蔣詠梅，汪海宣，程慶兵，陶俊鈺

(合肥市食品藥品檢驗(yàn)中心，合肥 230006)

癌癥是臨床常見疾病之一，該疾病具有較高的發(fā)病率和死亡率，嚴(yán)重威脅患者生命安全[1]。目前藥物治療是緩解癌癥患者疼痛度的有效手段，對于重度疼痛患者采用嗎啡等強(qiáng)效阿片類鎮(zhèn)痛藥物，嗎啡類鎮(zhèn)痛藥物如鹽酸嗎啡片在癌癥疼痛患者中應(yīng)用廣泛[2]。為了保證鹽酸嗎啡片的療效，并降低其不良事件發(fā)生的風(fēng)險[3-5]，應(yīng)對藥品生產(chǎn)質(zhì)量和檢測質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格控制。

測量不確定度是與測量結(jié)果關(guān)聯(lián)的參數(shù)，是表征賦予被測量值分散性的非負(fù)參數(shù)[5]，該參數(shù)通常由多種分量組成，其表達(dá)定義了獲得不確定度的不同方法。目前未見鹽酸嗎啡片含量測量不確定度評定的相關(guān)報道。為分析鹽酸嗎啡片含量測量不確定度的來源，提高測定結(jié)果的可信度，筆者按照《中國藥典》2020 年版(二部)鹽酸嗎啡片含量測定檢驗(yàn)方法，參考JJF 1059.1—2012[5]和文獻(xiàn)[6-11]，對鹽酸嗎啡片含量測定中的各不確定度分量進(jìn)行分析評估，建立了分光光度法測定鹽酸嗎啡片含量測量不確定度的評定方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

紫外-可見分光光度計：T9-CS 型，A 級，北京市普析通用儀器有限責(zé)任公司。

電子天平：XP205E 型，感量為0.01/0.1 mg，瑞士梅特勒-托利多公司。

容量瓶：100、50 mL，A 級，德國普蘭德有限公司。

移液管：10、15 mL，A級，德國普蘭德有限公司。

嗎啡對照品：純度為93.9%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))，擴(kuò)展不確定度U=0.4%(k=2)，批號為171201-201825，中國食品藥品檢定研究院。

氫氧化鈉：分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

鹽酸嗎啡片：5 mg/片，青海制藥廠有限公司。

實(shí)驗(yàn)用水為純化水。

1.2 試驗(yàn)環(huán)境

環(huán)境溫度為20.3 ℃，相對濕度為51%。

1.3 溶液制備

樣品溶液：取鹽酸嗎啡片40 片，精密稱定，總質(zhì)量為4.084 4 g，研細(xì)，精密稱取10 份約含10 mg鹽酸嗎啡的鹽酸嗎啡片粉末，分別置于100 mL 容量瓶中，加入50 mL 水，充分振搖，使其溶解，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻，濾過。用15 mL A 級移液管精密量取15 mL 續(xù)濾液，置于50 mL 容量瓶中，加入0.2 mol/L 氫氧化鈉溶液25 mL，用水稀釋至標(biāo)線，搖勻，過濾，取濾液即為樣品溶液。

嗎啡對照品溶液：精密稱取10.53、10.55 mg 嗎啡對照品，分別置于100 mL 容量瓶中，用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液70 mL 超聲溶解并稀釋至標(biāo)線，搖勻，過濾，分別作為對照品儲備溶液1 和對照品儲備溶液2。用10 mL A 級移液管分別精密量取10 mL 對照品儲備溶液1 和對照品儲備溶液2，分別置于50 mL 容量瓶中，用0.1 mol/L 氫氧化鈉溶液稀釋至標(biāo)線，搖勻，過濾，作為對照品溶液1(質(zhì)量濃度為0.021 06 mg/mL)和對照品溶液2(質(zhì)量濃度為0.021 10 mg/mL)。

1.4 分析方法

用紫外-可見分光光度計，選擇測定波長為250 nm，分別測定樣品溶液和嗎啡對照品溶液的吸光度，用外標(biāo)法定量[10]。

2 數(shù)學(xué)模型

鹽酸嗎啡片中鹽酸嗎啡的質(zhì)量m按式(1)和式(2)計算：

式中：F——校正因子；

As——嗎啡對照品溶液的吸光度；

fs——嗎啡對照品溶液的稀釋倍數(shù)；

ms——嗎啡對照品的質(zhì)量，g；

ps——嗎啡對照品的純度(質(zhì)量分?jǐn)?shù))，%；

m——鹽酸嗎啡片中鹽酸嗎啡的質(zhì)量，g；

At——鹽酸嗎啡片樣品溶液的吸光度；

ft——鹽酸嗎啡片樣品溶液稀釋倍數(shù)；

mt——鹽酸嗎啡片樣品質(zhì)量，g；

k——鹽酸嗎啡與嗎啡的化學(xué)式相對質(zhì)量比。

3 不確定度來源

根據(jù)不確定度特征，其來源可分為A 類不確定度和B 類不確定度[5]。分光光度法測定鹽酸嗎啡片含量的測量不確定度主要來源于4 個方面，見表1。

表1 分光光度法測定鹽酸嗎啡片含量不確定度來源與分類

4 不確定度評定

4.1 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(p)

嗎啡對照品證書顯示，嗎啡對照品的純度為93.6%(質(zhì)量分?jǐn)?shù))，擴(kuò)展不確定度U=0.4%，k=2，嗎啡對照品純度引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

4.2 測量重復(fù)性引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(R)

測量重復(fù)性引入的不確定度根據(jù)鹽酸嗎啡片含量測定結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)偏差s及測定次數(shù)n計算。10份鹽酸嗎啡片樣品測定結(jié)果見表2。根據(jù)表2 數(shù)據(jù)，測量重復(fù)性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

表2 鹽酸嗎啡片含量測定結(jié)果 mg

4.3 稱量引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(m)

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境相對獨(dú)立，稱量操作迅速、及時，環(huán)境溫度、濕度在短時間內(nèi)變化甚微，對稱量結(jié)果影響可以忽略不計，因此鹽酸嗎啡片樣品、嗎啡對照品稱量時天平引入的不確定度主要來源于天平稱量準(zhǔn)確度。

4.3.1 樣品稱量引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(mt)

4.3.2 對照品稱量引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(ms)

4.4 溶液配制引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(V)

4.4.1 溶液定容體積引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(V1)

相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

100 mL A 級容量瓶容量允許誤差引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

上述兩項(xiàng)不確定度分量彼此獨(dú)立，互不相關(guān)，合成得樣品溶液和對照品溶液定容體積引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

4.4.2 移液引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(V2)

相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

10 mL A 級移液管容量允許誤差引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

上述兩項(xiàng)不確定度分量彼此獨(dú)立不相關(guān)，合成得移液引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

上述兩項(xiàng)不確定度分量彼此獨(dú)立不相關(guān)，合成得溶液配制引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

5 合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度

將各不確定度分量匯總見表3。

表3 不確定度分量匯總表

由于各不確定度分量彼此獨(dú)立不相關(guān)，則合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

6 擴(kuò)展不確定度和結(jié)果表示

在95%的置信概率情況下，包含因子k=2，則相對擴(kuò)展不確定度：

分光光度法測定鹽酸嗎啡片含量的測定結(jié)果表示為(5.003±0.0287) mg，k=2。

在不確定度評定過程中，參考相關(guān)文獻(xiàn)將部分不確定度分量忽略不計[15]，最終評定結(jié)果在可接收范圍內(nèi)(擴(kuò)展不確定度與結(jié)果比值為0.58%)。

7 結(jié)語

對紫外可見分光光度法測定鹽酸嗎啡片中嗎啡含量的不確定度進(jìn)行了評定，測量結(jié)果的不確定度主要包括測量重復(fù)性、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度、稱量過程和溶液配制過程，其中標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度、溶液配制和稱量過程對不確定度的影響較大。在測定過程中應(yīng)選用證書齊全質(zhì)量可靠的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，溶液配制過程中選用檢定合格的計量器具，增加對照品、樣品的取樣量。同時要求分析人員要熟練掌握樣品制備及測定操作技術(shù)，嚴(yán)格按照規(guī)定的檢測條件進(jìn)行測定，提高測定結(jié)果的準(zhǔn)確度。