廖正軍，安振華，顧榮榮，竇靜怡，秦舒蕾，陸文燕，吳雨蘅

（1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物與科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江蘇 揚(yáng)州 225009；2.江蘇軍曼農(nóng)業(yè)科技有限公司，江蘇 鹽城 224700）

稻蝦養(yǎng)殖模式因前期稻前蝦的養(yǎng)殖收益較高，越來越受到廣大稻蝦養(yǎng)殖戶的重視，但是前期水溫低、肥水難，易出現(xiàn)青苔封塘的問題。青苔封塘?xí)r稻蝦田的水體空間會(huì)被青苔形成的藻絲占領(lǐng)，蝦苗行動(dòng)困難，大型水藻難以栽種成活，對(duì)稻前蝦養(yǎng)殖造成不利影響。

控制青苔的常見方法是提前肥水或使用藥物殺滅青苔。江蘇很多河蟹養(yǎng)殖區(qū)域經(jīng)常發(fā)生除青苔操作后，水草衰敗萎縮、河蟹死亡的生產(chǎn)事故。良好的除青苔藥不僅對(duì)小龍蝦毒性低，不影響其正常生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)大型水藻（輪葉黑藻、伊樂藻）的生長(zhǎng)不構(gòu)成威脅。同時(shí)，稻田施用的除青苔藥物應(yīng)不含影響水稻正常生長(zhǎng)的物質(zhì)，包括有害重金屬離子、有機(jī)磷等化合物，保證稻田綜合種養(yǎng)的可持續(xù)性。

稻蝦專用青苔凈針對(duì)稻蝦田前期水位低、光照條件好、易滋生青苔而設(shè)計(jì)，以特殊無機(jī)礦物質(zhì)為主要成分，被認(rèn)為對(duì)水體中的青苔、絲狀藻有獨(dú)特殺滅作用，且對(duì)伊樂藻、輪葉黑藻等大型藻類及養(yǎng)殖蝦蟹類毒性小而具有良好的應(yīng)用前景。為了解稻蝦專用青苔凈對(duì)小龍蝦的急性毒性和對(duì)青苔生長(zhǎng)的影響。進(jìn)行了青苔凈對(duì)小龍蝦的急性毒性試驗(yàn)，旨在為合理使用滅殺青苔藥物及科學(xué)防治青苔提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與儀器

規(guī)格為（25.6±11.3）g/只小龍蝦購自揚(yáng)州寶應(yīng)某養(yǎng)殖公司，稻蝦專用青苔凈來自江蘇某生物公司。D8-Advance多晶X射線衍射儀（德國(guó)Bruker）測(cè)定稻蝦專用青苔凈的粉晶衍射數(shù)據(jù)（2θ角為30～70°，掃描速度1（°）/s，測(cè)試電壓40 kV、電流40 mA），并使用Jade6.5軟件（美國(guó)MDI）分析其成分。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 青苔凈對(duì)小龍蝦急性毒性試驗(yàn)

分別配置質(zhì)量濃度為5，10，20，40和80 mg/L的青苔凈處理組及無青苔凈添加的空白對(duì)照組。小龍蝦養(yǎng)殖在塑料整理箱（40 cm×40 cm×15 cm）中，每個(gè)整理箱放入20只，每個(gè)處理組設(shè)置3個(gè)重復(fù)。整理箱每日需要換水并吸污，換水后重新加藥，保持藥液濃度。室內(nèi)溫度維持在（18±3）℃。每天記錄死亡蝦的數(shù)量，及時(shí)撈出死亡個(gè)體。試驗(yàn)蝦的死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)為：細(xì)玻璃棒觸碰蝦腹部，蝦體5 min內(nèi)不產(chǎn)生反應(yīng)。

1.2.2 青苔凈對(duì)青苔生長(zhǎng)的影響

配置5、10、20和40 mg/L 4個(gè)青苔凈濃度梯度處理組，同時(shí)安排未使用青苔凈的空白組作為對(duì)照，每個(gè)梯度設(shè)置3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)在帆布水池（120 cm×120 cm×100 cm）進(jìn)行試驗(yàn)，水深保持在50 cm。每個(gè)重復(fù)均投放10 kg濕質(zhì)量的青苔藻體進(jìn)行養(yǎng)殖（青苔主要由水綿組成，另有極少部分團(tuán)集剛毛藻混雜在其中），持續(xù)14 d。每日打撈漂浮死亡的青苔，測(cè)定水體pH值和溶解氧。試驗(yàn)結(jié)束后，測(cè)定各處理組青苔的剩余濕質(zhì)量，測(cè)定時(shí)將藻體瀝干至無水滴落。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)結(jié)束后，采用Excel 2010和SPSS10軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，并用直線內(nèi)插法計(jì)算半致死濃度（LC）。以濃度的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)、死亡率的概率為縱坐標(biāo)作圖，并在SPSS10軟件中獲取線性回歸方程。利用單因子方差分析（one-way ANOVA）和Duncan多重比較分析不同處理組的差異，＜0.05時(shí)，認(rèn)定為差異達(dá)到顯著水平。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 稻蝦專用青苔凈的粉晶衍射數(shù)據(jù)及成分

青苔凈粉晶衍射射線圖見圖1。由圖1可見，經(jīng)粉晶衍射圖譜分析，該青苔凈含量較為復(fù)雜，主要成分為氟磷酸鈣鈉石[NaCa（PO）F]，還含有部分礦物元素鹽類。以無機(jī)礦物質(zhì)為主要成分的測(cè)定結(jié)果也說明了該產(chǎn)品較高的安全性和穩(wěn)定性。

圖1 青苔凈粉晶衍射射線圖

2.2 稻蝦專用青苔凈對(duì)小龍蝦的急性毒性

不同濃度青苔凈對(duì)小龍蝦幼蝦24 h、48 h、72 h和96 h的累積死亡率見圖2，青苔凈對(duì)小龍蝦幼蝦半致死濃度的回歸方程分析見表1。由圖2、表1可見，青苔凈對(duì)小龍蝦的24 h和48 h LC均高于1 000 mg/L，72 h和96 h的LC分別為327.73，78.14 mg/L。

圖2 不同濃度青苔凈對(duì)小龍蝦幼蝦24 h、48 h、72 h和96 h的累積死亡率

表1 青苔凈對(duì)小龍蝦幼蝦LC50的回歸方程分析①

2.3 青苔凈對(duì)青苔生長(zhǎng)的影響

使用不同濃度青苔凈14 d后青苔濕質(zhì)量的變化見圖3。由圖3可見，稻蝦專用青苔凈對(duì)青苔殺滅效果顯著（＜0.05），青苔濕質(zhì)量隨青苔凈濃度上升而下降，5 mg/L處理組平均青苔質(zhì)量為3.60 kg，顯著低于空白對(duì)照組的平均質(zhì)量11.37 kg，40 mg/L處理組平均青苔質(zhì)量?jī)H為0.67 kg。青苔藻體在用藥后逐漸變黃、萎縮。衰亡的苔體分解產(chǎn)生氣泡并漂浮于水面上。

圖3 使用不同濃度青苔凈14 d后青苔濕質(zhì)量的變化

使用青苔凈水體pH值的變化趨勢(shì)見圖4。由圖4可見，隨著養(yǎng)殖時(shí)間的增加，水體pH值總體呈上升趨勢(shì)。以質(zhì)量濃度為10 mg/L處理組為例，青苔凈施用初期水體pH略有降低，但整體與對(duì)照組無青苔凈添加（0 mg/L）相比變化不大。隨著養(yǎng)殖試驗(yàn)的繼續(xù)，水體pH值逐步增加，但處理組的波動(dòng)幅度更平緩。

圖4 使用青苔凈水體pH值的變化趨勢(shì)

使用青苔凈水體溶解氧的變化趨勢(shì)見圖5。由圖5可見，施用青苔凈后，隨著養(yǎng)殖時(shí)間的增加，水體溶解氧總體呈下降趨勢(shì)，且處理組的波動(dòng)幅度較對(duì)照組稍大。以質(zhì)量濃度20 mg/L處理組為例，青苔凈在施用初期，水體溶氧有過短暫的上升，但總體低于對(duì)照組。

圖5 使用青苔凈水體溶解氧的變化趨勢(shì)

3 討論

3.1 殺滅青苔藥物的成分與效果分析

有報(bào)道顯示，百草枯、草甘膦等有機(jī)除草劑常被用于清除青苔。這些化學(xué)藥劑雖能夠殺滅青苔，但過量使用會(huì)污染水體和土壤。在水稻田中施用除草劑等，稻田里的動(dòng)物也會(huì)大量死亡；除草劑隨著養(yǎng)殖水體一起排入河流，還會(huì)危害相關(guān)水生動(dòng)植物。實(shí)際生產(chǎn)中，養(yǎng)殖戶常用腐殖酸鈉和生石灰來降低水體透明度，通過遮光作用來限制青苔的光合作用，抑制其生長(zhǎng)。試驗(yàn)所使用的稻蝦專用青苔凈經(jīng)粉晶衍射圖譜分析得知，主要成分為NaCa（POF和部分無機(jī)礦物質(zhì)，對(duì)青苔殺滅效果顯著（<0.05）。以施用青苔凈質(zhì)量濃度為5 mg/L的處理組為例，藥劑投放14 d后，剩余青苔質(zhì)量相比對(duì)照組明顯減少，施用青苔凈10，20和40 mg/L的處理組也均有較好的青苔防治效果。

3.2 青苔凈對(duì)環(huán)境的影響

3.2.1 青苔凈對(duì)水體pH值的影響

試驗(yàn)中，青苔凈施用后，隨著養(yǎng)殖時(shí)間的增加，養(yǎng)殖水體的pH值整體變化不大。因此，相對(duì)于使用表面活性劑、溶藻菌等產(chǎn)品而言，使用以礦物質(zhì)鹽為主的青苔凈沒有引起水體pH值大幅波動(dòng)，有利于營(yíng)造良好穩(wěn)定的養(yǎng)殖水環(huán)境，從而促進(jìn)稻蝦田中小龍蝦的生長(zhǎng)。

3.2.2 青苔凈對(duì)水體溶解氧含量的影響

溶解氧是稻前蝦投苗后影響其苗種存活率的關(guān)鍵因素，溶解氧越高，存活率越高，溶解氧越低，則存活率越低。在溶解氧高的養(yǎng)殖水體和溶解氧低的水體中養(yǎng)殖小龍蝦時(shí)，前者的存活率要顯著高于后者，且低溶解氧（＜3 mg/L）是蝦類養(yǎng)殖中的最主要限制因子之一。因此青苔藥物使用不應(yīng)引起水體溶解氧的過快下降。溶解氧下降的原因既包括青苔死亡后水體光合作用下降，也包括藥物與青苔反應(yīng)溶化分解產(chǎn)生的耗氧損失。該試驗(yàn)中，稻蝦專用青苔凈使用后，水體溶解氧含量總體呈下降趨勢(shì)，但并未出現(xiàn)大幅度快速下降的現(xiàn)象。

綜上所述，施用稻蝦專用青苔凈后的養(yǎng)殖水體pH值、溶解氧等指標(biāo)變化都在可控范圍之內(nèi)，控制其使用濃度，能夠做到不殺死小龍蝦或損傷小龍蝦。