秦 濤，高祉婧，蘇艷芳，張 杰

(天津大學(xué)藥物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，天津 300072)

蘆根為禾本科植物蘆葦屬蘆葦PhragmitescommunisTrin.的干燥根莖，是《中國(guó)藥典》收載的品種，為常用的藥食同源中藥，性寒味甘，具有清熱生津、除煩、止嘔、利尿之功效[1]。臨床主要用于治療發(fā)熱、支氣管炎、尿路感染、止嘔等，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，蘆根具有抗氧化、降血糖、抗腫瘤、保肝等作用[2]。蘆根是中醫(yī)推薦用于治療新冠肺炎的疏風(fēng)解毒膠囊的八味組成藥材之一[3]。迄今國(guó)內(nèi)外關(guān)于蘆根的文獻(xiàn)集中于其多糖，次生代謝產(chǎn)物的研究鮮有報(bào)道，為了進(jìn)一步闡明蘆根的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)，對(duì)蘆根醇提物的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取部分的化學(xué)成分進(jìn)行分析，共分離得到25個(gè)化合物，其中化合物2～11、13～17、20和23～25均為首次從該屬和該植物中分離得到，化合物1～4和7具有較強(qiáng)的抗氧化活性，化合物2～4、11和15具有α-葡萄糖苷酶抑制活性。

1 材料

Bruker Avance Ⅲ-400 MHz、600 MHz型核磁共振譜儀(德國(guó)Bruker公司)；Agilent TOF LC/MS質(zhì)譜儀(美國(guó)Agilent公司)；Autopol Ⅱ旋光儀(美國(guó)魯?shù)婪蚬?；GF254薄層色譜硅膠、柱色譜硅膠(青島海洋化工廠)；聚酰胺(浙江臺(tái)州路橋四甲生化塑料廠)；Sephadex LH-20(美國(guó)Amersham Pharmacia公司)；ODS 柱色譜硅膠(日本Fuji Silysia公司)；D101大孔吸附樹(shù)脂(天津市海光化工有限公司)；ZORBAX SB-C18制備柱、ZORBAX SB-C18分析柱(美國(guó)安捷倫公司)；Thermo Scientific Multiskan GO 酶標(biāo)儀(中生華美科技有限公司)。色譜甲醇(天津市康科德科技有限公司)；其他試劑均為分析純。

藥材蘆根2018年4月采集于河北省保定市白洋淀，由天津中醫(yī)藥大學(xué)李天祥教授鑒定為禾本科蘆葦屬蘆葦PhragmitescommunisTrin.的干燥根莖，標(biāo)本保存在天津大學(xué)藥物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室。

2 提取與分離

干燥的蘆根27.1 kg，用95%乙醇冷浸2周，依次用95%乙醇、60%乙醇回流提取2次(每次2 h)，得到浸膏4.1 kg，加適量蒸餾水混懸，然后依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取，得石油醚萃取部分(84.0 g)、乙酸乙酯萃取部分(188.0 g)、正丁醇萃取部分(571.0 g)。

取石油醚萃取物(78.0 g)，采用硅膠柱分離，石油醚-乙酸乙酯(100∶0～70∶30)梯度洗脫，得到6個(gè)部分(Fr.A1～Fr.A6)。將Fr.A2采用硅膠柱分離，以石油醚-丙酮(99∶1)作為洗脫劑，得到13個(gè)流分(Fr.a1～Fr.a13)。Fr.a7經(jīng)過(guò)硅膠柱分離，以石油醚-乙酸乙酯(98∶2)作為洗脫劑，共得120個(gè)流分(Fr.b1～Fr.b120)。經(jīng)過(guò)硅膠薄層色譜法檢識(shí)將Fr.b113～Fr.b119與Fr.a8合并，然后通過(guò)硅膠柱分離，以石油醚-二氯甲烷(60∶40)作為洗脫劑，再經(jīng)石油醚純化后，得到化合物22(7.0 mg)。

取乙酸乙酯萃取物(173.0 g)，采用硅膠柱分離，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇(100∶0∶0～0∶70∶30)梯度洗脫，得到8個(gè)部分(Fr.B1～Fr.B8)。Fr.B3經(jīng)過(guò)硅膠柱分離，以二氯甲烷-乙酸乙酯(100∶0～90∶10)梯度洗脫，得到5個(gè)流分(Fr.c1～Fr.c5)。Fr.c1經(jīng)甲醇重結(jié)晶后，得化合物20(3.0 mg)。Fr.c2通過(guò)硅膠柱分離，以石油醚-乙酸乙酯(86∶14)作為洗脫劑，再經(jīng)制備HPLC甲醇-水(30∶70)純化，得化合物21(5.0 mg)。Fr.c3經(jīng)二氯甲烷重結(jié)晶后，得化合物18(180.0 mg)。Fr.c4經(jīng)多次Sephadex LH-20柱(甲醇)分離，得化合物11(3.8 mg)、19(4.5 mg)。Fr.c5經(jīng)二氯甲烷重結(jié)晶后，得到化合物12(17.9 mg)。Fr.B4經(jīng)甲醇重結(jié)晶后，得化合物23(70.0 mg)。Fr.B5經(jīng)丙酮純化后，得化合物15(27.5 mg)。Fr.B6經(jīng)硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇(90∶10)作為洗脫劑，得到4個(gè)流分(Fr.d1～d4)。Fr.d1經(jīng)過(guò)制備HPLC甲醇-水(12∶88)純化，得化合物16(1.5 mg)、17(2.8 mg)。Fr.d2經(jīng)多次Sephadex LH-20柱(甲醇)分離，得化合物9(2.3 mg)。Fr.d4經(jīng)多次Sephadex LH-20柱(甲醇)分離，得化合物8(50.0 mg)。Fr.B7通過(guò)硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇(90∶10)作為洗脫劑，再經(jīng)過(guò)多次Sephadex LH-20柱(甲醇)分離，得化合物10(5.0 mg)。

將正丁醇部分分散于水中，過(guò)D101大孔吸附樹(shù)脂柱，依次用水、30%乙醇、95%乙醇進(jìn)行洗脫，收集各洗脫部分，減壓回收，得到水洗脫部分(353.0 g)、30%乙醇洗脫部分(RPB30，54.0 g)、95%乙醇洗脫部分(RPB95，65.0 g)。

取RPB30進(jìn)行硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇(9∶1～6∶4)梯度洗脫，得到3個(gè)部分(Fr.C1～Fr.C3)。Fr.C1(7.8 g)進(jìn)行硅膠柱分離，以乙酸乙酯-甲醇(95∶5)作為洗脫劑，得到46個(gè)流分(Fr.e1～Fr.e46)，合并Fr.e20～Fr.e30(4.0 g)進(jìn)行ODS反相柱色譜分離(甲醇-水10∶90～0∶100)，得到13個(gè)流分(Fr.f1～Fr.f13)，F(xiàn)r.f13(220.0 mg)經(jīng)制備HPLC甲醇-水(30∶70)純化，得化合物1(35.0 mg)、2(30.0 mg)。Fr.C2(6.5 g)進(jìn)行Sephadex LH-20柱(甲醇)分離，得到9個(gè)流分(Fr.g1～Fr.g9)，將Fr.g1～Fr.g3、Fr.e31～Fr.e46與Fr.f3～Fr.f8進(jìn)行合并(3.3 g)，進(jìn)行ODS反相柱甲醇-水(10∶90～0∶100)分離，得到27個(gè)流分(Fr.h1～Fr.h27)，F(xiàn)r.h26(30.0 mg)經(jīng)制備HPLC甲醇-水(22∶78)純化，得化合物3(7.0 mg)、4(3.5 mg)。Fr.h11(20.0 mg)經(jīng)制備HPLC甲醇-水(22∶78)純化，得化合物5(7.0 mg)、6(2.7 mg)。將Fr.g7～Fr.g9進(jìn)行合并(890.0 mg)，進(jìn)行聚酰胺柱分離，以二氯甲烷-甲醇(93∶7)作為洗脫劑，得到55個(gè)流分Fr.i1～Fr.i55，合并Fr.i18～Fr.i24(240.0 mg)，進(jìn)行Sephadex LH-20柱(甲醇)分離，得到12個(gè)流分(Fr.j1～Fr.j12)，合并Fr.j9～Fr.j12(30.0 mg)，經(jīng)甲醇重結(jié)晶得化合物13(10.0 mg)。將Fr.i35～Fr.i55進(jìn)行合并(100.0 mg)，進(jìn)行Sephadex LH-20柱(甲醇)分離，得到8個(gè)流分(Fr.k1～Fr.k8)，合并Fr.k4～Fr.k8(20.0 mg)，經(jīng)甲醇重結(jié)晶，然后進(jìn)行制備HPLC甲醇-水(41∶59)純化，得化合物14(3.0 mg)。將Fr.g4～Fr.g6進(jìn)行合并(1.2 g)，進(jìn)行硅膠柱分離，以二氯甲烷-甲醇(86∶14)作為洗脫劑，得34個(gè)流分(Fr.l1～Fr.l34)，將Fr.l16～Fr.l19進(jìn)行合樣(300.0 mg)，進(jìn)行硅膠柱分離，以乙酸乙酯-甲醇(90∶10)作為洗脫劑，得到20個(gè)流分(Fr.m1～Fr.m20)，合并Fr.m7～Fr.m8，得化合物24(105.0 mg)。Fr.C3(2.0 g)進(jìn)行硅膠柱分離，以乙酸乙酯-甲醇(99∶1)作為洗脫劑，得到63個(gè)流分 (Fr.n1～Fr.n63)，合并Fr.n56～Fr.n63(130.0 mg)，經(jīng)制備HPLC甲醇-水(40∶60)純化，得化合物7(17.0 mg)。合并Fr.n26～Fr.n54(1.0 g)，經(jīng)丙酮重結(jié)晶，得化合物25(200.0 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物3：白色粉末，紫外吸收254 nm有吸收，365 nm沒(méi)有吸收，提示可能是木脂素苷類化合物，ESI-MSm/z：581.2[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:6.57 (1H,s,H-6),6.38 (2H,s,H-2′,6′),4.30 (1H,d,J=6.0 Hz,H-7′),4.24 (1H,d,J=7.9 Hz,H-1″),3.94 (1H,dd,J=10.0,5.8 Hz,H-9b),3.86 (1H,dd,J=11.9,1.8 Hz,H-6″b),3.85 (3H,s,5-OCH3),3.74 (6H,s,3′,5′-OCH3),3.65 (1H,dd,J=11.9,5.4 Hz,H-6″a),3.52～3.58 (3H,m,H-9a,H-9′),3.32 (3H,s,3-OCH3),3.24～3.36 (3H,m,H-3″,4″,5″),3.17 (1H,dd,J=8.4,7.5 Hz,H-2″),2.78 (1H,dd,J=15.3,4.4 Hz,H-7b),2.57 (1H,dd,J=15.1,11.6 Hz,H-7a),1.88 (1H,m,H-8′),1.84 (1H,m,H-8);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ:149.0 (C-3′,5′),148.6 (C-5),147.7 (C-3),140.1 (C-4′),139.6 (C-4),134.6 (C-1′),130.1 (C-1),126.5 (C-2),107.7 (C-6),107.0 (C-2′,6′),104.6 (C-1″),78.1 (C-3″),78.0 (C-5″),75.2 (C-2″),74.9 (C-9),71.7 (C-4″),63.3 (C-9′),62.8 (C-6″),60.0 (3-OCH3),56.8 (3′,5′-OCH3),56.6 (5-OCH3),50.1 (C-8′),42.7 (C-7′),38.2 (C-8),34.0 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]報(bào)道基本一致，故鑒定為(-)-南燭木樹(shù)脂酚9-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。

化合物4：白色粉末，紫外吸收254 nm有吸收，365 nm沒(méi)有吸收，提示可能是木脂素苷類化合物，ESI-MSm/z：581.2[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:6.57 (1H,s,H-6),6.42 (2H,s,H-2′,6′),4.60 (1H,d,J=4.6 Hz,H-7′),4.31 (1H,d,J=7.8 Hz,H-1″),3.85 (3H,s,5-OCH3),3.81～3.89 (2H,m,H-6″b,H-9′b),3.74 (6H,s,3′,5′-OCH3),3.65 (1H,dd,J=12.0,5.7 Hz,H-6″a),3.60 (1H,dd,J=11.5,5.1 Hz,H-9b),3.52 (1H,dd,J=11.5,5.9 Hz,H-9a),3.48 (1H,dd,J=10.0,5.8 Hz,H-9′a),3.22 (3H,s,3-OCH3),3.21～3.39 (4H,m,H-2″,3″,4″,5″),2.96 (1H,dd,J=16.9,5.5 Hz,H-7b),2.71 (1H,dd,J=16.9,11.5 Hz,H-7a),2.13 (1H,m,H-8′),2.00 (1H,m,H-8);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ:149.1 (C-5),148.5 (C-3′,5′),146.6 (C-3),138.6 (C-4),135.1 (C-4′),134.9 (C-1′),128.1 (C-1),127.2 (C-2),109.5 (C-2′,6′),107.6 (C-6),104.7 (C-1″),78.3 (C-3″),78.1 (C-5″),75.5 (C-2″),72.0 (C-4″),71.5 (C-9′),65.2 (C-9),63.3 (C-6″),60.0 (3-OCH3),57.0 (3′,5′-OCH3),56.5 (5-OCH3),42.1 (C-8′),41.9 (C-7′),35.3 (C-8),34.0 (C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道基本一致，故鑒定為(-)-7′-表-南燭木樹(shù)脂酚9′-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。

化合物8：淺黃色固體，ESI-MSm/z：417.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ:8.20 (1H,d,J=8.9 Hz,H-6′),7.88 (1H,d,J=15.3 Hz,H-β),7.87 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2,6),7.77 (1H,d,J=15.3 Hz,H-α),7.09 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3,5),6.41 (1H,dd,J=8.9,2.3 Hz,H-5′),6.28 (1H,d,J=2.3 Hz,H-3′),5.37 (1H,d,J=4.9 Hz,2″-OH),5.28 (1H,d,J=7.3 Hz,H-1″),5.14 (1H,d,J=4.6 Hz,3″-OH),5.07 (1H,d,J=5.3 Hz,4″-OH),4.61 (1H,t,J=5.8 Hz,6″-OH),3.70 (1H,m,H-6″b),3.46 (1H,m,H-6″a),3.40 (1H,m,H-5″),3.28 (1H,m,H-3″),3.26 (1H,m,H-2″),3.17 (1H,m,H-4″);13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ:191.4 (C=O),166.1 (C-4′),165.8 (C-2′),159.4 (C-4),143.5 (C-β),133.0 (C-6′),130.7 (C-2,6),128.3 (C-1),119.1 (C-α),116.5 (C-3,5),113.0 (C-1′),108.2 (C-5′),103.0 (C-3′),99.9 (C-1″),77.1 (C-3″),76.6 (C-5″),73.2 (C-2″),69.7 (C-4″),60.7 (C-6″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道基本一致，故鑒定為異甘草苷。

化合物11：黃色固體，ESI-MSm/z：337.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:7.98 (1H,d,J=15.6 Hz,H-β),7.94 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),7.56 (1H,d,J=15.6 Hz,H-α),7.50 (1H,s,H-6),6.89 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),6.47 (1H,s,H-3),6.26 (1H,dd,J=17.8,10.3 Hz,H-2″),5.00 (2H,m,H-3″),3.89 (3H,s,-OCH3),1.49 (6H,s,-CH3×2);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ:191.9 (C=O),163.5 (C-4′),161.5 (C-4),160.6 (C-2),149.1 (C-2″),142.3 (C-β),132.1 (C-1′),131.6 (C-2′,6′),130.2 (C-6),128.5 (C-5),119.4 (C-α),116.4 (C-3′,5′),115.8 (C-1),110.7 (C-3″),100.9 (C-3),56.1 (OCH3),41.1 (C-1″),27.5 (C-4″,5″)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道基本一致，故鑒定為甘草查爾酮 A。

化合物12：淺黃色固體，在365 nm下呈暗紫色熒光，F(xiàn)eCl3乙醇顯藍(lán)色斑點(diǎn)，硫酸乙醇顯黃色斑點(diǎn)，根據(jù)以上結(jié)果初步判斷是黃酮類化合物，ESI-MSm/z：329.1[M-H]-。1H- NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ:7.33 (2H,s,H-2′,6′),6.98 (1H,s,H-3),6.56 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.20 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),3.88 (6H,s,-OCH3×2)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[13]報(bào)道基本一致，故鑒定為小麥黃素。

化合物13：淺黃色粉末，ESI-MSm/z：637.2[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ:12.50 (1H,s,12-OH),7.36 (2H,s,H-2′,6′),7.05 (1H,s,H-3),6.86 (1H,d,J=1.9 Hz,H-8),6.48 (1H,d,J=1.9 Hz,H-6),5.08 (1H,d,J=7.5 Hz,H-1″),4.54 (1H,brs,H-1?),3.89 (6H,s,3′,5′-OCH3),1.07 (3H,d,J=6.3 Hz,5?-CH3);13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ:182.3 (C-4),164.6 (C-2),163.2 (C-7),161.5 (C-9),157.2 (C-5),148.6 (C-3′,5′),140.8 (C-4′),120.4 (C-1′),105.7 (C-10),104.9 (C-2′,6′),104.1 (C-3),100.8 (C-1″),100.2 (C-1?),99.7 (C-6),95.6 (C-8),76.6 (C-3″),75.9 (C-5″),73.4 (C-4?),72.4 (C-2″),71.0 (C-2?),70.6 (C-3?),69.9 (C-4″),68.6 (C-5?),66.3 (C-6″),56.7 (3′,5′-OCH3),18.0 (C-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道基本一致，故鑒定為苜蓿素-7-O-蕓香糖苷。

化合物14：淺黃色粉末，ESI-MSm/z：637.2[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,DMSO-d6)δ:12.95 (1H,s,5-OH),7.34 (2H,s,H-2′,6′),7.01 (1H,s,H-3),6.87 (1H,brs,H-8),6.37 (1H,brs,H-6),5.20 (1H,d,J=7.5 Hz,H-1″),5.12 (1H,s,H-1?),3.89 (6H,s,3′,5′-OCH3),1.20 (3H,d,J=6.3 Hz,5?-CH3);13C-NMR (150 MHz,DMSO-d6)δ:182.3 (C-4),164.6 (C-2),163.2 (C-7),161.5 (C-9),157.2 (C-5),148.6 (C-3′,5′),140.5 (C-4′),120.5 (C-1′),105.7 (C-10),104.9 (C-2′,6′),104.1 (C-3),100.8 (C-1?),100.2 (C-1″),99.7 (C-6),95.6 (C-8),77.2 (C-5″),77.2 (C-2″),76.5 (C-3″),71.9 (C-4″),70.5 (C-4?),70.4 (C-3?),69.8 (C-2?),68.3 (C-5?),60.6 (C-6″),57.3 (3′,5′-OCH3),18.0 (C-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[14]報(bào)道基本一致，故鑒定為苜蓿素-7-O-新橙皮糖苷。

化合物18：淺黃色結(jié)晶，ESI-MSm/z：163.0[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:7.60 (1H,d,J=15.9 Hz,H-7),7.44 (2H,d,J=8.6 Hz,H-2,6),6.81 (2H,d,J=8.6 Hz,H-3,5),6.28 (1H,d,J=15.9 Hz,H-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]報(bào)道基本一致，故鑒定為對(duì)羥基桂皮酸。

化合物19：白色結(jié)晶，ESI-MSm/z：193.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:7.60 (1H,d,J=15.9 Hz,H-7),7.18 (1H,d,J=1.9 Hz,H-2),7.06 (1H,dd,J=8.2,1.9 Hz,H-6),6.81 (1H,d,J=8.2 Hz,H-5),6.31 (1H,d,J=15.9 Hz,H-8),3.90 (3H,s,OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]報(bào)道基本一致，故鑒定為反式阿魏酸。

化合物20：淺粉色結(jié)晶，ESI-MSm/z：271.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ:7.02 (2H,d,J=1.9 Hz,H-2,2′),7.00 (2H,dd,J=8.2,1.9 Hz,H-6,6′),6.90 (2H,d,J=8.2 Hz,H-5,5′),6.88 (2H,s,H-7,7′),5.62 (2H,s,OH),3.95 (6H,s,OCH3);13C-NMR (150 MHz,CDCl3)δ:146.9 (C-3,3′),145.5 (C-4,4′),130.5 (C-1,1′),126.7 (C-7,7′),120.3 (C-6,6′),114.7 (C-5,5′),108.3 (C-2,2′),56.1 (OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]報(bào)道基本一致，故鑒定為(E)-3,3′-二甲氧基-4,4′-二羥基二苯乙烯。

化合物21：淺黃色固體，ESI-MSm/z：181.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CDCl3)δ:9.82 (1H,s,CHO),7.16 (2H,s,Ar-H),6.03 (1H,s,OH),3.98 (6H,s,OCH3×2)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[21]報(bào)道基本一致，故鑒定為丁香醛。

化合物24：白色粉末，ESI-MSm/z：179.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,CD3OD)δ:4.09 (1H,m,H-3),4.09 (1H,m,H-4),4.06 (1H,m,H-5′),4.06 (1H,m,H-6′a),3.92 (1H,m,H-4′),3.87 (1H,m,H-5),3.87 (1H,m,H-6a),3.82 (1H,m,H-3′),3.74 (1H,m,H-1′a),3.74 (1H,m,H-6′b),3.70 (1H,m,H-6b),3.68 (1H,m,H-1a),3.67 (1H,m,H-1′b),3.65 (1H,m,H-1b);13C-NMR (150 MHz,CD3OD)δ:103.2 (C-2),99.2 (C-2′),83.3 (C-5),77.9 (C-4),77.6 (C-3),71.8 (C-4′),71.2 (C-5′),69.5 (C-3′),66.0 (C-1′),64.6 (C-6′),64.5 (C-6),64.2 (C-1)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[24]報(bào)道基本一致，故鑒定為果糖。

化合物25：白色粉末，ESI-MSm/z：235.1[M-H]-。1H-NMR (600 MHz,D2O)δ:4.02 (1H,brs,H-3′),3.95 (2H,s,H-4′,5′),3.87 (1H,d,J=12.6 Hz,H-6′b),3.82 (2H,d,J=1.7 Hz,H-1′a,1′b),3.75 (1H,dd,J=12.6,1.7 Hz,H-6′a),3.55 (2H,m,H-1),1.59 (2H,m,H-2),1.40 (2H,m,H-3),0.94 (3H,t,H-4);13C-NMR (150 MHz,D2O)δ:100.5 (C-2′),69.7 (C-4′),69.2 (C-5′),68.4 (C-3′),63.9 (C-6′),61.4 (C-1′),60.8 (C-1),34.4 (C-2),18.8 (C-3),13.2 (C-4)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[25]報(bào)道基本一致，故鑒定為正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷。

4 抗氧化活性篩選

參考文獻(xiàn)[26]，采用DPPH自由基清除試驗(yàn)，對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行抗氧化活性測(cè)定并計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC50)值，以維生素C為陽(yáng)性對(duì)照。10個(gè)化合物顯示出一定程度的抗氧化活性，見(jiàn)表1，化合物1～4、7表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性，其IC50值低于陽(yáng)性對(duì)照維生素C。

5 α-葡萄糖苷酶抑制活性試驗(yàn)篩選

參考文獻(xiàn)[27]，采用PNPG法對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行α-葡萄糖苷酶抑制活性測(cè)定并計(jì)算IC50

表1 抗氧化活性試驗(yàn)IC50值Tab.1 IC50 values in antioxidant activities tests

值，以阿卡波糖為陽(yáng)性對(duì)照。5個(gè)化合物顯示出一定程度的α-葡萄糖苷酶抑制活性，見(jiàn)表2，化合物2～4和11表現(xiàn)出較強(qiáng)的α-葡萄糖苷酶抑制活性，其中化合物11的活性最強(qiáng)，其IC50值為180.42 μmol/L。

表2 α-葡萄糖苷酶抑制活性試驗(yàn)IC50值Tab.2 IC50 values in α-glucosidase inhibitory activities

6 討論

本實(shí)驗(yàn)從蘆根(干)分離鑒定了25個(gè)化合物，主要包括木脂素苷類、黃酮類及苯丙素類等成分，其中化合物2～11、13～17、20和23～25均為首次從該植物、該屬植物中分離得到。體外生物活性測(cè)試結(jié)果表明，木脂素苷類、黃酮類、苯丙素類成分具有不同程度的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性，其中木脂素苷類成分的含量高，種類多，也表現(xiàn)出強(qiáng)的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。本研究為闡明蘆根抗氧化和降血糖作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，尋找具有抗氧化活性和降血糖活性的化學(xué)成分以及蘆根的進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)提供了科學(xué)依據(jù)。