黃 鵬，張 杰，陳漢鑫，藍炎陽，姚錦愛，余德億

（1.福建省作物有害生物監(jiān)測與治理重點實驗室/福建省農業(yè)科學院植物保護研究所/福建省作物有害生物綠色防控工程研究中心，福建 福州 350013；2.漳州市農業(yè)科學研究所，福建 漳州 363005；3.漳州農業(yè)科技園區(qū)研發(fā)中心，福建 漳浦 363204）

0 引言

【研究意義】甜椒（Capsicum annuumvar.grossum）是我國周年化供應的重要蔬菜之一，種植面積達40 萬hm2以上，約占椒類種植總面積的1/4，是蔬菜產業(yè)穩(wěn)固發(fā)展及農民脫貧致富、鄉(xiāng)村振興的帶動產業(yè)之一。福建是我國重要的甜椒種植基地和南方冬季甜椒北運的主產地之一[1]，其中漳州是福建省最主要的甜椒種植地區(qū)，面積和產量占全省甜椒種植總面積和總產量的75%和80%左右[2]。近年來隨著全省甜椒產業(yè)的發(fā)展、壯大及生長栽培模式向設施化、集約化轉變，薊馬的發(fā)生呈蔓延、擴展態(tài)勢，該蟲以成蟲、若蟲主要群集在花朵、嫩葉等幼嫩部位銼吸汁液為害（圖1-A），直接影響了甜椒的長勢、產量和品質。目前，生產上對該蟲的防治主要以化學防治為主，生產者見蟲就打，由此引發(fā)的化學農藥濫用現象與我國綠色植保的引領導向沖突不斷，挖掘和利用蟲生真菌等綠色環(huán)保且有效的生防微生物資源用于控害對甜椒的綠色生產具有重要意義?！厩叭搜芯窟M展】蠟蚧輪枝菌（Lecanicillium lecanii）是一種地理分布和寄主范圍均比較廣泛的蟲生真菌，在國內外已被證實對榕管薊馬（Gynaikothrips uzeli）、西花薊馬（Frankliniella occidentalis）、棕櫚薊馬（Thrips palmi）和煙薊馬（T.tabaci）等薊馬具有良好的控制作用[3-6]，其中菌株LL-01 為福建省農業(yè)科學院植物保護研究所分離并證實對粉蚧的致死效果達84%以上[7]，蠟蚧輪枝菌具有殺蟲范圍廣譜及擴散能力較強的特點[8]?！颈狙芯壳腥朦c】福建省漳州市甜椒種植基地上的薊馬種類及蠟蚧輪枝菌LL-01 對其的生防潛力有待深入探討?！緮M解決的關鍵問題】以福建省漳州的甜椒種植基地為觀測點，調查、統計不同甜椒上薊馬的種類和數量，并測定蠟蚧輪枝菌LL-01 對甜椒薊馬優(yōu)勢種的致病力，以期明確薊馬對甜椒品種的嗜好性及發(fā)生種類和優(yōu)勢種等發(fā)生情況，揭示蠟蚧輪枝菌對甜椒薊馬優(yōu)勢種的生防潛力，為甜椒薊馬的綠色、可持續(xù)防控奠定基礎。

圖1 甜椒薊馬對3 種甜椒的嗜好性Fig. 1 Preference of thrips on 3 varieties of sweet peppers

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試甜椒種植基地位于漳州市詔安縣（北緯23°45′34.24″、東經117°9′32.67″），面積約0.7 hm2，種植品種為常見的特雅斯、路帥和布蘭妮3 種，種植方式為大棚種植（長×寬=40 m×8 m），苗齡60 d，肥水和病蟲照常管理、措施一致。供試甜椒薊馬優(yōu)勢種采集于該基地，在室溫25～28 ℃、相對濕度60%～70%、光周期12 L∶12 D 條件下，飼養(yǎng)于該薊馬最嗜好甜椒品種路帥的盆栽植株上，取羽化3 d 的成蟲（體型最大，活動、取食和為害能力最強）備用；為防止薊馬逃離，盆栽甜椒均置于養(yǎng)蟲籠中，并用80 目紗網套住接蟲的花朵。供試蠟蚧輪枝菌LL-01 從受感染的南洋臀紋粉蚧（Planococcus lilacinus）上分離獲得，已保藏于中國微生物菌種管理委員會普通微生物中心（保藏號：CGMCC No.21940）[7]，活化采用察氏培養(yǎng)基（NaNO33 g、KH2PO41 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KCl 0.5 g、FeSO40.01 g、蔗 糖30 g、瓊脂粉20 g 和蒸餾水1 000 mL）；取斜面保存的菌株LL-01 接種到直徑9.0 cm 的培養(yǎng)基平板上，置于溫度（26±1）℃、光周期為6 L∶18 D 的HGZ-150型光照培養(yǎng)箱內培養(yǎng)7 d 備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 甜椒薊馬發(fā)生情況調查 2020 年11 月至2021 年4 月，從3 種甜椒種植地塊中各隨機選取3 個大棚作為調查棚，每個調查棚至少間隔1 個大棚；再將每個調查棚均勻劃分為10 個長8 m、寬4 m 的小區(qū)；接著按平行線取樣法，選取5 個小區(qū)作為取樣點，每個取樣點間隔1 個小區(qū)；后每月定時在每個取樣點內隨機采集2 朵花和3 片嫩葉于50 mL的離心管，每個調查棚共采集10 朵花和15 片嫩葉，即1 次重復。將采集的花朵置于4 ℃冰箱中冷藏12 h，降低薊馬的活躍度后，先在10×放大鏡下觀察、統計每種甜椒花朵和嫩葉上薊馬成蟲、若蟲的蟲口總量，共調查6 次，比較薊馬對3 種甜椒的嗜好性；再置于SZ-760 型體視顯微鏡下，結合《中國農作物薊馬》[9]對各蟲態(tài)的甜椒薊馬進行種類鑒定，并統計每種薊馬的種群數量和相對豐度，后參考余德億等[10]的方法確定甜椒薊馬優(yōu)勢種。

1.2.2 蠟蚧輪枝菌對甜椒薊馬優(yōu)勢種的致病力測定取培養(yǎng)7 d 的菌株LL-01，往培養(yǎng)皿中加入10 mL 含0.05%吐溫-80 的無菌水，刮取分生孢子并經3 層紗布過濾得孢子原液；用無菌水將孢子原液稀釋成1×108、1×107、1×106、1×105和1×104孢子·mL-15 個處理濃度，以0.05%吐溫-80 無菌水為對照，每個處理3 次重復。取直徑9 cm 的培養(yǎng)皿，依次鋪入相同直徑的花泥和濾紙各1 片，花泥厚0.5 cm 吸水6 mL，濾紙上再放1 朵帶梗的甜椒花，花梗用濕棉花包裹并與濾紙緊貼；用軟毛筆分別往每個處理菌液中挑取30 頭甜椒薊馬成蟲，浸泡10 s 后挑到濾紙上，晾干2 min 后再挑到花朵上用保鮮膜將培養(yǎng)皿封口，并用0.27 mm 的昆蟲針在膜上密扎細孔通氣；將培養(yǎng)皿置于溫度（26±1）℃、相對濕度（90±5）%、光周期6 L∶18 D 的MGC-350HP-2 型人工氣候箱內，每天定時觀察并挑除死亡蟲體于葉片上單獨觀察，以蟲體長出菌絲確認有效侵染，直至所有處理中試蟲的死亡數停止發(fā)生變化為止，統計甜椒薊馬的死亡率，計算菌株LL-01 的致死率、致死中濃度LC50和致死中時LT50。

1.3 數據分析

在DPS 7 軟件中，利用Tukey 檢驗法分別對3 種甜椒上薊馬的蟲口總量、種群數量和相對豐度及菌株LL-01 對甜椒薊馬優(yōu)勢種的致死率進行多重比較；利用機率值分析法計算菌株LL-01 對甜椒薊馬優(yōu)勢種的致死中濃度LC50和致死中時LT50，后取實際累計死亡率達50%以上處理的計算數值作為有效結果。

2 結果與分析

2.1 甜椒薊馬發(fā)生情況

2.1.1 甜椒薊馬對3 種甜椒的嗜好性 在3 種甜椒上調查到的薊馬蟲口總量不同；在路帥和布蘭妮上分別為1 822.3、1 620.0 頭，兩者差異不顯著，但顯著多于特雅斯；在特雅斯上為800.7 頭，未達其他2 種甜椒的50.00%（圖1-B）?？梢?，在3 種甜椒中，薊馬對路帥和布蘭妮的嗜好性強，對特雅斯的嗜好性弱。

2.1.2 甜椒薊馬的種類和優(yōu)勢種 在特雅斯、路帥和布蘭妮3 種甜椒上，調查到有薊馬科Thripidae 的花薊馬（Frankliniella intonsa）、黃胸薊馬（Thrips hawaiiensis）和棕櫚薊馬（T.palmi）共存，包含1 個科2 個屬3 個種（圖2）；其中花薊馬的種群數量和相對豐度分別為730.67～1 725.00 頭和91.31%～94.93%，均顯著高于其他2 種薊馬；黃胸薊馬和棕櫚薊馬的種群數量差異不顯著，但它們的相對豐度差異顯著，盡管如此兩者的相對豐度均未達8.00%（表1）?？梢?，花薊馬在3 種甜椒上的種群數量和相對豐度均占有絕對優(yōu)勢，為優(yōu)勢種。

圖2 甜椒上的3 種薊馬Fig. 2 Three species of thrips infested sweet peppers

表1 3 種甜椒上薊馬的種群數量和相對豐度Table 1 Population and relative abundance of thrips on 3 varieties of sweet peppers

2.2 蠟蚧輪枝菌對甜椒薊馬優(yōu)勢種的致病力

2.2.1 菌株LL-01 對花薊馬的致死率 菌株LL-01 能有效侵染花薊馬（圖3-A）；在接菌7 d 后，菌株的致死率停止發(fā)生變化，1×104和1×105孢子·mL-1處理的致死率相對較低，最高僅44.25%；1×106孢子·mL-1處理的致死率雖達57.47%，但與1×105孢子·mL-1處理差異不顯著；1×107和1×108孢子·mL-1處理的致死率相對較高，分別達78.16%和87.36%，兩者均顯著高于其他3 個處理（圖3-B）。

圖3 菌株LL-01 對花薊馬的侵染（A）及致死率（B）Fig. 3 Infectivity (A) and lethality (B) of LL-01 on F.intonsa

2.2.2 菌株LL-01 對花薊馬的LC50接菌后1～3 d，由于菌株LL-01 各處理對花薊馬的致死率均未達50%，故機率值分析法計算出的LC50均偏大，超出本試驗設計濃度范圍；接菌后4～7 d 后，菌株LL-01 的LC50均隨侵染時間的延長而遞減，在第6 天達到最低3.47×105孢子·mL-1（表2）。

表2 菌株LL-01 對花薊馬的LC50Table 2 LC50 of LL-01 on F.intonsa

2.2.3 菌株LL-01 對花薊馬的LT50因菌株LL-01的1×104和1×105孢子·mL-1處理對花薊馬的致死率均未達50%，故機率值分析法計算出的LT50偏大，超出本試驗試蟲停止死亡的時間；其他3 個處理對花薊馬的LT50均隨菌液濃度的升高而縮短，在1.00×108孢子·mL-1處理時達到最短3.73 d（表3）。

表3 菌株LL-01 對花薊馬的LT50Table 3 LT50 of LL-01 on F.intonsa

3 討論與結論

近年來，薊馬逐漸成為福建甜椒上的重要害蟲，但現階段該蟲對甜椒品種的嗜好性及發(fā)生種類和優(yōu)勢種等情況均未明確，影響了后續(xù)防控技術方案的制定，不利我省甜椒產業(yè)發(fā)展。目前，有關甜椒薊馬的研究報道相對較少且不同地區(qū)的發(fā)生情況存在差異，黃亞冰等[11]報道云南大棚甜椒上有黃胸薊馬、棕櫚薊馬和花薊馬3 者共存，穆常青等[12]報道北京溫室彩椒上西花薊馬（F.occidentalis）的為害日趨嚴重，張安盛等[13]報道棕櫚薊馬是山東日光溫室菜椒上的重要害蟲，但這些均未涉及甜椒薊馬對寄主品種嗜好性和優(yōu)勢種方面的研究。本研究通過調查福建3 種常見甜椒上薊馬的寄主嗜好性及發(fā)生種類和優(yōu)勢種等發(fā)生情況發(fā)現，甜椒薊馬對路帥品種和布蘭妮品種的嗜好性強，對特雅斯品種的嗜好性弱；發(fā)生種類有花薊馬、黃胸薊馬和棕櫚薊馬3 種，這與黃亞冰等[11]的報道類似，本研究還通過種群數量和相對豐度的比較確定優(yōu)勢種為花薊馬，這為我省甜椒薊馬的綠色、可持續(xù)防控提供靶標；后續(xù)將在此基礎上，繼續(xù)分析花薊馬在甜椒上的蟲齡結構比例、發(fā)育歷期、繁殖能力和種群動態(tài)等生物學特性，為該蟲有效防控時期的確定及防控策略和方案的制定提供參考。

蠟蚧輪枝菌廣泛分布于熱帶、亞熱帶和溫帶等地，能有效侵染半翅目Hemiptera、纓翅目Thysanoptera、直翅目Orthoptera 和雙翅目Diptera 等多種昆蟲[14]，利用該蟲生真菌防控甜椒薊馬具有潛在的生防應用前景。致病力是衡量蟲生菌生防潛力和應用前景的重要指標[15]；本研究發(fā)現菌株LL-01 對甜椒薊馬優(yōu)勢種花薊馬成蟲的侵染致死效果隨菌液孢子濃度升高和侵染時間延長而上升，接菌7 d 后的LC50達3.47×105孢子·mL-1，1×107～1×108孢子·mL-1處理的累計致死率和LT50分別達78.16%～87.36%和3.73～4.24 d，與袁盛勇等[3-4]利用蠟蚧輪枝菌分別侵染棕櫚薊馬和西花薊馬成蟲、若蟲及余德億等[6]利用蠟蚧輪枝菌侵染榕管薊馬成蟲的效果類似?？梢?，蠟蚧輪枝菌LL-01 對甜椒薊馬優(yōu)勢種花薊馬中體型最大，活動、取食和為害能力最強的成蟲具有強致病力，結合前人的類似研究結果可以預見該菌株對花薊馬的若蟲也會具有強致病力，生防潛力和應用前景良好；后續(xù)將進一步細化研究該菌株對花薊馬其他蟲態(tài)的侵染效果及對它們生長、發(fā)育等生物學特性的影響，驗證該菌株在田間的防治效果和穩(wěn)定性，為甜椒薊馬的綠色、可持續(xù)防控奠定基礎。