周麗珍，黃勁柏，陸美環(huán)

（英德市婦幼保健院 檢驗(yàn)科，廣東 清遠(yuǎn) 513000）

0 引言

地中海貧血是一組遺傳性溶血性、貧血疾病，主要是由于患者遺傳基因缺陷引起的血紅蛋白中一種或一種以上珠蛋白鏈合成缺失、不足引起的貧血[1]。由于患者基因缺陷具有復(fù)雜性、多樣性特點(diǎn)，使缺乏的珠蛋白鏈類型、數(shù)量及臨床特異性存在明顯差異性[2-3]。α、β是我國(guó)常見的遺傳性血液病類型，好發(fā)于廣東及廣西等地區(qū)[4]。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明[5]：在廣東α、β地中海貧血發(fā)生率分別為8.3%和2.4%。但是，對(duì)于上述兩類地中海貧血的攜帶者婚配，將會(huì)增加αβ復(fù)合型地中海貧血發(fā)生率，且該類型地中海貧血無(wú)論是α、β地中海貧血的雜合子個(gè)體婚配，均會(huì)增加重型地中海貧血發(fā)生率[6-7]。因此，通過(guò)產(chǎn)前診斷能阻止地中海貧血重癥患兒的出生，是較為有效的預(yù)防措施，但是臨床檢測(cè)、婚檢及產(chǎn)前檢查中，應(yīng)注意避免αβ復(fù)合型地中海貧血誤診及漏診率[8]。本研究以αβ復(fù)合型地中海貧血患者為對(duì)象，探討αβ復(fù)合型地中海貧血臨床表型分析及與血液學(xué)的相關(guān)性，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年3月-2019年12月αβ復(fù)合型地中海貧血患者144例和單純?chǔ)碌刎毣颊?74例作為對(duì)象，αβ復(fù)合型地中海貧血患者中男74例，女70例，年齡6個(gè)月至49歲，平均（26.98±4.51）歲。單純?chǔ)碌刎毣颊?，?7例，女87例，年齡9個(gè)月至38歲，平均（27.41±4.53）歲。兩組一般資料對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合αβ復(fù)合型地中海貧血診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]，且患者均可耐受；②經(jīng)過(guò)基因檢測(cè)為同時(shí)攜帶α、β地中海貧血基因型或攜帶β地中海貧血基因型；③具有完整的基線及隨訪資料者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并精神異常、凝血功能異常或缺鐵性貧血者；②認(rèn)知功能異常、伴有自 身免疫系統(tǒng)疾病或嚴(yán)重肝 腎功能異常者；③嚴(yán)重感染及其他類型的血紅蛋白病者。本研究均獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬簽署同意書。

1.2 儀器與設(shè)備

采用XN-1000型血細(xì)胞自動(dòng)分析儀、全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀（購(gòu)自法國(guó)sebia公司）分子雜交技術(shù)及Gap-PCR技術(shù)，購(gòu)自于深圳亞能公司；DNA提取試劑盒購(gòu)于廈門至善公司。

1.3 方法

1.3.1 血液學(xué)水平

采用XN-1000型血細(xì)胞自動(dòng)分析儀及全自動(dòng)毛細(xì)管電泳儀完成患者血常規(guī)及紅細(xì)胞參數(shù)測(cè)定（包括：平均紅細(xì)胞體積（MCV）、血紅蛋白（Hb）及紅細(xì)胞血紅蛋白（MCH）、血紅蛋白A2（HbA2）、血紅蛋白F（HbF）水平），所有操作均嚴(yán)格遵循試劑盒說(shuō)明書操作[10-11]。

1.3.2 基因型分析

測(cè)定方法：采用分子雜交技術(shù)及缺口PCR（Gap-PCR）技術(shù)測(cè)定患者臨床表型。α、β地中海貧血基因分析均采用DNA提取試劑盒及αβ復(fù)合型地中海貧血基因檢測(cè)試劑盒測(cè)定，即：αsea、-α3.7、-α4.2，3種缺失型突變基因采用Gap-PCR技術(shù)測(cè)定；診斷β地中海貧血17種點(diǎn)突變與α地中海貧血3種點(diǎn)突變，借助反向點(diǎn)雜交技術(shù)[12]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 24.0軟件處理，計(jì)數(shù)資料行χ2檢驗(yàn)，采用n（%）表示，計(jì)量資料行t檢驗(yàn)，采用（±s）表示，P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 αβ復(fù)合型地中海貧血患者α、β基因結(jié)果

144例αβ復(fù)合型地中海貧血患者均完成α、β基因測(cè)定，結(jié)果表明：α、β基因中主要以SEA和3.7、41-42、654基因?yàn)橹?，分別為79例、35例、64例和29例，其中β CD41-42/βn復(fù)合--SEA/αα有29例（占20%），其次βIVS-Ⅱ-654/βn復(fù)合--SEA/αα16例（占11.1%）、β CD41-42/βn復(fù)合-α（3.7）/αα16例（占11.1%），見表1。

表1 αβ復(fù)合型地中海貧血患者α、β基因結(jié)果

2.2 α、β型地中海貧血血液學(xué)比較

αβ復(fù)合型地中海貧血患者M(jìn)CV、Hb、MCH水平均高于單純?chǔ)滦偷刂泻Ｘ氀颊撸≒<0.05）；HbA2水平低于單純?chǔ)滦偷刂泻Ｘ氀颊撸≒<0.05）。αβ復(fù)合型地中海貧血患者與單純?chǔ)滦偷刂泻Ｘ氀颊叩腍bF水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表2。

表2 α、β型地中海貧血血液學(xué)比較（±s）

表2 α、β型地中海貧血血液學(xué)比較（±s）

3 討論

地中海貧血是危害人類健康的6種常見疾病之一，可分為α、β兩種[13]。既往研究表明[14]：β地中海貧血發(fā)生的分子基礎(chǔ)主要是由于β珠蛋白基因發(fā)生點(diǎn)突變引起，而我國(guó)南方以CD41-42、IVS-Ⅱ-654及CD71-72較為常見。而α地中海的分子基礎(chǔ)則是以α珠蛋白基因缺失為主，我國(guó)α型地中海貧血多以東南亞型α地中海貧血1（--SEA）、α地中海貧血2型則以右側(cè)缺失型（-α3.7）及左側(cè)缺失型（-α4.2）為主。本研究中，144例αβ復(fù)合型地中海貧血患者均完成α、β基因測(cè)定，結(jié)果表明：α、β基因中主要以SEA和3.7、41-42、654基因?yàn)橹?，分別為79例、35例、64例和29例，該結(jié)果與既往研究結(jié)果相符，其中β CD41-42/βn復(fù)合--SEA/αα占20%，其次βIVS-Ⅱ-654/βn復(fù)合--SEA/αα占11.1%、β CD41-42/βn復(fù)合-α（3.7）/αα占11.1%。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明[15]：廣東省人群中同時(shí)攜帶αβ復(fù)合型地中海貧血比例較高。因此，臨床上積極采取有效的措施提高αβ復(fù)合型地中海貧血檢出率，對(duì)指導(dǎo)地中海貧血遺傳咨詢和準(zhǔn)確地進(jìn)行產(chǎn)前診斷具有重要的意義[16]。

而在血液學(xué)上，αβ復(fù)合型地中海貧血患者M(jìn)CV、Hb、MCH水平均高于單純?chǔ)滦偷刂泻Ｘ氀颊撸≒<0.05）；HbA2水平低于單純?chǔ)滦偷刂泻Ｘ氀颊撸≒<0.05）。αβ復(fù)合型地中海貧血患者與單純?chǔ)滦偷刂泻Ｘ氀颊叩腍bF水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）從本研究結(jié)果看出，αβ復(fù)合型地中海貧血患者常伴有血液學(xué)水平異常，其表達(dá)水平能反映患者疾病嚴(yán)重程度。既往研究表明：αβ復(fù)合型地中海貧血患者主要表現(xiàn)為HbA2和（或）HbF水平升高及紅細(xì)胞脆性改變等β地中海貧血特征；而α地中海貧血的特征被掩蓋[17]。同時(shí)，αβ復(fù)合型地中海貧血的患者可能同時(shí)存在α、β珠蛋白的基因缺陷，導(dǎo)致α、β珠蛋白鏈合成相應(yīng)減少，從而導(dǎo)致α、β鏈比例失衡，避免大量β珠蛋白鏈過(guò)剩，使得患者貧血癥狀相對(duì)較輕。因此，臨床上對(duì)于αβ復(fù)合型地中海貧血患者，無(wú)論是與α、β地中海貧血雜合子婚配，均會(huì)增加娩出重型地中海貧血患兒[18]。臨床上對(duì)于復(fù)合型地中海貧血患者應(yīng)引起重視，對(duì)于β地中海貧血陽(yáng)性者應(yīng)加強(qiáng)α、β基因診斷，及時(shí)采取相應(yīng)的措施干預(yù)，降低地貧患兒免出率，提高我國(guó)人口質(zhì)量。

綜上所述，αβ復(fù)合型地中海貧血雙重雜合子發(fā)生率較高，且血液學(xué)具有特異性，加強(qiáng)患者血液學(xué)水平測(cè)定有助于降低臨床漏診率，正確地指導(dǎo)遺傳咨詢及產(chǎn)前診斷。