文│才巴特（新疆維吾爾自治區(qū)和靜縣和靜鎮(zhèn)農(nóng)牧業(yè)發(fā)展服務(wù)中心）

在現(xiàn)代養(yǎng)殖中，母牛繁殖效率將直接影響?zhàn)B殖場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益，母牛配種結(jié)束后，及時(shí)準(zhǔn)確診斷妊娠情況對(duì)牛場(chǎng)高效繁育管理工作至關(guān)重要。在實(shí)際養(yǎng)殖過(guò)程中，若不能及時(shí)診斷出未妊娠母牛，則會(huì)延長(zhǎng)母?？諔哑?，導(dǎo)致牧場(chǎng)牛群產(chǎn)犢間隔延長(zhǎng)，進(jìn)而影響母牛的整個(gè)繁育周期，導(dǎo)致繁殖效率下降，最終給養(yǎng)殖場(chǎng)帶來(lái)一定的經(jīng)濟(jì)損失。因此，需要在母牛配種后的短時(shí)間內(nèi)對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確的妊娠診斷，在傳統(tǒng)養(yǎng)殖中，常用的牛妊娠診斷技術(shù)主要包括直腸檢測(cè)、陰道檢測(cè)及超聲波檢測(cè)等幾種方法，但這類方法存在一定的侵入性傷害，如果出現(xiàn)操作不當(dāng)，非常容易導(dǎo)致胚胎死亡。其次，檢測(cè)孕酮、妊娠相關(guān)糖蛋白等與牛妊娠相關(guān)的物質(zhì)進(jìn)行診斷，但這類方法在妊娠初期的準(zhǔn)確率較低。隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，相繼出現(xiàn)一些新型技術(shù)，如紅外光譜技術(shù)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白組學(xué)等。加大新型妊娠診斷技術(shù)的推廣力度，對(duì)推動(dòng)我國(guó)牛養(yǎng)殖業(yè)的高效、可持續(xù)性發(fā)展具有十分重要的意義。

一、牛妊娠臨床診斷法

1.外部觀察法。母牛在配種成功后不會(huì)有發(fā)情表現(xiàn)，其食欲和飲欲會(huì)有明顯提高，性情溫順，且被毛變得光亮，在母牛妊娠5個(gè)月后可見(jiàn)其腹圍明顯增大，但這種方法只適用于母牛懷孕中后期，在妊娠早期無(wú)參考價(jià)值。

2.直腸檢查法。在傳統(tǒng)牛養(yǎng)殖過(guò)程中，直腸檢查法在妊娠診斷中起重要作用，這種診斷方法需要工作人員將手臂直接伸入母牛直腸內(nèi)，通過(guò)觸診檢查母牛卵巢、子宮和胚胎發(fā)育情況。在母牛妊娠初期，其一側(cè)卵巢明顯增大，觸診可發(fā)現(xiàn)存在卵巢黃體，子宮角無(wú)明顯變化，但觸診可感覺(jué)到母牛子宮變厚。隨著母牛妊娠的發(fā)展，觸診可發(fā)現(xiàn)母牛一側(cè)子宮角加粗，并且質(zhì)地變軟。母牛妊娠3個(gè)月后，其子宮角間的溝會(huì)被填平，觸診可發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)有液體波動(dòng)感，并且還有可能觸碰到胎兒。這種診斷方法是一種較為經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)技術(shù)，但對(duì)工作人員的技術(shù)要求較高，缺乏經(jīng)驗(yàn)的獸醫(yī)和養(yǎng)殖者不易掌握。

3.陰道診斷法。在母牛懷孕后1個(gè)月左右，可通過(guò)陰道診斷法進(jìn)行檢查，可見(jiàn)陰道黏膜比較干燥，母牛陰道和子宮頸顏色蒼白，并且子宮頸口會(huì)向一側(cè)偏移，這種診斷方法主要作為一個(gè)參考方法，準(zhǔn)確性比較低。

4.超聲波診斷法。臨床上用于母牛妊娠的超聲波技術(shù)包括A超、B超及D超。其中A超適用于母牛配種后的18天左右，將檢測(cè)用的探頭伸入母牛陰道穹窿處，即可檢測(cè)出母牛是否妊娠；B超最早可檢查配種30天后的母牛，檢測(cè)時(shí)只需將探頭抵在母牛腹部皮膚上即可診斷出是否妊娠；D超可診斷配種20天的母牛，在檢測(cè)時(shí)主要是將血流信號(hào)轉(zhuǎn)化為聲音信號(hào)進(jìn)行診斷的一種方法。運(yùn)用A超和D超進(jìn)行診斷時(shí)均需操作者將手深入母牛子宮內(nèi)，對(duì)操作者的技術(shù)要求相對(duì)較高，雖然D超的準(zhǔn)確性較好，但儀器設(shè)備較為昂貴，較難在中小型養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)推廣使用。最常使用的B超在母牛妊娠30天內(nèi)的診斷準(zhǔn)確性比較低。

二、妊娠相關(guān)物質(zhì)診斷法

母牛妊娠后，其生殖器官的性質(zhì)分泌情況會(huì)發(fā)生一定變化，導(dǎo)致母體血液、乳汁中的一些妊娠相關(guān)物質(zhì)發(fā)生變化，如孕酮和妊娠相關(guān)蛋白等均可作為母牛妊娠診斷物質(zhì)。

1.孕酮。孕酮主要由母牛卵巢上的黃體分泌。母牛配種結(jié)束后，若未妊娠黃體會(huì)逐漸退化，導(dǎo)致機(jī)體孕酮含量較低，而當(dāng)母牛妊娠后其黃體會(huì)持續(xù)存在，體內(nèi)孕酮水平比較高。在對(duì)母牛進(jìn)行人工授精后，若母牛未妊娠，在16～18天血液中的孕酮含量會(huì)急劇下降到較低水平，而妊娠母牛孕酮含量則會(huì)維持在一個(gè)較高的水平，在18～23天仍顯著高于未妊娠的母牛。此外，妊娠母牛乳汁中孕酮含量也會(huì)顯著高于未妊娠母牛，其中妊娠母牛孕酮含量在7納克/毫升以上，未妊娠的則低于3納克/毫升。

2.妊娠相關(guān)蛋白（PAGs）。在哺乳動(dòng)物妊娠期間，其胎盤會(huì)合成分泌一種與妊娠相關(guān)的糖蛋白。通過(guò)檢測(cè)配種母牛體內(nèi)這類糖蛋白的含量即可判斷母牛是否妊娠，這種檢測(cè)方法操作較為簡(jiǎn)單、快速。但這種檢測(cè)方法在妊娠早期的準(zhǔn)確性不高，在妊娠4周后可有較高的靈敏度和特異性。當(dāng)前對(duì)妊娠相關(guān)蛋白檢測(cè)的主要方法包括放射免疫法（RIA）及酶聯(lián)免疫法（ELISA）等。但這兩種診斷方法對(duì)檢測(cè)儀器具有較高要求，并且費(fèi)用較為昂貴，特別是RIA法，涉及專門的放射性同位素，一旦操作不當(dāng)還可出現(xiàn)輻射性危害。

三、新型牛妊娠診斷技術(shù)的應(yīng)用

隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的不斷發(fā)展，高通量檢測(cè)技術(shù)越來(lái)越成熟，催生了轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)和中紅外光譜診斷技術(shù)等一批新型的檢測(cè)技術(shù)，這些檢測(cè)技術(shù)已在牛妊娠診斷中取得了一定的成果，對(duì)母牛早期妊娠診斷也取得了技術(shù)上的突破。

奶牛妊娠后其血液中的art2a和bovb基因表達(dá)量會(huì)出現(xiàn)明顯變化，顯著高于未妊娠的母牛，特別是bovb基因具有較高的靈敏度，在對(duì)母牛人工授精后的第20天則可檢測(cè)到基因的變化。同時(shí)在母牛妊娠14～18天時(shí)，其CCL8和CXCL10基因的表達(dá)量也會(huì)表現(xiàn)出上升趨勢(shì)，并且在母牛妊娠第18天顯著升高，因此，根據(jù)配種母牛特異性基因的表達(dá)量能較為準(zhǔn)確地診斷出母牛的早期妊娠情況。其次，通過(guò)采集未妊娠奶牛及配種妊娠后35天的奶樣，使用蛋白組學(xué)分析技術(shù)，檢測(cè)表達(dá)的差異性蛋白，即可對(duì)母牛是否妊娠做出較為準(zhǔn)確診斷。此外，中紅外光譜（MIRS）技術(shù)主要是通過(guò)對(duì)特定區(qū)域內(nèi)特定波長(zhǎng)的化學(xué)集團(tuán)進(jìn)行振動(dòng)，以進(jìn)行定性或定量檢測(cè)的一種新型現(xiàn)代化的分析診斷技術(shù)，這種診斷方法具有簡(jiǎn)便、快速、無(wú)損、高通量及低成本等優(yōu)點(diǎn)，目前已被廣泛應(yīng)用于大型養(yǎng)殖場(chǎng)中。

四、牛妊娠診斷技術(shù)的推廣應(yīng)用

1.展開(kāi)牛妊娠診斷技術(shù)調(diào)查。對(duì)該縣區(qū)域內(nèi)的各牛養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行情況調(diào)查，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。主要對(duì)本縣區(qū)域內(nèi)的能繁母牛頭數(shù)、不同牧場(chǎng)常用的牛妊娠診斷方法、母牛平均空懷天數(shù)、妊娠時(shí)間及飼養(yǎng)成本等情況進(jìn)行調(diào)查。通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在本縣域內(nèi)200多個(gè)牧場(chǎng)中，采用直腸檢測(cè)法的牛場(chǎng)比例較高，占到96%以上，還有4%左右的牛場(chǎng)采用直腸觸診與B超診斷相結(jié)合的方法，當(dāng)前未發(fā)現(xiàn)有牛場(chǎng)使用早期孕檢試劑盒或中紅外光譜（MIRS）技術(shù)進(jìn)行診斷，說(shuō)明本地區(qū)當(dāng)前母牛妊娠診斷情況仍比較傳統(tǒng)，母牛妊娠診斷的效率不高，導(dǎo)致母?？諔亚闆r較多，影響了牧場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益的進(jìn)一步提高。

2.開(kāi)展早期妊娠診斷技術(shù)示范基地。在該縣域內(nèi)選擇規(guī)模較大的幾個(gè)牧場(chǎng)進(jìn)行早期孕檢試劑盒或中紅外光譜（MIRS）技術(shù)的推廣使用，各牧場(chǎng)采取自繁自養(yǎng)的飼養(yǎng)模式，將母牛分為兩組，分別使用傳統(tǒng)與新型診斷技術(shù)進(jìn)行母牛早期妊娠診斷，在試驗(yàn)期間指派專業(yè)指導(dǎo)人員對(duì)妊娠診斷使用的相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行解釋說(shuō)明，并對(duì)牧場(chǎng)內(nèi)的工作人員進(jìn)行相關(guān)的技術(shù)指導(dǎo)。通過(guò)比較兩組診斷技術(shù)的準(zhǔn)確性與時(shí)效性，以判斷兩類方法的實(shí)用性。

3.相關(guān)部門提高政策扶持。為進(jìn)一步鼓勵(lì)、推動(dòng)牛養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，當(dāng)?shù)卣块T應(yīng)重視新型診斷技術(shù)的推廣應(yīng)用，通過(guò)聘請(qǐng)專家組到各牧場(chǎng)進(jìn)行專業(yè)知識(shí)宣傳，提高廣大牧民的創(chuàng)新意識(shí)，同時(shí)可創(chuàng)立養(yǎng)殖技術(shù)創(chuàng)新資金補(bǔ)貼，鼓勵(lì)各大養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行技術(shù)革新，以推動(dòng)我國(guó)現(xiàn)代化養(yǎng)殖業(yè)的進(jìn)步。

4.提升相關(guān)工作人員的診斷技術(shù)水平。加大相關(guān)技術(shù)人員到牛養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行妊娠診斷技術(shù)的推廣力度，為基層牧農(nóng)提供先進(jìn)的診斷技術(shù)，中小型牧場(chǎng)可加強(qiáng)本場(chǎng)內(nèi)相關(guān)工作人員對(duì)直腸診斷和B超等診斷技術(shù)操作的熟練程度，為更高效、更準(zhǔn)確的母牛妊娠診斷奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)；規(guī)模較大的牧場(chǎng)可推廣引進(jìn)現(xiàn)代化牛妊娠診斷技術(shù)，如使用早期孕檢試劑盒等大批量、規(guī)?；\斷，以提高牧場(chǎng)的診斷效率和母牛的繁育效率。

五、結(jié)語(yǔ)

綜上所述，目前，母牛妊娠診斷技術(shù)較多，包括傳統(tǒng)的直腸檢測(cè)、超聲波檢測(cè)技術(shù)及妊娠相關(guān)物質(zhì)檢測(cè)技術(shù)等，但隨著現(xiàn)代牛養(yǎng)殖場(chǎng)規(guī)?；?、集約化水平越來(lái)越高，傳統(tǒng)的診斷方法已不能滿足大型牧場(chǎng)需要。因此，現(xiàn)代化新型診斷技術(shù)對(duì)及時(shí)準(zhǔn)確診斷牛妊娠狀態(tài)、提高牛場(chǎng)繁育效率和經(jīng)濟(jì)效益具有十分重要的意義。