翟璐璐，靳秀紅，張向峰，李曉燕，駱彩英

［1.鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院（河南省兒童醫(yī)院、鄭州兒童醫(yī)院）呼吸科，河南 鄭州 450048；2.柘城中醫(yī)院 肝膽脾胃科，河南 柘城476200］

中性粒細(xì)胞型哮喘多見于重癥哮喘及難治性哮喘中，且無明顯的嗜酸性粒細(xì)胞浸潤［1］。目前，該病的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，可能與感染、吸煙及長期使用糖皮質(zhì)激素有關(guān)，常表現(xiàn)為氣促、胸悶及咳嗽等，多發(fā)于兒童群體［2］。因中性粒細(xì)胞型哮喘患兒肺功能下降更為嚴(yán)重，急性發(fā)作次數(shù)較多，且標(biāo)準(zhǔn)治療的療效欠佳［3］，故對患兒的病情發(fā)展進(jìn)行評估十分重要，可為臨床治療提供參考依據(jù)。血清顆粒蛋白前體（PGRN）是一種多功能蛋白，可調(diào)節(jié)正常組織的發(fā)育、增殖和防御功能［4］。既往研究［5］顯示，PGRN 參與多種自身免疫疾病及炎癥性疾病的發(fā)生發(fā)展，但是否可作為新型的反映中性粒細(xì)胞型哮喘患兒病情嚴(yán)重程度的指標(biāo)尚不清楚。因此，本研究將探討分析PGRN 與中性粒細(xì)胞型哮喘患兒病情的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年5 月至2021 年5 月在鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院確診的中性粒細(xì)胞型哮喘患兒94 例，根據(jù)患兒病情的嚴(yán)重程度［6］分為輕度組37 例、中度組32 例及重度組25 例。輕度組男21 例，女16例，年齡7～13 歲，平均（10.16±1.32）歲；中度組男24 例，女8 例，年齡7～13 歲，平均（10.28±1.18）歲；重度組男12 例，女13 例，年齡7～13 歲，平均（10.09±1.41）歲。三組性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合中性粒細(xì)胞型哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］；②經(jīng)鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院倫理委員會通過，患兒監(jiān)護(hù)人了解并知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在其他類型哮喘；②存在惡性腫瘤；③存在肝腎功能不全；④存在精神疾病者。

1.2 方法

1.2.1 肺功能 所有患兒均于入組當(dāng)日采用德國康訊肺功能機(jī)行肺功能檢測，記錄第1 秒用力呼氣容積（FEV1）、用力肺活量（FVC），并計(jì)算FEV1/FVC。

1.2.2 PGRN、腫瘤壞死因子（TNF-α）及白細(xì)胞介素-8（IL-8）于入組當(dāng)日采集所有患兒空腹靜脈血液3 mL 置于無抗凝劑的一次性真空采血管中備用，將標(biāo)本放置在-40℃的條件下保存，待血液完全凝固后進(jìn)行離心分離血清（8 cm 離心半徑，3 000 r/min 離心10 min）。取上層清液采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA）檢測PGRN、TNF-α 及IL-8水平。儀器：小型VIPAS 全自動熒光酶標(biāo)儀，試劑和試劑盒均由武漢菲恩生物科技有限公司提供。檢驗(yàn)過程嚴(yán)格按儀器與試劑說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，滿足正態(tài)分布且方差齊的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，采用單因素方差分析比較組間差異；計(jì)數(shù)資料用百分率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。采用Pearson 相關(guān)性分析PGRN 水平與FEV1、FVC 及FEV1/FVC 的關(guān)系，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組肺功能水平比較

中度組及重度組FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平低于輕度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；相較于中度組，重度組FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 三組肺功能水平比較（）

表1 三組肺功能水平比較（）

注：1）與輕度組比較，P＜0.05；2）與中度組比較，P＜0.05。

2.2 三組PGRN、TNF-α 及IL-8 比較

中度組及重度組PGRN、TNF-α 及IL-8 水平均高于輕度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；相較于中度組，重度組PGRN、TNF-α 及IL-8 水平更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組PGRN、TNF-α 及IL-8 比較（）

表2 三組PGRN、TNF-α 及IL-8 比較（）

注：1）與輕度組比較，P＜0.05；2）與中度組比較，P＜0.05。

2.3 PGRN 水平與FEV1、FVC 及FEV1/FVC 的關(guān)系

PGRN 水 平 與FEV1（r=-0.241,P=0.015）、FVC（r=-0.252,P=0.012）及FEV1/FVC（r=-0.225,P=0.025）均呈負(fù)相關(guān)。

3 討論

支氣管哮喘是以氣道出現(xiàn)慢性炎癥反應(yīng)為主要特征的慢性氣道疾病，具有病死率高及發(fā)病率高等特點(diǎn)。根據(jù)誘導(dǎo)痰細(xì)胞比例可分為嗜酸粒細(xì)胞型、中性粒細(xì)胞型、混合粒細(xì)胞型及寡粒細(xì)胞型4 類，其中中性粒細(xì)胞型所占比例最高，是哮喘中最重要的表型，也是導(dǎo)致患者病情控制不佳，激素治療反應(yīng)差的重要原因之一［8-9］。因此，早期對中性粒細(xì)胞型哮喘的病情進(jìn)行評估并制定有效的干預(yù)措施，對控制病情的發(fā)展和預(yù)后具有積極作用。本研究結(jié)果顯示，中度組及重度組的FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平低于輕度組，且相較于中度組，重度組的FEV1、FVC 及FEV1/FVC 水平更低，F(xiàn)EV1、FVC 和FEV1/FVC 是反應(yīng)患者肺功能水平的重要指標(biāo)，提示中性粒細(xì)胞型哮喘兒病情越嚴(yán)重，肺功能水平越差。

本研究結(jié)果顯示，中度組及重度組的PGRN、TNF-α 及IL-8 水平均高于輕度組，提示隨著中性粒細(xì)胞型哮喘兒病情的加重，PGRN、TNF-α 及IL-8 水平存在異常升高。PGRN 是一種分泌型糖蛋白，在多種組織中廣泛表達(dá)，在介導(dǎo)胚胎發(fā)育、組織損傷中有重要作用，與慢性炎癥性疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等疾病的嚴(yán)重程度密切相關(guān)［10-11］。有研究［12］發(fā)現(xiàn)，PGRN 在成年人膿毒癥感染中有較高的表達(dá)水平，其水解產(chǎn)物顆粒蛋白（GRN）可作為Toll 樣受體9 的信號通路輔助因子參與疾病進(jìn)展，這與本研究部分結(jié)果相一致。且周利航等［13］研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，PGRN 可參與炎癥反應(yīng)，而炎癥反應(yīng)是中性粒細(xì)胞型哮喘發(fā)生發(fā)展的重要因素［14］，由此推測，PGRN 參與中性粒細(xì)胞型哮喘的進(jìn)程中。PGRN 通過刺激單核巨噬細(xì)胞分泌TNF-α，促使炎癥反應(yīng)加重，進(jìn)而使IL-8 水平升高，此外，PGRN 促使大量的巨噬細(xì)胞聚集在脂肪組織中，并將募集到的巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化為促炎癥細(xì)胞，導(dǎo)致大量的促炎癥因子生成［15］，使患兒病情加重，肺功能下降。Pearson 相關(guān)性顯示，PGRN 水平與FEV1、FVC 及FEV1/FVC 均呈負(fù)相關(guān)，提示PGRN 可反映中性粒細(xì)胞型哮喘病情的嚴(yán)重程度，當(dāng)PGRN 水平越高時(shí)，患兒肺功能越差，病情越嚴(yán)重。

綜上所述，PGRN 在中性粒細(xì)胞型哮喘患兒中存在明顯高表達(dá)，且與病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，隨著患兒病情的加重，其表達(dá)水平隨之增加。