王 艷 李 園 高 穎 褚福浩 蘇澤琦 丁 霞 （北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，北京 102488）

胃癌（gastric cancer，GC）是全球常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和病死率分別位居惡性腫瘤的第五和第三［1］。根據(jù)Lauren 分型，可將胃腺癌分為腸型、彌漫型和混合型，其中腸型胃癌是胃癌中最常見的類型，其發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的、多過程的級聯(lián)反應(yīng)模式，從慢性萎縮性胃炎（chronic atrophic gastritis，CAG）到腸上皮化生（intestinal metaplasia，IM），再到異型增生（dysplasia，Dys）是涉及多個(gè)基因及通路的復(fù)雜生物學(xué)過程。IM 作為胃癌前病變的重要階段，該病理階段的形成和進(jìn)展可增加腸型胃癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)［2］。因此，尋找IM 的潛在關(guān)鍵靶點(diǎn)，明確其發(fā)生發(fā)展機(jī)制，對IM及腸型胃癌的早期診斷及預(yù)防具有重要意義和價(jià)值。

近年來，隨著生物信息學(xué)的發(fā)展和測序技術(shù)的應(yīng)用，從轉(zhuǎn)錄組、蛋白組水平研究疾病的發(fā)生發(fā)展機(jī)制已成為普遍關(guān)注的熱點(diǎn)。本研究利用生物信息學(xué)技術(shù)，挖掘公共基因芯片數(shù)據(jù)庫（Gene Expression Omnibus，GEO）中包含IM 的基因芯片，確定IM 組織與正常胃黏膜組織之間的差異表達(dá)基因（differen‐tially expressed genes，DEGs），隨后進(jìn)行GO 分析和KEGG 通路富集分析，構(gòu)建蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)，尋找關(guān)鍵基因，篩選靶向IM關(guān)鍵基因的中藥，為探究IM 發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制及治療藥物提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 基因表達(dá)譜芯片的篩選 本研究從美國國立生物技術(shù)信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）的GEO 數(shù)據(jù)庫（http：//www. ncbi.nlm.nih.gov/）中，以“（gastric OR gastritis）OR stomach”為檢索條件，通過閱讀全文篩選出包含IM的基因芯片數(shù)據(jù)集，獲得GPL18990 和GPL17077 平臺(tái)的GSE78523和GSE60427兩個(gè)數(shù)據(jù)集，從中選取IM 樣本和正常胃黏膜樣本進(jìn)行分析［3-5］。

1.2 數(shù)據(jù)處理及差異基因分析 利用R 語言nor‐malizeBetweenArrays 函數(shù)對數(shù)據(jù)進(jìn)行背景矯正和歸一化處理，使數(shù)據(jù)具有可比性，并對校正后的數(shù)據(jù)進(jìn)行繪圖。采用Limma 包對IM 組織與正常組織進(jìn)行差異基因篩選，篩選標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05，|Log2FC|>1；利用pheatmap 包對差異基因進(jìn)行熱圖的繪制，直觀地展現(xiàn)差異基因在每個(gè)樣本中的表達(dá)情況，利用火山圖分別展示2 個(gè)數(shù)據(jù)集中上調(diào)及下調(diào)的差異基因。取2 個(gè)數(shù)據(jù)集所獲得差異基因的交集，并利用在線工具繪制韋恩圖（http：//bioinformatics. psb.ugent.be/webtools/Venn/），獲得共同表達(dá)的DEGs。

1.3 GO 富集分析和KEGG 通路富集分析 利用DAVID6.8 在線工具（https：//david. ncifcrf. gov/）對上述共同表達(dá)差異基因進(jìn)行GO 富集分析及KEGG通路分析，以P<0.05為篩選標(biāo)準(zhǔn)。

1.4 PPI 的構(gòu)建 通過STRING 在線數(shù)據(jù)庫（https：//string-db.org/）對2個(gè)數(shù)據(jù)集共有的DEGs構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)，置信度評分≥0.4為顯著；將原始數(shù)據(jù)輸出并導(dǎo)入Cytoscape3.6.1（https：//cytoscape. org/）軟件中進(jìn)行PPI 網(wǎng)絡(luò)的可視化［6］，在網(wǎng)絡(luò)中，節(jié)點(diǎn)表示差異基因所編碼的蛋白質(zhì)，與該節(jié)點(diǎn)的連線代表蛋白間的相互作用，連接數(shù)為該節(jié)點(diǎn)的degree，利用Cytohubba 插件篩選PPI 網(wǎng)絡(luò)中degree 得分前9 的關(guān)鍵基因，MCODE插件篩選出重要的模塊。

1.5 靶點(diǎn)對接及中藥預(yù)測 將關(guān)鍵基因與Coremine Medical 數(shù)據(jù)庫（http：//www. coremine. com/）相互映射，篩選出靶向IM 關(guān)鍵基因的中藥，以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 差異基因的篩選 本研究納入2組基因芯片，其中GSE78523 數(shù)據(jù)集包括15 例正常胃黏膜樣本，14例IM 胃黏膜樣本（6例不完全腸化生，8例完全腸化生）；GSE60427 數(shù)據(jù)集包括8 例正常胃黏膜樣本，8 例IM 胃黏膜樣本。所有數(shù)據(jù)均經(jīng)affy 包標(biāo)準(zhǔn)化處理［7］，根據(jù)處理后的箱線圖（圖1）顯示，樣本的基因表達(dá)譜數(shù)據(jù)一致性較好，可以進(jìn)行差異分析。GSE78523 數(shù)據(jù)集共篩選出458 個(gè)差異基因，其中上調(diào)基因384個(gè)，下調(diào)基因74個(gè)；GSE60427數(shù)據(jù)集共篩選出1 766個(gè)差異基因，其中上調(diào)基因1 215個(gè)，下調(diào)基因551個(gè)；通過火山圖（圖2）可以直觀地顯示兩個(gè)數(shù)據(jù)集中總體基因表達(dá)情況，橫坐標(biāo)log2（fold change）為差異表達(dá)倍數(shù)的log2轉(zhuǎn)換，值≥1 表示上調(diào)的基因，≤?1為下調(diào)的基因，差異較大的基因分布在X 軸的兩端，縱坐標(biāo)?log10（p-value）代表對p-value 進(jìn)行?log10的轉(zhuǎn)化，值越大說明差異越顯著，圖上的每個(gè)點(diǎn)代表1 個(gè)基因，將|logFC|>3 的基因在圖上進(jìn)行標(biāo)注。通過熱圖（圖3A、B）反映差異基因在IM 組織和正常組織中的表達(dá)情況，橫坐標(biāo)表示樣本聚類，縱坐標(biāo)表示基因聚類；通過韋恩圖（圖3C）發(fā)現(xiàn)兩個(gè)數(shù)據(jù)集包含135個(gè)共同的DEGs。

2.2 GO富集分析和KEGG通路分析 運(yùn)用DAVID數(shù)據(jù)庫對135 個(gè)DEGs 進(jìn)行GO 和KEGG 通路富集，GO 分析包括生物學(xué)過程（biological processes，BP）、細(xì)胞成分（cell component，CC）、分子功能（molecular function，MF）三個(gè)部分。BP 相關(guān)變化主要涉及“O-聚糖合成（O-glycan processing）”“消化（digestion）”“細(xì)胞增殖的正向調(diào)控（positive regulation of cell pro‐liferation）”“蛋白水解（proteolysis）”等13 個(gè)功能簇；CC 相關(guān)變化主要涉及“細(xì)胞外空間（xtracellular space）”“質(zhì)膜的組成部分（integral component of plasma membrane）”“細(xì)胞外泌體（extracellular exo‐some）”“質(zhì)膜（plasma membrane）”“膜的組成部分（integral component of membrane）”等功能簇；MF 相關(guān)變化主要涉及“病毒受體活性（virus receptor activity）”“轉(zhuǎn)錄阻遏活性，RNA 聚合酶Ⅱ核心啟動(dòng)子近端區(qū)域序列特異性結(jié)合（transcriptional repressor activity，RNA polymerase Ⅱcore promoter proximal region sequence-specific binding）”“Ras 鳥嘌呤核苷酸交換因子活性（Ras guanyl-nucleotide exchange factor activity）”等功能簇。KEGG 通路分析顯示基因富集于“胃酸分泌（gastric acid secretion）”“氮代謝（nitro‐gen metabolism）”“腎素-血管緊張素系統(tǒng)（reninangiotensin system）”“蛋白質(zhì)的消化吸收（protein digestion and absorption）”“胰腺分泌（pancreatic secretion）”共5 條信號通路（表1）。對以上GO 及KEGG 結(jié)果采用R 語言ggplot2 包進(jìn)行可視化呈現(xiàn)（圖4）。

表1 KEGG分析Tab.1 KEGG analysis

圖4 DEGs的GO功能及KEGG富集結(jié)果Fig.4 GO function of DEGs and KEGG enrichment results

2.3 PPI網(wǎng)絡(luò)分析和關(guān)鍵基因篩選 利用Cytoscape中的Cytohubba插件找出關(guān)鍵基因，將degree≥5的基因定義為關(guān)鍵基因，分別為MUC5AC、DEFA5、MUC17、ALPI、SST、FOXA2、MUC13、GCNT3、OLFM4，節(jié)點(diǎn)顏色越深代表分值越高。根據(jù)MODE 插件對模塊進(jìn)行重要程度分析，篩選代表性的模塊，其中核心模塊打分值為3，包含GCNT3、MUC5AC、MUC17、MUC13共4個(gè)基因。見圖5。

圖5 DEGs的PPI網(wǎng)絡(luò)、關(guān)鍵基因及核心模塊Fig.5 PPI network，key genes and core modules of DEGs

2.4 根據(jù)關(guān)鍵基因預(yù)測治療中藥 利用Coremine Medical 數(shù)據(jù)庫對關(guān)鍵基因進(jìn)行IM 治療潛在中藥的篩選，結(jié)果顯示南沙參（P=0.002 28）、桔梗（P=0.002 29）、半夏（P=0.003 29）、藿香（P=0.006 67）、浙貝母（P=0.090 1）、甘草（P=0.012 7）、大黃（P=0.014）、車前草（P=0.015 4）、車前子（P=0.016 2）、款冬花（P=0.016 3）、瓜蔞（P=0.020 7）、瓜蔞皮（P=0.020 7）、瓜蔞子（P=0.020 8）、野菊花（P=0.021 2）、薏苡仁（P=0.022 2）、天花粉（P=0.023）、黨參（P=0.025）、甘草（P=0.027 1）、桑葉（P=0.029 5）、山茱萸（P=0.029 7）、青蒿（P=0.033 7）與MUC5AC 相對應(yīng)；蘄蛇（P=0.035 9）與ALPI相對應(yīng)；木鱉子（P=0.027 8）、枳實(shí)（P=0.046 3）、蒼術(shù)（P=0.047 2）與SST相對應(yīng)；鹿角（P=0.007 4）與FOXA2 相對應(yīng)；蠶豆（P=0.011 3）與MUC13相對應(yīng)；蓖麻子（P=0.019 9）與OLFM4相對應(yīng)。這些中藥可能作為IM的潛在治療藥物。

3 討論

IM 是指胃黏膜的正常上皮細(xì)胞被腸型上皮細(xì)胞取代，出現(xiàn)杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞及吸收上皮細(xì)胞的一種病理性形態(tài)學(xué)改變，被認(rèn)為是胃癌癌前病變。本研究利用GEO 數(shù)據(jù)庫檢索得到IM 基因芯片數(shù)據(jù)集（GSE78523、GSE60427），篩選出135 個(gè)共同DEGs 進(jìn)行生物信息學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)IM 的發(fā)生可能與單核細(xì)胞趨化性、白細(xì)胞遷移、細(xì)胞外泌體等炎癥相關(guān)生物過程及胃酸分泌通路有關(guān)，其結(jié)果有助于揭示IM 發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制，從基因?qū)用嫱诰虺鯥M 發(fā)生的關(guān)鍵基因，可能作為IM 的潛在生物標(biāo)志物，篩選出可干預(yù)IM 靶點(diǎn)的中藥，為臨床用藥提供依據(jù)。

3.1 炎癥反應(yīng)是IM 發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素 由于Hp感染或其他環(huán)境因素影響，白細(xì)胞介導(dǎo)慢性胃黏膜炎癥，導(dǎo)致多灶性腺體萎縮、壁細(xì)胞減少及酸分泌功能的降低，隨之出現(xiàn)以杯狀細(xì)胞為主的IM。單核細(xì)胞趨化性、白細(xì)胞遷移等生物功能及細(xì)胞外泌體等細(xì)胞組分參與了細(xì)胞的炎癥反應(yīng)過程。免疫細(xì)胞被認(rèn)為是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分，嗜中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞是腫瘤微環(huán)境最豐富的免疫細(xì)胞［8］。胃部炎癥性疾病及胃癌前病變過程中可見嗜中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等白細(xì)胞聚集，其分泌的淋巴因子可募集巨噬細(xì)胞于炎癥和腫瘤部位，發(fā)揮抗炎及殺傷癌變細(xì)胞的作用，但嗜中性粒細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生活性氧（ROS）及活性氮物質(zhì)（RNS），并在細(xì)胞中積累導(dǎo)致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化［6，9］。血液中的單核細(xì)胞游走進(jìn)入組織器官發(fā)育成熟為巨噬細(xì)胞，巨噬細(xì)胞常出現(xiàn)于急性炎癥的后期、慢性炎癥和非化膿性炎癥等，具有較強(qiáng)的吞噬能力，參與特異性免疫反應(yīng)，攝取并呈遞抗原，巨噬細(xì)胞的表型和功能受周圍微環(huán)境的調(diào)節(jié)，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)感染與炎癥時(shí)，巨噬細(xì)胞首先表現(xiàn)出M1 表型，表達(dá)和分泌經(jīng)典促炎細(xì)胞因子和趨化因子，通過免疫識(shí)別發(fā)揮抗腫瘤作用，但長期的炎癥反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致組織損傷，此時(shí)，M2 型巨噬細(xì)胞可產(chǎn)生VEGF 和抗炎分子，起到減輕炎癥反應(yīng)，促進(jìn)組織修復(fù)的作用，在腫瘤微環(huán)境中，M2 型巨噬細(xì)胞可通過促進(jìn)腫瘤生長、遷移侵襲、免疫抑制等作用發(fā)揮促癌效應(yīng)［8，10-12］。M1、M2 型巨噬細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡可維持人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，研究發(fā)現(xiàn)，M2 型巨噬細(xì)胞是壁細(xì)胞丟失后誘導(dǎo)化生的關(guān)鍵免疫細(xì)胞，在IM中表達(dá)增多［13］。

細(xì)胞外泌體是一種具有雙層磷脂膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞外囊泡，攜帶分泌細(xì)胞中的生物活性物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)等，將其傳遞到靶器官，參與細(xì)胞免疫、抗原呈遞等多種生物反應(yīng)過程。腫瘤來源的循環(huán)外泌體可調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的極化，誘導(dǎo)向M2 型促腫瘤巨噬細(xì)胞的極化，還可增強(qiáng)嗜中性粒細(xì)胞向癌細(xì)胞的募集來促進(jìn)腫瘤發(fā)生［14-16］。外泌體包含腫瘤細(xì)胞的遺傳特征，可作為胃癌早期診斷、預(yù)后預(yù)測及治療效果評估的生物標(biāo)志［17］，但其在IM 發(fā)生、發(fā)展中的作用機(jī)制尚未見報(bào)道，值得進(jìn)一步深入研究。

3.2 胃酸分泌異常誘發(fā)胃黏膜IM病理改變 正常胃黏膜處于不斷地更新修復(fù)中，表面上皮不斷地脫落，并由胃腺頸部干細(xì)胞增生分化，向上移行分化為表面黏液細(xì)胞，向下遷移分化為其他胃底腺細(xì)胞。位于胃體的壁細(xì)胞通過乙酰膽堿、組胺和胃泌素的刺激導(dǎo)致胃酸分泌，由于壁細(xì)胞數(shù)量下降，腺體萎縮，胃酸分泌量減少，加速CAG 惡性轉(zhuǎn)化，導(dǎo)致IM 和Dys 發(fā)生，進(jìn)而誘發(fā)癌變［18-19］。除了分泌胃酸和內(nèi)因子外，壁細(xì)胞還具有誘導(dǎo)自身和胃上皮細(xì)胞分化的功能。壁細(xì)胞功能正常時(shí)，胃腺頸部的干細(xì)胞分化為成熟細(xì)胞，腺體完整地再生。當(dāng)壁細(xì)胞功能缺陷時(shí)，胃干細(xì)胞可能分化為成熟的腸細(xì)胞，胃腺以腸化生的形式再生。當(dāng)壁細(xì)胞功能喪失時(shí)，干細(xì)胞不能成功分化為成熟細(xì)胞，未成熟細(xì)胞在胃黏膜組織中的積累，形成不同嚴(yán)重程度的異性增生和不同分化程度的癌癥［20］。胃壁細(xì)胞數(shù)量改變及泌酸功能的喪失是IM發(fā)展為胃腺癌的先決條件。

通過GO 富集和KEGG 功能分析發(fā)現(xiàn)，IM 的發(fā)生涉及鈉離子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)、鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)、碳酸氫鹽運(yùn)輸、膽囊收縮素信號通路，且與胃酸分泌功能密切相關(guān)。胃酸不僅可以消化食物，同時(shí)高酸性環(huán)境也可殺死攝入的微生物，抑制細(xì)菌的過度生長，構(gòu)成抵御食源性微生物的第一道防線［18，21］。胃酸由胃壁細(xì)胞分泌，由于胃液中H+的濃度為150～170 mmol/L，比血漿中的H+高出3 000 000～4 000 000倍，因此，壁細(xì)胞逆濃度梯度分泌H+依靠其頂膜上的H+-K+-ATP酶來完成。黏液-HCO3?屏障是胃黏膜保護(hù)的第一道防線，可有效保護(hù)胃黏膜免受胃腔內(nèi)胃酸和胃蛋白酶的損傷。除黏液-碳酸氫鹽，胃黏膜上皮細(xì)胞的頂膜和相鄰細(xì)胞側(cè)膜間存在緊密連接，可防止細(xì)胞內(nèi)鈉離子、鉀離子外流及氫離子內(nèi)流，成為保護(hù)胃黏膜的第二道防線。IM 過程中鈉離子、鉀離子、碳酸氫鹽運(yùn)輸?shù)壬锕δ馨l(fā)生改變，導(dǎo)致胃酸分泌減少，胃上皮細(xì)胞破壞，繼而被腸化生細(xì)胞取代。膽囊收縮素（CCK）信號通路也參與調(diào)控胃酸分泌的過程，膽囊收縮素受體（CCKR）主要包括兩大類：CCK-A和CCK-B 受體。分泌生長抑素（SST）的D 細(xì)胞上存在CCK-A 受體，CCK 通過與CCK-A 受體結(jié)合，導(dǎo)致D 細(xì)胞釋放生長抑素抑制胃的運(yùn)動(dòng)和分泌，延緩胃排空，胃竇的G 細(xì)胞分泌胃泌素作用于壁細(xì)胞上的CCK-B 受體，刺激胃酸分泌，也可通過影響腸嗜鉻樣（ECL）細(xì)胞分泌組胺間接刺激壁細(xì)胞分泌胃酸［22-24］。整體情況下，CCK 對胃酸的分泌主要表現(xiàn)為抑制作用，與IM 階段胃酸分泌減少相吻合，提示結(jié)果的可靠性。

3.3 關(guān)鍵基因可能成為IM潛在治療靶點(diǎn) 本研究分析出的關(guān)鍵基因包括MUC5AC、DEFA5、MUC17、ALPI、SST、FOXA2、MUC13、GCNT3、OLFM4，其中DEFA5、MUC17、MUC13、ALPI、GCNT3、OLFM4表達(dá)上調(diào)，MUC5AC、SST、FOXA2 表達(dá)下調(diào)。黏蛋白（MUC）是胃黏膜屏障的關(guān)鍵成分，為上皮表面提供保護(hù)和潤滑作用，在正常組織中以細(xì)胞和組織特異性模式表達(dá)，其改變可被視為胃黏膜惡性轉(zhuǎn)化的分子標(biāo)志，有望成為早期篩查/診斷標(biāo)志物［25］。其中，胃黏液蛋白MUCA5AC 表達(dá)于正常胃黏膜小凹上皮表面，是胃黏膜表面黏液層的主要成分［26］。研究發(fā)現(xiàn)MUC5AC 在正常胃黏膜、IM、Dys 及GC 組織中表達(dá)逐漸降低，其低表達(dá)可能是胃癌預(yù)后不良的指標(biāo)［27-28］。黏蛋白17（MUC17）主要在腸道中表達(dá)，可維持腸上皮完整性，在胃癌組織和細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)，其敲低可降低胃癌細(xì)胞的遷移和侵襲能力［29-31］。MUC13 是一種跨膜黏蛋白，在正常胃黏膜中不表達(dá)，而在IM 與胃癌中經(jīng)常過表達(dá)，其高表達(dá)可增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的遷移和侵襲能力，與腸型胃癌相關(guān)聯(lián)［32-33］。此外，SST是由胃腸道黏膜D 細(xì)胞分泌的一種肽類激素，可抑制胃酸分泌，發(fā)揮保護(hù)胃黏膜的作用，在胃癌組織中呈低表達(dá)，其高表達(dá)可抑制胃癌細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力［34-35］。GCNT3 已被建議作為結(jié)直腸癌預(yù)后的生物標(biāo)志物，其過表達(dá)可降低結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖和侵襲能力［36］。防御素是上皮細(xì)胞表面產(chǎn)生的抗微生物肽，是先天宿主防御的組成部分，α-防御素（DEFA5）由小腸隱窩基部的Paneth細(xì)胞表達(dá)，參與Paneth細(xì)胞的分化，是腸道固有免疫的關(guān)鍵效應(yīng)分子，對巨噬細(xì)胞和T 淋巴細(xì)胞均有趨化作用［37］。腸堿性磷酸酶（ALPI）在成熟的小腸上皮細(xì)胞中高表達(dá)，IM 發(fā)生過程中胃部出現(xiàn)Paneth 細(xì)胞等腸上皮細(xì)胞，因此DEFA5、ALPI 表達(dá)上調(diào)。OLFM4 與GC 細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲有關(guān)，可促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展，在胃癌組織中過度表達(dá)［38］。FOXA2 在胃癌組織中下調(diào)，與胃癌預(yù)后不良有關(guān)，其過表達(dá)可抑制胃癌細(xì)胞增殖［39］。以上基因均在胃腸中表達(dá)，與消化道癌癥相關(guān)，其在IM 階段已能檢測出表達(dá)量差異，可作為早期干預(yù)治療、預(yù)防IM向胃癌進(jìn)展的靶點(diǎn)。

3.4 相關(guān)中藥可能是IM治療的潛在藥物 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對IM尚無特效療法，而中醫(yī)藥可改善患者臨床癥狀，具有潛在的療效優(yōu)勢。中醫(yī)學(xué)中并沒有腸上皮化生的病名，現(xiàn)代醫(yī)家結(jié)合患者臨床癥狀將IM歸屬于“胃痛”“嘈雜”“痞滿”等范疇，其核心病機(jī)以胃陰不足、氣陰兩虛為主，兼見陽虛、氣虛、氣滯、陰虛、熱、濕、痰等，治以益氣健脾，養(yǎng)陰解毒為主［40-42］。本研究通過Coremine Medical 數(shù)據(jù)庫篩選治療IM 的潛在中藥，大致可分為5類：理氣藥（枳實(shí)、桔梗）、補(bǔ)益藥（黨參、甘草、沙參）、祛濕藥（藿香、蒼術(shù)）、化痰藥（半夏、瓜蔞）、清熱解毒藥（野菊花、車前草）。枳實(shí)破氣消積，化痰除痞；桔梗宣肺、祛痰，宣肺氣以降胃氣；黨參補(bǔ)脾生津；沙參益胃生津，補(bǔ)氣，化痰；藿香、蒼術(shù)燥濕健脾，化濕和胃；半夏燥濕化痰、降逆止嘔、消痞散結(jié)；野菊花、車前草清熱解毒，共奏理氣健脾，養(yǎng)陰解毒之效。這些中藥配伍是溫膽湯、四君子湯、半夏瀉心湯、甘草瀉心湯的組成部分，體現(xiàn)了中醫(yī)治療的組方配伍原則?，F(xiàn)代研究顯示廣藿香中的廣藿香醇、桔梗中的桔梗皂苷-D 具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)及抗腫瘤作用，體外研究表明其可抑制胃癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移［43-44］。甘草中的甘草次酸可抑制胃癌細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)其凋亡［45］。黨參具有抑制胃酸分泌，促進(jìn)胃黏液分泌，增強(qiáng)黏液-碳酸氫鹽屏障，促進(jìn)胃腸上皮細(xì)胞增殖，保護(hù)和修復(fù)胃腸黏膜及免疫調(diào)節(jié)作用［46-47］。沙參具有保護(hù)胃黏膜，誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡的作用［48-49］。蒼術(shù)可抑制胃酸分泌，促進(jìn)胃黏膜修復(fù)，抗炎抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)［48］。半夏具有活化白細(xì)胞及抗腫瘤作用［50］；車前草的醇提物及水提物均有體外抗炎作用［51］；菊花中的黃酮類化合物可抑制胃癌細(xì)胞的生長并誘導(dǎo)其凋亡，發(fā)揮抗腫瘤作用［52］。上述中藥可能通過干預(yù)關(guān)鍵基因發(fā)揮治療IM的作用。

綜上所述，本研究通過功能富集分析及通路分析說明IM 的發(fā)生是一個(gè)多基因異常表達(dá)的復(fù)雜過程，主要與白細(xì)胞、單核細(xì)胞、細(xì)胞外泌體等引起的細(xì)胞炎癥反應(yīng)及胃酸分泌過程相關(guān)，該結(jié)果有助于對IM發(fā)生過程中涉及機(jī)制的理解，同時(shí)從基因?qū)用嫱诰虺鯥M 中的關(guān)鍵基因，可作為IM 的潛在生物標(biāo)志物和治療靶標(biāo)，枳實(shí)、桔梗、黨參、甘草、沙參、藿香、蒼術(shù)、半夏、野菊花、車前草可作為IM 治療的靶向中藥，為后續(xù)的藥物研究提供思路。由于本研究只是基于已有數(shù)據(jù)集進(jìn)行數(shù)據(jù)挖掘，其結(jié)果及機(jī)制仍需在基礎(chǔ)與臨床研究中進(jìn)一步驗(yàn)證。