付 虎，羅 敏，唐 璐，周 茜，江吉豐，聶婧宜，李 會(huì)，熊爾陽(yáng)

成都市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川成都 610000

梅毒可引起人體多系統(tǒng)、多器官損傷，導(dǎo)致組織破壞及功能失常，甚至危及生命[1-2]。梅毒螺旋體還可通過(guò)胎盤(pán)傳給胎兒，引起流產(chǎn)、死胎、致畸及新生兒梅毒[3-6]。近年來(lái)，梅毒發(fā)病率在全國(guó)各地區(qū)呈不同上升趨勢(shì)，所以加強(qiáng)梅毒篩查有重要意義[7-10]。目前臨床常用的檢測(cè)方法有梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)、梅毒螺旋體血凝試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、化學(xué)發(fā)光免疫分析法、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法(ECLIA)、甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)、快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)等[11-12]。在以上方法中，TPPA具有試劑穩(wěn)定，結(jié)果明了，靈敏度高，特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，被視為梅毒特異性抗體檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。但TPPA存在手工操作及判斷具有主觀性等缺點(diǎn)，限制了其在梅毒大批量篩查中的應(yīng)用[13]。ECLIA具有靈敏度高、自動(dòng)化、高通量等優(yōu)勢(shì)，近年來(lái)被臨床所采用。本研究對(duì)本院2020年9月至2021年8月采用ECLIA篩查梅毒情況進(jìn)行分析，評(píng)價(jià)其在篩查梅毒特異性抗體中的臨床應(yīng)用價(jià)值，并分析假陽(yáng)性產(chǎn)生的原因，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年9月至2021年8月在本院就診的門(mén)診及住院78 374例患者標(biāo)本，患者年齡0～91歲。

1.2 儀器與試劑 所有患者血清標(biāo)本均采用羅氏E602全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套Syphilis試劑進(jìn)行檢測(cè)，質(zhì)控品與定標(biāo)品均購(gòu)自羅氏公司；TPPA試劑購(gòu)自日本富士株式會(huì)社。

1.3 檢測(cè)方法 78 374例患者標(biāo)本均采用ECLIA檢測(cè)血清中梅毒特異性抗體濃度，陽(yáng)性標(biāo)本采用TPPA進(jìn)行復(fù)檢，最終以TPPA判讀結(jié)果為準(zhǔn)。質(zhì)控選用Westgard (2-2s/1-3s/R4S)質(zhì)控規(guī)則。ECLIA判斷標(biāo)準(zhǔn)：發(fā)光比值(COI)>1.00為有反應(yīng)(陽(yáng)性)，COI≤1.00為無(wú)反應(yīng)(陰性)。TPPA判讀標(biāo)準(zhǔn)均按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。ECLIA檢測(cè)出的梅毒陽(yáng)性標(biāo)本及臨界標(biāo)本(0.80≤COI≤1.00)采用TPPA進(jìn)行復(fù)檢，最終以TPPA判讀結(jié)果為準(zhǔn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Excel 2007整理所有資料及檢測(cè)結(jié)果，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析處理。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 ECLIA與TPPA陽(yáng)性和陰性結(jié)果比較 78 374例標(biāo)本采用ECLIA進(jìn)行初篩試驗(yàn)，陽(yáng)性標(biāo)本1 998例，臨界標(biāo)本23例，經(jīng)TPPA確認(rèn)陽(yáng)性標(biāo)本1 951例，47例結(jié)果不符，ECLIA陽(yáng)性符合率為97.65%。以TPPA檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，ECLIA檢測(cè)梅毒特異性抗體結(jié)果與之比較，ECLIA檢測(cè)梅毒特異性抗體的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為100.00%、99.94%、97.65%、100.00%。經(jīng)TPPA確認(rèn)，梅毒特異性抗體在本院就診人群中的檢出率為2.49%。見(jiàn)表1。

表1 ECLIA與TPPA陽(yáng)性和陰性結(jié)果比較(n)

2.2 ECLIA不同COI 與TPPA陽(yáng)性和陰性檢測(cè)結(jié)果比較 將1 998例ECLIA陽(yáng)性標(biāo)本按照COI高低進(jìn)行分組，分別統(tǒng)計(jì)各組ECLIA陽(yáng)性率。隨著COI升高，ECLIA與TPPA陽(yáng)性符合率逐漸升高，當(dāng)COI>20.00時(shí)，ECLIA與TPPA的陽(yáng)性符合率達(dá)100.00%。本實(shí)驗(yàn)室有2例患者標(biāo)本COI分別為17.79和18.94，在嚴(yán)格質(zhì)控情況下復(fù)檢結(jié)果均與初始檢測(cè)結(jié)果一致，說(shuō)明在COI≤20.00時(shí)，應(yīng)采用TPPA進(jìn)行復(fù)檢，避免假陽(yáng)性發(fā)生。見(jiàn)表2。

表2 ECLIA不同COI 與TPPA陽(yáng)性和陰性檢測(cè)結(jié)果比較

2.3 ECLIA假陽(yáng)性分析 通過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制及復(fù)檢，47例ECLIA假陽(yáng)性標(biāo)本均排除試劑和儀器原因。對(duì)不同年齡組ECLIA假陽(yáng)性率進(jìn)行比較，統(tǒng)計(jì)47例ECLIA假陽(yáng)性患者年齡，并按照年齡進(jìn)行分組,計(jì)算假陽(yáng)性率，≥60歲組梅毒特異性抗體假陽(yáng)性率為3.48%(22/633)，<60歲組為1.83%(25/1 365)，兩組患者梅毒特異性抗體假陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.013，P=0.025)。通過(guò)查閱患者病歷及電話咨詢(xún)患者相關(guān)信息，47例ECLIA假陽(yáng)性患者不同生理因素在梅毒特異性抗體中的分布情況分別是惡性腫瘤9例(19.15%)，自身免疫性疾病8例(17.02%)，心血管疾病6例(12.77%)，結(jié)核病5例(10.64%)，血液病4例(8.51%)，其他(原因不明)15例(31.91%)。

3 討 論

人是梅毒的唯一宿主。近年來(lái)，梅毒發(fā)病率呈日益升高趨勢(shì)。梅毒感染可累及皮膚和黏膜，還可侵犯全身多個(gè)器官，甚至可累及神經(jīng)系統(tǒng)。梅毒不僅可以通過(guò)性傳播，還可以通過(guò)母嬰傳播，導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎及先天性梅毒。梅毒特異性抗體檢測(cè)在手術(shù)前、輸血前及產(chǎn)前檢查中具有重要意義[14-15]。ECLIA作為近年來(lái)被廣泛采用的梅毒特異性抗體檢測(cè)方法，與傳統(tǒng)的膠體金法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)比較，具有更高的靈敏度和特異度，還具備自動(dòng)化程度高的優(yōu)勢(shì)，適合大規(guī)模梅毒特異性抗體篩查[16]。但與公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn)TPPA比較，ECLIA在檢測(cè)梅毒特異性抗體時(shí)仍存在假陽(yáng)性的可能。本研究通過(guò)大量的臨床檢測(cè)應(yīng)用，比較了ECLIA的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值，分析了ECLIA低COI與假陽(yáng)性的相關(guān)性，以及總結(jié)分析了導(dǎo)致ECLIA檢測(cè)梅毒特異性抗體假陽(yáng)性的原因。

78 347例標(biāo)本采用ECLIA進(jìn)行檢測(cè)，檢出陽(yáng)性標(biāo)本共1 998例。陽(yáng)性標(biāo)本經(jīng)TPPA復(fù)檢確認(rèn)陽(yáng)性為1 951例，共47例結(jié)果不符，陽(yáng)性符合率為97.65%。ECLIA篩查梅毒特異性抗體的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為100.00%、99.94%、97.65%、100.00%，具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值。47例ECLIA假陽(yáng)性標(biāo)本中，<60歲組共25例，≥60歲組共22例，兩組患者梅毒特異性抗體假陽(yáng)性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。通過(guò)查閱病歷、電話咨詢(xún)等多種方式分析導(dǎo)致假陽(yáng)性的可能因素，其中惡性腫瘤9例，自身免疫性疾病8例，心血管疾病6例，結(jié)核病5例，血液病4例，其他(原因不明)15例，與劉洋等[17]、李彩霞等[18]報(bào)道的假陽(yáng)性原因結(jié)果相符。老年人生物學(xué)假陽(yáng)性概率較高，這可能與老年人的腫瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病等慢性疾病的發(fā)病率較高有關(guān)[19]。據(jù)相關(guān)報(bào)道，某些腫瘤抗原可能與蒼白螺旋體具有類(lèi)似的抗原表位，導(dǎo)致免疫交叉反應(yīng)，導(dǎo)致梅毒特異性抗體檢測(cè)生物學(xué)假陽(yáng)性[20]。另外，自身免疫性疾病可使患者體內(nèi)產(chǎn)生一些特殊成分，在梅毒特異性抗體篩查過(guò)程中產(chǎn)生一定的吸附作用，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果為假陽(yáng)性[17]。因此，當(dāng)老年人ECLIA篩查梅毒特異性抗體COI較低時(shí)，一定要通過(guò)TPPA復(fù)檢，并結(jié)合相關(guān)病史、癥狀做出相應(yīng)診斷，避免造成患者嚴(yán)重的心理負(fù)擔(dān)及不必要的醫(yī)療糾紛。

隨著COI升高，ECLIA與TPPA陽(yáng)性符合率逐漸升高。當(dāng)1.0020.00時(shí)，ECLIA與TPPA陽(yáng)性符合率達(dá)100.00%。據(jù)李彩霞等[18]報(bào)道，當(dāng)COI>10.00時(shí)，ECLIA與TPPA陽(yáng)性符合率達(dá)100.00%，與本研究有些不同。本研究中2例患者COI分別為17.79和18.94，在質(zhì)控合格的情況下復(fù)檢結(jié)果均與初始檢測(cè)結(jié)果一致，說(shuō)明在COI<20.00時(shí)，仍需要采用TPPA進(jìn)行復(fù)檢確診。

綜上所述，ECLIA檢測(cè)梅毒特異性抗體具有較高的靈敏度，與TPPA結(jié)果符合率較高，但其操作更加簡(jiǎn)便，檢測(cè)速度快，自動(dòng)化程度高，適合進(jìn)行大規(guī)模臨床篩查。但ECLIA存在一定的假陽(yáng)性，尤其是COI較低時(shí)，假陽(yáng)性率較高，需采用TPPA進(jìn)行復(fù)檢。在平常工作中若遇到COI較低時(shí)要結(jié)合患者相關(guān)信息及復(fù)檢結(jié)果出具準(zhǔn)確報(bào)告，避免假陽(yáng)性結(jié)果造成患者心理負(fù)擔(dān)，減少醫(yī)療糾紛。