曹秀榮 董照鋒 任 崗 熊瀟垚 邵 鵬 徐 艷

木霉 (Trichoderma spp.) 是廣泛分布于土壤、植物殘?bào)w、植物根圍和葉圍、海洋以及空氣等環(huán)境中的一類真菌， 對(duì)多種細(xì)菌和病原真菌有拮抗作用， 已被作為生防制劑廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。 但木霉也因具有適應(yīng)性強(qiáng)、 繁殖速度快、為害期長(zhǎng)等特性，極易侵染香菇、平菇、雙孢菇、杏鮑菇、茶樹(shù)菇、毛木耳和靈芝等多種食用菌的培養(yǎng)基質(zhì)、菌種、菌絲和子實(shí)體，造成減產(chǎn)甚至絕收， 為食用菌生產(chǎn)中的第一大競(jìng)爭(zhēng)性雜菌。 其中，綠色木霉（Trichoderma viride）與哈茨木霉（Trichoderma harzianum）是相對(duì)優(yōu)勢(shì)菌種。

我們研究了戊唑醇、 枯草芽孢桿菌、 四霉素、 春雷霉素、 多抗霉素、 多菌靈6 種殺菌劑對(duì)哈茨木霉菌絲生長(zhǎng)的影響， 以期為哈茨木霉作為生防菌應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)時(shí)如何協(xié)調(diào)與生物防治、 化學(xué)防治的矛盾， 以及其作為食用菌生產(chǎn)中的競(jìng)爭(zhēng)性雜菌時(shí)如何選擇防治藥劑提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1）供試藥劑。 430 g/L 戊唑醇懸浮劑，鹽城利民農(nóng)化有限公司生產(chǎn)；100 億芽孢/g 枯草芽孢桿菌粉劑，陜西綠頓作物科技有限公司生產(chǎn)；0.15%四霉素水劑，遼寧微科生物工程股份有限公司生產(chǎn)；2%春雷霉素水劑， 績(jī)溪農(nóng)華生物科技有限公司生產(chǎn)； 3%多抗霉素水劑， 績(jī)溪農(nóng)華生物科技有限公司生產(chǎn)； 40%多菌靈懸浮劑，江蘇劍牌農(nóng)化股份有限公司。以上材料均為市售。

2）供試培養(yǎng)基。 馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(PDA)：無(wú)菌水1 000 mL，馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂15 g。

3）供試菌種。 供試的哈茨木霉菌株 （Trichoderma harzianum）， 來(lái)源于2021 年3 月3日從商洛盛澤農(nóng)林科技發(fā)展有限公司香菇基地采回的染病香菇菌棒， 經(jīng)實(shí)驗(yàn)室分離鑒定后，接種到PDA 試管斜面培養(yǎng)基， 于4 ℃條件下保存。

1.2 試驗(yàn)方法

1）試驗(yàn)設(shè)計(jì)。 采用菌絲生長(zhǎng)速率法，測(cè)定6種供試藥劑對(duì)哈茨木霉菌絲的抑制作用。 試驗(yàn)設(shè)7 個(gè)處理，每個(gè)處理4 次重復(fù)，各處理濃度依據(jù)使用說(shuō)明推薦用量確定，無(wú)菌水作對(duì)照。如表1 所示。

表1 6 種供試殺菌劑的試驗(yàn)設(shè)計(jì)濃度

2）含藥PDA 平板制備。將供試藥劑用滅菌水稀釋至設(shè)計(jì)濃度的10 倍， 編號(hào)后備用。 取6 mL 稀釋好的藥液注入100 mL 經(jīng)過(guò)滅菌處理的燒杯中， 再加入經(jīng)高壓蒸汽滅菌并冷卻至50 ℃左右的PDA 培養(yǎng)基54 mL， 充分混勻，制成60 mL 設(shè)計(jì)濃度的含藥培養(yǎng)基（為防止培養(yǎng)基過(guò)快冷凝而影響試驗(yàn)進(jìn)程， 每個(gè)處理多配制20 mL），然后取10 mL 注入經(jīng)過(guò)滅菌處理的9 cm 培養(yǎng)皿中， 制成試驗(yàn)設(shè)計(jì)濃度的PDA 平板。 以無(wú)菌水替代藥液， 同上述方法制作空白對(duì)照。

3）菌絲接種。 將哈茨木霉菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，在溫度28 ℃、濕度90%條件下培養(yǎng)4 天，活化菌種。在一培養(yǎng)皿內(nèi)菌落生長(zhǎng)均勻、 旺盛的同一半徑處用打孔器制作直徑6 mm 的菌餅，用接種針挑取菌餅正面向下轉(zhuǎn)接種到各處理PDA 平板培養(yǎng)基中心位置，置于溫度28 ℃、 濕度90%條件下培養(yǎng)， 分別于48 小時(shí)、72 小時(shí)、96 小時(shí)用十字交叉法測(cè)量各皿菌落直徑，并按下試計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率：

2 結(jié)果與分析

從表2、圖1 可知：依據(jù)使用說(shuō)明推薦的田間劑量濃度下，6 種殺菌劑對(duì)哈茨木霉菌絲96小時(shí)抑制率由大到小排序?yàn)椋何爝虼迹究莶菅挎邨U菌＞四霉素＞多菌靈＞春雷霉素＞多抗霉素。 戊唑醇抑制效果最好，48 小時(shí)、72 小時(shí)、96 小時(shí)抑制率均達(dá)到98%以上，呈逐漸增大趨勢(shì)；枯草芽孢桿菌抑制率略低于戊唑醇，48 小時(shí)、72 小時(shí)、96 小時(shí)抑制率均達(dá)到92%以上，72 小時(shí)達(dá)到最高，72～96 小時(shí)基本穩(wěn)定；春雷霉素和多抗霉素48 小時(shí)、72 小時(shí)、96 小時(shí)抑制率均低于20%，96 小時(shí)抑制率分別為6.3%和4.4%；多菌靈和四霉素抑制率處于中等水平，96 小時(shí)抑制率分別為58.4%和50.1%。

表2 6 種殺菌劑對(duì)哈茨木霉菌絲的抑制作用

圖1 6 種殺菌劑對(duì)哈茨木霉菌絲96 小時(shí)抑制效果

3 小結(jié)與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，在推薦的田間劑量下，春雷霉素和多抗霉素對(duì)哈茨木霉菌菌絲生長(zhǎng)抑制作用較小，96 小時(shí)抑制率分別為6.3%、4.4%；四霉素和多菌靈對(duì)哈茨木霉菌絲96 小時(shí)抑制率分別為58.4%、50.1%，抑制作用明顯；戊唑醇和枯草芽孢桿菌對(duì)哈茨木霉菌絲有顯著的抑制作用，96 小時(shí)抑制率分別達(dá)到99.4%、94.6%。

由以上結(jié)果得出，6 種殺菌劑中，能與哈茨木霉配伍， 增強(qiáng)防治效果的藥劑為春雷霉素和多抗霉素， 不建議與哈茨木霉配伍的藥劑為四霉素和多菌靈， 堅(jiān)決禁止與哈茨木霉配伍的藥劑為戊唑醇和枯草芽孢桿菌。 由于戊唑醇和枯草芽孢桿菌對(duì)哈茨木霉抑制作用顯著， 可在進(jìn)一步研究其對(duì)食用菌菌絲生長(zhǎng)影響的基礎(chǔ)上，確定其可否適用于食用菌木霉病害防治。