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        HPLC 法測定鮮棗中維生素C 含量

        2022-07-21 06:13:58杜飛云侯旭杰楊家榮蒲云峰
        農(nóng)產(chǎn)品加工 2022年11期
        關(guān)鍵詞:碘量鮮棗棗果

        趙 麗,杜飛云,侯旭杰,3,楊家榮,蒲云峰,3

        (1. 塔里木大學食品科學與工程學院,新疆阿拉爾 843300;2.新疆葉河源果業(yè)股份有限公司,新疆圖木舒克 843900;3. 南疆特色農(nóng)產(chǎn)品深加工兵團重點實驗室,新疆阿拉爾 843300)

        棗(Ziziphus jujubaMill.) 是鼠李科(Rhamnaceae) 棗屬(Ziziphus) 植物,棗果實中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和功能成分[1],其中維C 的含量尤為豐富,素有“維C 之王”的美譽[2],因此常將維C 含量作為評價棗果品質(zhì)的重要指標。目前,棗果中維C常用的測定方法有高效液相色譜法、2,6 -二氯靛酚法、紫外分光光度法、碘量法、鉬藍比色法等[3-5],其中高效液相色譜法具有分離效果好、靈敏度高、準確度高等特點,被廣泛用于蔬菜水果中維C 測定。以甲酸水為流動相,采用Spuirsil C18親水柱分離,建立棗果中維C 的HPLC 分析方法,并于2,6 -二氯靛酚法和碘量法測定結(jié)果比較,明確棗果中維C分析方法之間的差異,為棗果維C 的準確測定提供技術(shù)支持和參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料、試劑與儀器

        棗樣采摘于塔里木大學棗種質(zhì)資源圃。

        維C 標準品,阿拉丁試劑(上海) 有限公司提供;碘酸鉀、碘化鉀、草酸、可溶性淀粉、2,6 - 二氯酚靛酚等,均為分析純試劑。

        TGL-20M 型臺式高速冷凍離心機,湖南湘儀離心機儀器有限公司產(chǎn)品; LC-20A 液相色譜、PDA檢測器,日本島津公司產(chǎn)品。

        1.2 試驗方法

        1.2.1 HPLC 法

        稱取一定量樣品,用2%草酸室溫超聲提取30 min,再以轉(zhuǎn)速3 000 r/min 離心15 min,取上清液過0.22 μm濾膜,4 ℃下放置備用。

        色譜柱:Spuirsil C18(250 mm×4.6 mm,i.d.)柱(天津迪馬公司產(chǎn)品),流動相為0.5%甲酸,流速0.6 mL/min,進樣量10 μL,柱溫30 ℃,檢測波長243 nm。

        1.2.2 2,6 - 二氯靛酚法

        參照GB 5009. 86—2016 食品中抗壞血酸的測定第三法2,6 - 二氯靛酚滴定法測定。

        1.2.3 碘量法

        參照徐朝陽[6]的方法測定。

        1.3 數(shù)據(jù)處理

        每個處理重復3 次,結(jié)果以X±SD 表示,采用SPSS 20.0 進行方差分析,并進行Duncan's 多重比較(p<0.05)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 維C 含量的HPLC 色譜圖

        目前,HPLC 法測定維C 含量的流動相多為磷酸緩沖鹽溶液和甲醇組成,采用Spuirsil C18親水柱分離,流動相僅選用0.5%的甲酸水溶液,流動相配制簡單,且不含甲醇等有機相。

        維C 標準品和棗樣的HPLC 色譜圖見圖1。

        圖1 維C 標準品和棗樣的HPLC 色譜圖

        從圖1 可看出,標準品和樣品色譜峰基線平穩(wěn)、分離度高,說明該色譜條件適合棗果中維C 含量的測定。

        2.2 維C 的HPLC 分析方法的建立

        維C 測定方法的參數(shù)見表1。

        表1 維C 測定方法的參數(shù)

        從表1 可以看出,在3.125~100.000 μg/mL 內(nèi),維C 標準曲線為Y=0.498 4X+0.680 1,回歸系數(shù)為R2=0.999 0。該方法的回收率在91.54%~97.59%內(nèi),重現(xiàn)性的RSD 為0.98%(n=6),室溫下放置55 h 穩(wěn)定性的RSD 為2.53% (n=12),4 ℃下放置55 h 穩(wěn)定性的RSD 為0.58%(n=12)。檢測限(LOD) 和定量限(QOD) 按照Araujo P[7]的方法計算,即檢測限(LOD) 為3×SD/m和定量限(LOQ) 為10×SD/m,其中SD為標準曲線的截距,m為標準曲線斜率。該方法的檢測限(LOD) 和定量限(QOD) 分別為4.01和13.64 μg/mL。這說明建立的方法適合棗果中維C含量的測定。此外,從穩(wěn)定性結(jié)果來看,樣品處理好后,在4 ℃下放置比室溫放置的RSD 更小,說明樣品處理好后在4 ℃下放置結(jié)果更穩(wěn)定。

        2.3 棗果維C 含量測定方法的比較

        3 種維C 含量測定方法的比較見表2。

        表2 3 種維C 含量測定方法的比較 / mg·g-1

        從表2 可以看出,8 個品種鮮棗的維C 含量均較高,說明鮮棗可以作為補充維C 的食物來源。從分析方法來看,采用HPLC 法測定的結(jié)果顯著低于2,6-二氯靛酚法和碘量法(p<0.05),這可能是由于2,6 -二氯靛酚法和碘量法專一性不如HPLC 法,一些非維C 物質(zhì)干擾測定結(jié)果,導致2,6 - 二氯靛酚法和碘量法的結(jié)果偏高。因此,棗果中維C 含量測定時建議采用HPLC 法。

        3 結(jié)論

        采用Spuirsil C18親水柱,建立了棗果中維C 含量測定的HPLC 方法,該方法具有流動相配制簡單、分析時間短、準確度高、回收率高等特點。通過對8 個品種鮮棗的分析,發(fā)現(xiàn)鮮棗中維C 含量豐富,說明鮮棗是維C 優(yōu)質(zhì)的食物來源;3 種分析方法的比較,發(fā)現(xiàn)2,6- 二氯靛酚法和碘量法測定結(jié)果顯著高于HPLC 法。因此,在棗果維C 含量測定時,HPLC 法測定結(jié)果更能準確地反映棗果維C 含量的真實水平。

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