

2.4 各組Kupffer細(xì)胞PI3K和Akt磷酸化水平的比較 與對(duì)照組相比，模型組Kupffer細(xì)胞PI3K和Akt的磷酸化水平降低(均P<0.05)；與模型組相比，陽(yáng)性對(duì)照組、丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞PI3K和Akt的磷酸化水平升高(均P<0.05)，而丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞PI3K和Akt的磷酸化水平降低(均P<0.05)；與陽(yáng)性對(duì)照組、丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組相比，丙泊酚高濃度組Kupffer細(xì)胞PI3K和Akt的磷酸化水平降低(均P<0.05)；陽(yáng)性對(duì)照組、丙泊酚低濃度組和丙泊酚中濃度組Kupffer細(xì)胞PI3K和Akt的磷酸化水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見(jiàn)表4和圖1。

表4 各組Kupffer細(xì)胞PI3K和Akt磷酸化水平的比較(x±s)

圖1 蛋白條帶圖

3 討 論

氧化應(yīng)激損傷與心血管疾病的發(fā)生存在密切的關(guān)系：氧化應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致活性氧簇含量增多，耗盡抗氧化酶，使自由基損害心血管，導(dǎo)致心血管細(xì)胞線粒體內(nèi)電子傳遞鏈?zhǔn)苡绊?，引起線粒體功能障礙，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[13]。因此，減少氧化應(yīng)激逐漸成為治療心血管疾病的重要研究方向，但是，目前并沒(méi)有特定的抗氧化治療方法來(lái)預(yù)防或治療心血管疾病。

當(dāng)離體細(xì)胞受到損傷時(shí)，LDH會(huì)由細(xì)胞釋放至培養(yǎng)液中，所以可用LDH釋放量來(lái)評(píng)估細(xì)胞受損程度。另外，活性氧簇過(guò)量會(huì)產(chǎn)生大量自由基，損害細(xì)胞，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。丙泊酚是臨床常用的靜脈麻醉劑，可清除自由基，具有顯著的抗氧化作用[5]。Yu等[14]研究發(fā)現(xiàn)，丙泊酚能夠通過(guò)減少腦缺血再灌注損傷過(guò)程中琥珀酸鹽的積累來(lái)防止氧化應(yīng)激的發(fā)生。Guo等[15]研究發(fā)現(xiàn)，丙泊酚可在臨時(shí)載瘤動(dòng)脈夾閉手術(shù)后7 d內(nèi)防止大腦發(fā)生氧化應(yīng)激損傷，從而保護(hù)神經(jīng)，促進(jìn)認(rèn)知功能的恢復(fù)。Yoon等[16]研究發(fā)現(xiàn)，丙泊酚能夠誘導(dǎo)細(xì)胞自噬來(lái)減少氧化應(yīng)激損傷所致的COS-7細(xì)胞凋亡。丙泊酚作為一種臨床使用的靜脈麻醉藥，高濃度易對(duì)人體造成損害。本研究使用過(guò)氧化氫干預(yù)Kupffer細(xì)胞后，細(xì)胞活性降低，凋亡率升高，LDH釋放量和活性氧簇含量增加，CAT活性降低，提示成功建立氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞模型。本研究結(jié)果顯示，低、中濃度的丙泊酚均可抑制LDH的釋放，提高活性氧簇的清除能力和CAT活性，增強(qiáng)細(xì)胞活性，減少細(xì)胞凋亡，但高濃度丙泊酚(50 μmol/L)卻加重過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的Kupffer細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。這提示中、低濃度丙泊酚可通過(guò)增強(qiáng)細(xì)胞CAT活性，提高細(xì)胞清除活性氧的能力，減少LDH的釋放，從而發(fā)揮其抵抗氧化應(yīng)激損傷的作用，以維持細(xì)胞活性、減少細(xì)胞凋亡，但其作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

氧化應(yīng)激與PI3K/Akt信號(hào)通路密切相關(guān)，PI3K是一種胞外的磷脂酰肌醇激酶，PI3K活化后可誘導(dǎo)Akt磷酸化，p-Akt進(jìn)一步活化下游信號(hào)因子，調(diào)節(jié)細(xì)胞活性，抑制細(xì)胞凋亡[7]。楊莎莎等[17]研究發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇通過(guò)激活PI3K/Akt通路抑制高糖致腎小管上皮細(xì)胞凋亡；Lim等[18]研究發(fā)現(xiàn)，抗衰老蛋白能夠通過(guò)負(fù)調(diào)控PI3K/Akt信號(hào)通路，提高抗氧化物酶活性，從而保護(hù)他克莫司誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激；Zhang等[19]研究發(fā)現(xiàn)，氫氣通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路抑制核因子E2相關(guān)因子2的激活，從而保護(hù)細(xì)胞免受紫外線輻射誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激損傷；Zhao等[20]研究發(fā)現(xiàn)，芪藶強(qiáng)心膠囊可能通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路來(lái)減少氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡。上述研究表明，PI3K/Akt通路與細(xì)胞的氧化應(yīng)激損傷及細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，低、中濃度的丙泊酚能夠提高Kupffer細(xì)胞PI3K和Akt的磷酸化水平，這提示丙泊酚可能通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路來(lái)減輕氧化應(yīng)激損傷，抑制細(xì)胞凋亡。

綜上所述，低、中濃度(5 μmol/L、25 μmol/L)的丙泊酚可減輕過(guò)氧化氫誘導(dǎo)的Kupffer細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷，增強(qiáng)細(xì)胞活性，抑制細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與PI3K/Akt通路有關(guān)。