林蓉蓉，邱德穩(wěn)，劉 佳，高國棟

江西省婦幼保健院檢驗科，江西南昌 330006

血流感染是病原微生物侵入血液內生長、繁殖并釋放毒素等多種代謝產(chǎn)物而引起的一種全身嚴重感染性疾病。血流感染會引起新生兒敗血癥，是一種嚴重威脅新生兒生命的嚴重疾病，發(fā)病率為4.5‰～9.7‰[1-2]。在臨床工作中，新生兒敗血癥的診斷通過實驗室檢查來實現(xiàn)，主要包括血液學指標和血培養(yǎng)，血培養(yǎng)操作復雜、耗時較長，可能導致不能及時治療而出現(xiàn)病情惡化，而血液學指標可快速、準確地診斷早期新生兒敗血癥，具有重要臨床意義[3-4]。本研究回顧性分析本院2017年6月至2021年6月血培養(yǎng)陽性新生兒的臨床資料，分析不同病原菌血流感染新生兒白細胞計數(shù)(WBC)、中性粒細胞分類百分比(NEU)、血小板計數(shù)(PLT)、C反應蛋白(CRP)、血清降鈣素原(PCT)的差異性，為新生兒血流感染的早期診斷和治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究采用回顧性分析方法，選取本院2017年6月至2021年6月血培養(yǎng)陽性并且檢測了血常規(guī)、CRP、PCT的264例新生兒作為研究組，另選取同期184例血培養(yǎng)陰性新生兒作為對照組。納入標準：(1)雙側血培養(yǎng)陽性且為同一菌株；(2)新生兒年齡0～28 d，體溫≥38 ℃或≤36 ℃；(3)重復送檢患兒，只統(tǒng)計首次分離的菌株。排除標準：(1)剔除單瓶血培養(yǎng)陽性(常見皮膚污染菌)；(2)新生兒在血培養(yǎng)前接受過抗菌藥物治療；(3)近期有重大手術或多處創(chuàng)傷；(4)合并先天性疾病、遺傳性疾病患兒。

1.2 方法 采集所有研究對象2個不同部位各2～5 mL靜脈血注入血培養(yǎng)瓶中用于血培養(yǎng)，另采集2 mL左右靜脈血注入EDTA-K2抗凝管中用于血常規(guī)和CRP檢測，采集2～3 mL靜脈血注入含分離膠的干燥管中用于PCT檢測，所有標本在2 h內完成檢測。血常規(guī)檢測儀器為希森美康血液分析儀及配套試劑；PCT檢測采用熒光免疫層析法，采用Maya-300熒光免疫定量分析儀；CRP檢測采用速率免疫比濁法，檢測儀器為深圳普門科技股份有限公司產(chǎn)品。所有檢測項目按照相應標準操作程序及試劑盒說明書執(zhí)行。血培養(yǎng)儀器為法國生物梅里埃公司 BACT/ACERT3D全自動血培養(yǎng)儀，陽性報警后立即轉種血瓊脂平板、巧克力平板和麥康凱平板，置于35 ℃的CO2培養(yǎng)箱進行孵育。細菌鑒定采用VITEK2 Compact全自動細菌鑒定儀。

2 結 果

2.1 血流感染新生兒致病菌類型分布 研究組264例血培養(yǎng)陽性新生兒中革蘭陰性菌(G-菌)196株(74.24%)，其中肺炎克雷伯菌74株，大腸埃希菌70株，黏質沙雷菌25株，產(chǎn)氣腸桿菌8株，銅綠假單胞菌5株，鮑曼不動桿菌3株,陰溝腸桿菌3株,其他8株；革蘭陽性菌(G+菌)50株(18.94%)，其中無乳鏈球菌(B群)17株，腸球菌(D群)17株，金黃色葡萄球菌8株，解沒食子酸鹽鏈球菌2株，溶血葡萄球菌2株，其他4株；真菌18 株(6.82%)，其中白色念珠菌7株，近平滑念珠菌7株，副熱帶假絲酵母菌4株。

2.2 4組血流感染新生兒各項炎癥指標水平比較 G+菌組WBC明顯高于G-菌組和對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；G+菌組、G-菌組和對照組與真菌組WBC比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。G+菌組、G-菌組NEU均明顯高于對照組和真菌組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；真菌組與對照組NEU比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。真菌組PLT低于G-菌組，G-菌組又低于G+菌組，G+菌組又低于對照組，4組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。G+菌組、G-菌組、真菌組CRP水平分別與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；但G+菌組、G-菌組、真菌組CRP水平兩兩之間比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。G-菌組、G+菌組、真菌組PCT水平分別與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；G-菌組PCT水平高于G+菌組，G+菌組又高于真菌組，真菌組又高于對照組，4組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組血流感染新生兒各項炎癥指標水平比較或M(P25,P75)]

2.3 6種主要病原菌所致血流感染新生兒各項炎癥指標水平比較 根據(jù)新生兒感染的主要病原菌類型分為大腸埃希菌組、肺炎克雷伯菌組、黏質沙雷菌組、腸球菌組、無乳鏈球菌組、金黃色葡萄球菌組，6種主要病原菌所致血流感染新生兒WBC兩兩之間比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。無乳鏈球菌組NEU均明顯高于大腸埃希菌組、肺炎克雷伯菌組、腸球菌組和金黃色葡萄球菌組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；但與黏質沙雷菌比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。肺炎克雷伯菌組、黏質沙雷菌組PLT降低幅度均明顯高于大腸埃希菌組、腸球菌組和無乳鏈球菌組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肺炎克雷伯菌組、腸球菌組、無乳鏈球菌組CRP水平兩兩之間比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肺炎克雷伯菌組PCT水平高于大腸埃希菌組和腸球菌組，無乳鏈球菌組、黏質沙雷菌組PCT水平均明顯高于腸球菌組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同病原菌組新生兒各項炎癥指標水平比較或M(P25,P75)]

2.4 3組新生兒各項炎癥指標多元Logistic回歸分析 G-菌組相對于對照組，WBC、NEU不是新生兒血流感染G-菌的影響因素(P>0.05)，而PLT、CRP、PCT是新生兒血流感染G-菌的影響因素(P<0.05)，其偏回歸系數(shù)(β)分別為-0.005、5.193、2.724。G+菌組相對于對照組，WBC、NEU、PLT不是新生兒血流感染G+菌的影響因素(P>0.05)，而CRP、PCT是新生兒血流感染G+菌的獨立影響因素(P<0.05)，其β分別為5.198、2.726。真菌組相對于對照組，WBC、NEU、PCT不是新生兒血流感染真菌的影響因素(P>0.05)，而PLT、CRP是新生兒血流感染真菌的獨立影響因素(P<0.05)，其β分別為-0.300、5.208。見表3。

表3 3組新生兒各項炎癥指標多元Logistic回歸分析

3 討 論

不同病原菌感染所引起的新生兒敗血癥患兒感染致病菌分布類型有所不同。本研究結果顯示，新生兒血流感染致病菌主要為 G-菌(74.24%)、G+菌(18.94%)、真菌(6.82%)。在新生兒感染性疾病診斷中，有研究報道顯示，WBC、NEU、PLT等血液指標有不可靠性，但作為一項常規(guī)檢查，有方便、快捷等優(yōu)點。有研究表明，正常血常規(guī)檢測有助于排除新生兒敗血癥[5]。一般為出生6 h以后早發(fā)敗血癥，WBC≥30×109/L(出生后6 h至3 d)或出生3 d后晚發(fā)敗血癥，WBC≥20×109/L(出生大于3 d)，任何日齡 WBC<5×109/L均提示異常；PLT<100×109/L有明確診斷價值[6-7]。本研究結果顯示,G+菌組WBC明顯高于G-菌組和對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；G+菌組、G-菌組NEU與對照組和真菌組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；4組PLT兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，真菌組PLT低于G-菌組，G-菌組又低于G+菌組，G+菌組又低于對照組，說明真菌感染的新生兒PLT降低幅度最大。6種主要病原菌所致血流感染新生兒WBC兩兩比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。無乳鏈球菌組NEU均明顯高于大腸埃希菌組、肺炎克雷伯菌組、腸球菌組和金黃色葡萄球菌組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肺炎克雷伯菌組、黏質沙雷菌組PLT降低幅度明顯高于大腸埃希菌組、腸球菌組和無乳鏈球菌組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。CRP是目前新生兒感染性疾病研究最廣泛的一種急性時相反應蛋白，當機體發(fā)生炎性反應時，CRP水平會快速升高，甚至會增加至細菌感染正常水平的1 000倍[8-9]。在感染過程中，CRP還可誘導白細胞介素(IL)-6、IL-1和其他細胞因子分泌水平增加。CRP可激活補體通路，誘導細胞凋亡，抑制巨噬細胞驅動的促炎性反應[10-11]。對于血流感染的診斷，CRP的特異度較低，但在病原菌感染情況下，血培養(yǎng)陽性患者CRP水平明顯高于陰性患者，因此,CRP可作為臨床上篩查血流感染的重要指標[12-13]。本研究結果顯示，G-菌組、G+菌組、真菌組CRP水平分別與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但G-菌組、G+菌組、真菌組兩兩之間比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。說明不同病原菌血流感染新生兒CRP水平均呈不同程度升高。6種主要病原菌中，肺炎克雷伯菌組、腸球菌組、無乳鏈球菌組CRP水平兩兩之間比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。PCT是由11號染色體上的降鈣素Ⅰ基因編碼，包含114～116個氨基酸，是一種無激素活性的降鈣素前肽物質，在甲狀腺中分泌，進入體循環(huán)之前被轉化為降鈣素[14]。PCT是一種特異性區(qū)分細菌感染和其他病因導致的炎性反應的重要標志物。PCT>0.1 ng/mL，可能表明存在細菌感染；PCT>0.5 ng/mL，要考慮發(fā)展成為敗血癥的可能[15]。有研究表明，PCT可以作為鑒別 G+菌和 G-菌引起的血流感染的炎癥標志物，是因為G+菌、G-菌通過不同的Toll樣受體信號通路激活炎癥因子釋放，從而誘導產(chǎn)生不同水平的PCT[16-17]。本研究結果顯示，G-菌組、G+菌組、真菌組PCT水平分別與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。肺炎克雷伯菌組PCT水平明顯高于大腸埃希菌組和腸球菌組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；無乳鏈球菌組、黏質沙雷菌組PCT水平均明顯高于腸球菌組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。多元Logistic回歸分析結果顯示，PLT、CRP、PCT是新生兒血流感染G-菌的影響因素(P<0.05)；CRP、PCT是新生兒血流感染G+菌的影響因素(P<0.05)；PLT、CRP是新生兒血流感染真菌的影響因素(P<0.05)。

綜上所述，WBC、NEU、PLT、CRP、PCT可以對新生兒血流感染致病原菌的類型做出初步判斷，為其臨床早期診斷和治療提供有效參考依據(jù)。