文/萬新生 趙敏，2 李洪琴，2 劉天驥 李彬斌 宋明 顧夕章 郭楓

本文旨在評估草魚硬顆粒料和膨化料對草魚各項(xiàng)形體指標(biāo)及肝臟組織結(jié)構(gòu)的影響。跟蹤取樣分析發(fā)現(xiàn)，投喂膨化料的草魚，其肥滿度、臟體指數(shù)、肝體指數(shù)以及腸系脂肪比含量均顯著高于硬顆粒料組（＜0.05），與此同時(shí)膨化料組草魚肝臟組織中肝細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性、核偏移和細(xì)胞質(zhì)消失現(xiàn)象也較嚴(yán)重。因此，在草魚養(yǎng)殖過程中除了追求其生長速度外，也要關(guān)注所選用飼料對草魚相關(guān)形體指標(biāo)及肝臟組織結(jié)構(gòu)的影響。本研究為草魚養(yǎng)殖過程中適宜飼料類型選用提供了參考。

草魚（）是我國水產(chǎn)養(yǎng)殖范圍最廣、總產(chǎn)量最高的淡水魚品種。當(dāng)前草魚養(yǎng)殖飼料分膨化料和硬顆粒料，膨化料因顆粒容重不同分為浮性料和沉性料，膨化浮性顆粒料在水中穩(wěn)定性和浮性較好，而且膨化工藝可破壞飼料原料中的有害物質(zhì)及抗?fàn)I養(yǎng)因子，提高飼料營養(yǎng)物質(zhì)的可消化性。然而膨化料對魚體健康、形體指標(biāo)及品質(zhì)有較大影響，對養(yǎng)殖效益、流通成本及市場銷售影響較大。養(yǎng)殖戶為了追求快速生長，若長時(shí)間投喂膨化魚料，忽略了形體指標(biāo)及肝臟結(jié)構(gòu)，可能會損害魚體健康及品質(zhì)。本文跟蹤評估了全程投喂草魚膨化料、全程投喂硬顆粒料及兩者搭配投喂的草魚養(yǎng)殖數(shù)據(jù)，分析相關(guān)形體指標(biāo)及肝臟組織結(jié)構(gòu)差異，以期為草魚養(yǎng)殖過程中適宜飼料類型選用提供參考。

一、材料與方法

（一）調(diào)研設(shè)計(jì)

2019年3月20日在長江流域（南昌市、九江市、合肥市、池州市、安慶市等）開展草魚池塘調(diào)研，篩選出水域條件、水質(zhì)狀況、池塘面積、管理水平、草魚種放養(yǎng)規(guī)格和品質(zhì)、放養(yǎng)密度基本一致的池塘，全程跟蹤和指導(dǎo)養(yǎng)殖期內(nèi)草魚飼料的投喂管理（量、質(zhì)及次數(shù)等）、水質(zhì)調(diào)控、病害防治等，確保養(yǎng)殖過程中養(yǎng)殖技術(shù)措施及管理水平等基本一致。全年用硬顆料投喂的草魚組編為Ⅰ組，使用硬顆粒料搭配膨化料的編為Ⅱ組，全年使用膨化料的編為Ⅲ組。

（二）樣品采集和分析

經(jīng)過6個(gè)月的養(yǎng)殖跟蹤和技術(shù)指導(dǎo)，于2019年9月20日～30日集中Ⅰ組七個(gè)批次樣本，Ⅱ組四個(gè)批次樣本，Ⅲ組三個(gè)批次樣本。每個(gè)批次隨機(jī)抽取體質(zhì)量相近的草魚30尾，稱取體質(zhì)量，測量體長，計(jì)算肥滿度，稱取每條魚的內(nèi)臟質(zhì)量、肝臟質(zhì)量以及腸系膜周邊脂肪質(zhì)量。

肝臟樣品采集與制作：完成上述形體指標(biāo)檢測后，分別采取肝臟組織固定于Bouin氏液，石蠟包埋，切片厚度為5μm，H.E.染色顯微鏡觀察、取圖。

將飼料樣品烘干（105℃）至恒重，采用凱式定氮法測定粗蛋白含量，索氏抽提法測定脂肪含量，失重法測定灰分含量。

肥滿度（CF，%）=100×（體質(zhì)量/體長）；

臟體指數(shù)（VSI，%）＝100×（內(nèi)臟質(zhì)量/體質(zhì)量）；

肝體指數(shù)（LSI，%）＝100×（肝臟質(zhì)量/體質(zhì)量）；

腸系脂肪比（%）=100×（腸系膜脂肪質(zhì)量/體質(zhì)量）

（三）數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示，應(yīng)用SPSS Statistics 20生物數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行方差和顯著性分析，以（＜0.05）為差異性顯著，當(dāng)差異達(dá)到顯著水平（＜0.05）則進(jìn)一步通過Duncan氏法進(jìn)行多重比較分析。

二、結(jié)果

（一）草魚硬顆粒料和膨化料的相關(guān)營養(yǎng)指標(biāo)

抽取江西贛中北及安徽南部區(qū)域主流的14家飼料企業(yè)生產(chǎn)的同規(guī)格草魚硬顆粒料（7種）和膨化料（7種），檢測其常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)（見表1）。由表1看出，膨化料與硬顆粒料水分、鈣、磷含量無顯著性差異（＞0.05），膨化料粗蛋白含量顯著高于硬顆粒料1.66%（＜0.05），粗灰分、脂肪含量顯著低于硬顆粒料1.62%、1.64%（＜0.05）。

表1 市場抽樣的草魚硬顆粒料和膨化料常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)

（二）硬顆粒料和膨化料對草魚形體指標(biāo)的影響

硬顆粒料和膨化料對草魚形體指標(biāo)的影響如表2所示。Ⅰ組中第5組草魚肥滿度顯著高于其他六組（＜0.05），Ⅱ組中第11組顯著高于其他三組（＜0.05），其他三組與Ⅰ組差異不顯著（＞0.05），Ⅲ組中第14組顯著高于Ⅰ組中7項(xiàng)數(shù)據(jù)（＜0.05），也高于Ⅱ組中的除第11組外的其他三組，從中可發(fā)現(xiàn)草魚肥滿度隨著膨化料的使用呈上升的趨勢。

表2 硬顆粒料和膨化料對草魚形體指標(biāo)的影響

臟體指數(shù)方面，Ⅰ組中除第5組顯著高于其他組（＜0.05），及第1組顯著低于其他組外（＜0.05），其他組別差異不顯著（＞0.05），Ⅱ組之間、Ⅲ組之間差異顯著（＞0.05），但顯著高于硬顆粒料組Ⅰ組（＜0.05），從中發(fā)現(xiàn)草魚臟體指數(shù)也隨著膨化料的使用呈上升的趨勢。肝體指數(shù)隨著膨化料的使用呈上升趨勢，膨化料Ⅲ組整體上顯著高于顆粒料Ⅰ組（＜0.05）。腸系脂肪比中，膨化料Ⅲ組整體上顯著高于硬顆粒料Ⅰ組（＜0.05）。

（三）投喂硬顆粒料和膨化料的草魚肝臟組織結(jié)構(gòu)的差異

投喂不同類型配合飼料的草魚肝臟組織結(jié)構(gòu)見圖1、圖2、圖3（均為草魚肝臟切片400倍光學(xué)顯微鏡下結(jié)構(gòu)圖）。圖1硬顆料Ⅰ組的草魚肝臟組織結(jié)構(gòu)中肝細(xì)胞排列均勻規(guī)則、核位于肝細(xì)胞中央；Ⅱ組膨化料與顆粒料搭配組的草魚肝臟中有少許肝細(xì)胞出現(xiàn)核偏移和空泡變性現(xiàn)象；Ⅲ組膨化料組肝臟組織切片有大量肝細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性、核偏移和細(xì)胞質(zhì)消失現(xiàn)象。

圖1 Ⅰ組肝臟組織結(jié)構(gòu)

圖2 Ⅱ組肝臟組織結(jié)構(gòu)

圖3 Ⅲ組肝臟組織結(jié)構(gòu)

三、討論

膨化料生產(chǎn)過程中飼料原料調(diào)質(zhì)后溫度在95℃左右，進(jìn)入膨化腔后加熱最高溫度可達(dá)110℃，物料在膨化腔內(nèi)被加熱至一定溫度后擠出模板，壓力驟降水分汽化從而形成膨化料；硬顆粒料生產(chǎn)過程中原料調(diào)質(zhì)過程中的溫度為80℃～90℃，在環(huán)模中壓輥?zhàn)饔孟聰D壓形成硬顆粒料。比較兩種制粒過程便可發(fā)現(xiàn)，兩者都是通過擠壓和摩擦作用形成顆粒，但濕法擠壓膨化工藝中膨化環(huán)節(jié)高溫可達(dá)110℃以上，對維生素會造成極為嚴(yán)重的破壞，溫度越高損失越大，尤其是對溫度較為敏感的V及V、V等都會受到較大程度的破壞，膨化料中V的保留率為79.18%，而硬顆粒料經(jīng)過調(diào)質(zhì)、混合和制粒后V的保留率為86.04%。據(jù)相關(guān)研究表明，膨化與非膨化兩種生產(chǎn)工藝生產(chǎn)造成飼料中脂溶性維生素總損失率在14.46%～39.52%，硬顆粒料的損失要低于膨化料工藝，差值在11.81%～16.73%。維生素是脂類代謝中的關(guān)鍵活性物質(zhì)，或者是此類物質(zhì)的合成前體，或者為此類物質(zhì)的合成提供活性因子。大量研究表明，維生素或維生素類物質(zhì)缺乏都會造成肝臟的脂肪積累，進(jìn)而導(dǎo)致過量的肝臟脂肪沉積。

魚類肝臟細(xì)胞較大、呈多角形、細(xì)胞界線清晰，核位于肝細(xì)胞中央，細(xì)胞排列均勻規(guī)則。研究表明，中、高水平糖組的肝細(xì)胞多發(fā)生腫脹和空泡化，部分肝細(xì)胞膜破裂，肝細(xì)胞核多移至細(xì)胞邊位。本試驗(yàn)膨化料組樣本肝臟組織切片有大量肝細(xì)胞出現(xiàn)空泡變性、核偏移和細(xì)胞質(zhì)消失現(xiàn)象。膨化料加硬顆粒料組樣本也有少許肝細(xì)胞出現(xiàn)核偏移和空泡變性現(xiàn)象，表明膨化料飼喂組中，高能量的攝入對魚類肝臟組織發(fā)育有一定的營養(yǎng)脅迫，而飼喂硬顆粒料組樣本肝細(xì)胞排列均勻規(guī)則、核位于肝細(xì)胞中央。

綜上所述，膨化料中碳水化合物水平較高，由于魚類對糖類的天生不耐受性，過量增加碳水化合物比例，非但不能加快魚類長時(shí)間的生長速度，反而會促進(jìn)魚類將糖類向脂類轉(zhuǎn)化，從而在肝臟等各組織中積累大量脂肪。脂肪雖然能在短期內(nèi)促使魚類快速生長，但是這種快速生長，卻是以脂肪在體內(nèi)，尤其是在肝臟內(nèi)大量積累，從而對魚體造成長期的代謝損傷為代價(jià)。同時(shí)蛋白質(zhì)也是一種能量營養(yǎng)素，過高的蛋白攝入也會轉(zhuǎn)化為脂肪在魚體內(nèi)蓄積。與此同時(shí)，膨化料的生產(chǎn)工藝導(dǎo)致維生素的損失較高，而維生素或者維生素類物質(zhì)的缺乏都會造成肝臟的脂肪積累。以上幾方面都對魚體的肥滿度、臟體比、肝體比以及脂肪比產(chǎn)生影響，導(dǎo)致膨化料組草魚肝細(xì)胞多發(fā)生腫脹和空泡化、部分肝細(xì)胞膜破裂、肝細(xì)胞核多移至細(xì)胞邊位，影響魚類健康發(fā)育。

四、結(jié)論

從綜合養(yǎng)殖效益、養(yǎng)殖對象自身健康及其良好的形體指標(biāo)等方面考慮，草魚使用硬顆粒料飼喂效果更佳?？紤]到草魚適度生長速度的需要和養(yǎng)殖水體狀況，采用硬顆粒料搭配部分膨化料投喂草魚，在保持草魚良好生長性能的同時(shí)，可減少水體富營養(yǎng)化。此外，草魚在高溫季節(jié)及過冬前的低溫時(shí)期肝臟負(fù)荷能力較大時(shí)，建議不用膨化料，但開春后在做好保健的前提下可投喂一段時(shí)間草魚膨化料，促進(jìn)草魚攝食和生長。