張瑞華 焦玉霞

（1濰坊職業(yè)學(xué)院，山東濰坊261041；2萊蕪陳毅中學(xué)，山東濟(jì)南271100）

枝條菌種以接種速度快、方便、接種后上中下多點(diǎn)萌發(fā)，料袋內(nèi)菌絲長(zhǎng)滿袋時(shí)間較傳統(tǒng)的栽培種提早5~10 d 而備受青睞[1]。猴頭菇是典型木腐菌[2]，采用較短袋裝料時(shí)，多用枝條菌種接種料袋，而常規(guī)固體菌種培養(yǎng)枝條菌種需55~60 d。筆者介紹用猴頭菇液體菌種接種枝條培養(yǎng)基培養(yǎng)猴頭菇枝條菌種技術(shù)，為猴頭菇枝條菌種的生產(chǎn)提供技術(shù)指導(dǎo)。

1 猴頭菇液體（搖瓶）菌種生產(chǎn)

1.1 液體（搖瓶）菌種培養(yǎng)基配方

液體菌種培養(yǎng)基配方：土豆200 g，紅糖20 g，玉米粉5 g，麩皮10 g，加水1 000 mL。

1.2 液體（搖瓶）菌種培養(yǎng)

按照配方稱(chēng)取各原料。土豆去皮挖芽眼，切丁放入鍋內(nèi)，麩皮用紗布包裹好放入鍋內(nèi)，倒入1 200 mL 水，煮開(kāi)后計(jì)時(shí)20 min 后，8 層紗布過(guò)濾，取濾液1 000 mL，若不足，用水補(bǔ)足；將濾液倒入鍋內(nèi)繼續(xù)加熱，將提前用少量涼水拌好的玉米粉倒入鍋內(nèi)，繼續(xù)加熱7~8 min，倒入紅糖，徹底融化后，將濾液裝入錐形瓶，每瓶裝液量不超過(guò)其容積的三分之二，并在錐形瓶中放入磁力攪拌子。培養(yǎng)基于121.1 ℃高壓滅菌30 min，冷卻至30 ℃以下接試管種，每瓶接入6~7 塊綠豆粒大小的基內(nèi)菌絲。接種完后置于1 000 r/min 的磁力攪拌器上碎菌種約24 h（目的是形成多個(gè)萌發(fā)點(diǎn)，有利于培養(yǎng)的菌球均勻一致）；后再放入恒溫振蕩培養(yǎng)箱，溫度22 ℃，轉(zhuǎn)速150 r/min，培養(yǎng)約7 d，菌球密度適中時(shí)備用。

振蕩培養(yǎng)液體菌種期間，若出現(xiàn)絮狀菌球，可以再次放到1 000 r/min 磁力攪拌器上，碎菌種約24 h。

2 枝條選擇及處理

培養(yǎng)猴頭菇枝條菌種一般選擇闊葉樹(shù)枝條，以楊木枝條較佳，規(guī)格為長(zhǎng)12~15 cm，寬0.4~0.7 cm，厚0.4~0.7 cm。

枝條需要提前浸泡（圖1），浸泡時(shí)間24~36 h，氣溫20 ℃以上時(shí)，浸泡時(shí)間要縮短，可24~28 h（為防止pH 下降太快，浸泡時(shí)可加入0.5%~1%的生石灰），氣溫15 ℃以下時(shí)要延長(zhǎng)浸泡時(shí)間，30~36 h 不等。浸泡合格的標(biāo)準(zhǔn)是掰開(kāi)枝條沒(méi)有白心，浸泡完畢后瀝干水分備用（圖2）。

圖1 枝條整袋浸泡

圖2 枝條瀝水

瀝干水分的枝條表面裹上麩皮（圖3），以提高接種后菌種萌發(fā)速度。

圖3 裹麩皮

3 配制輔料

猴頭菇枝條菌種培養(yǎng)基由枝條和輔料配制而成，輔料營(yíng)養(yǎng)較枝條豐富，可以加快發(fā)菌速度。配制輔料的配方較多，如棉籽殼80%，麩皮14%，玉米粉3%，豆粕2%，石膏1%，料含水量62%~65%，pH6~7。

4 培養(yǎng)料裝袋、窩口

選擇15 cm×（33~35）cm×0.005 cm 聚丙烯塑料袋，先裝入1~3 cm 厚的輔料，目的是防止枝條刺破袋底；再沿袋壁整齊裝入枝條（滅菌時(shí)不會(huì)刺破袋，方便取枝條菌種），一般每袋裝枝條40~60 根；而后再裝入輔料，輔料蓋住枝條，厚1~2 cm（圖4）。

圖4 裝好的枝條包

培養(yǎng)猴頭菇枝條菌種要采用窩口的方式封口，如若用套環(huán)蓋封口，容易形成老菌皮，菌絲不再吃料（圖5）。而采用接種棒窩口的方式封口（圖6），接種后塞入海綿，可有效避免出現(xiàn)發(fā)菌不滿的情況。

圖5 套環(huán)蓋發(fā)菌狀態(tài)（效果不好）

圖6 窩口后插入接種棒

5 料袋滅菌

料袋倒放在滅菌筐中（倒放可有效防止滅菌過(guò)程中蒸汽大量在料袋中存留，避免導(dǎo)致培養(yǎng)基水分含量過(guò)高，接種后料袋缺氧，菌絲生長(zhǎng)不利），123~128 ℃高壓滅菌60~90 min。

6 接種及培養(yǎng)

在超凈工作臺(tái)、接種箱或接種室接種。將料袋、液體菌種及接種工具放入超凈工作臺(tái)、接種箱或接種室中。若用超凈工作臺(tái)接種，噴灑75%酒精，提前30 min 打開(kāi)風(fēng)機(jī)和紫外燈凈化空氣和殺菌；若用接種室接種，提前30 min 打開(kāi)高效過(guò)濾器和紫外燈，使操作空間的空氣潔凈程度達(dá)到百級(jí)水平；若用接種箱接種，提前用3%~5%來(lái)蘇爾噴灑箱內(nèi)空間，再用二氯異氰尿酸鈉煙熏劑熏蒸[3]，煙熏劑劑量為5 g/m3。

接種所用的工具都應(yīng)消毒，接種時(shí)一人拔接種棒，一人將液體菌種倒入，每袋接種量約15 mL，隨后塞上滅菌海綿（不要用棉花，棉花營(yíng)養(yǎng)較豐富，后期會(huì)在棉花處形成原基）。

接種后料包放于溫度22~24 ℃，空氣相對(duì)濕度60%~70%培養(yǎng)室，無(wú)光照培養(yǎng)，約17~20 d菌絲可長(zhǎng)滿料包（圖7）。

圖7 培養(yǎng)好猴頭菇枝條菌種

7 應(yīng)用效果

枝條菌種接種栽培袋（裝料高20 cm，料濕重1 300 g 左右，料含水量63%~65%）后，15~16 d 從外部可以看到菌絲，25~27 d 菌絲長(zhǎng)滿栽培袋（圖8）。

圖8 接種22 d后發(fā)菌狀態(tài)