彭毅信，王方玲

（欽州市檢驗(yàn)檢測(cè)院，廣西欽州 535000）

1 檢測(cè)樣品前處理技術(shù)分析

1.1 固相微萃取技術(shù)

固相微萃取技術(shù)是在固相萃取技術(shù)基礎(chǔ)上衍生出的新型樣品前處理技術(shù)，有效改善了固相萃取技術(shù)中孔道易被吸附劑堵塞的問題。目前，固相微萃取技術(shù)包含直接萃取和頂空法萃取兩種模式，前者是將石英纖維放置在待測(cè)樣品中，適用于半揮發(fā)氣體和液體樣品的萃取；后者是將石英纖維放置在待測(cè)樣品的頂空，適用于揮發(fā)性固體和廢水水樣的萃取。固相微萃取技術(shù)應(yīng)用過程中，可通過改變涂層材料或厚度的方式調(diào)節(jié)微萃取的選擇性，通過加入鹽或調(diào)節(jié)pH 值的方式提高提取化合物的回收率。在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中，該技術(shù)的應(yīng)用只需少量的樣品，具有簡(jiǎn)單、便捷的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)?，F(xiàn)階段，固相微萃取技術(shù)和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）聯(lián)合使用，在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中具有顯著的效果，其中常見的固定相和萃取對(duì)象如表1 所示[1]。

表1 固相微萃取技術(shù)常見固定相和萃取對(duì)象

1.2 超臨界流體萃取技術(shù)

處于臨界溫度和臨界壓力下的高密度流體被稱作超臨界流體，這類物質(zhì)既具有液體特點(diǎn)又具有氣體特點(diǎn)。在應(yīng)用該技術(shù)時(shí)，需要在綜合考慮臨界條件、溶解能力、萃取劑毒性、腐蝕性以及價(jià)格等因素的基礎(chǔ)上，科學(xué)選擇最佳的萃取劑。對(duì)于該技術(shù)而言，萃取和分離是極為重要的技術(shù)環(huán)節(jié)，將對(duì)萃取效率產(chǎn)生決定性影響。在該技術(shù)具體實(shí)施過程中，技術(shù)人員應(yīng)充分考慮以下因素（見表2）對(duì)技術(shù)應(yīng)用效果的影響，并通過科學(xué)的控制手段最大限度保證其應(yīng)用效果[2]。

表2 超臨界流體萃取技術(shù)應(yīng)用效果影響因素分析

2 食品檢測(cè)中常見的農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)

2.1 傳統(tǒng)農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)

2.1.1 色譜法

色譜法（色譜分析法）也稱為“層析法”，屬于一種分離和分析方法，常用于生物化學(xué)、有機(jī)化學(xué)及分析化學(xué)領(lǐng)域，是食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)方面最為常見的一種傳統(tǒng)化學(xué)性分析方法。該技術(shù)原理為利用不同物質(zhì)在兩相中分配系數(shù)的差異性，通過多次重復(fù)性分配來達(dá)到物質(zhì)分離的目的。該檢測(cè)技術(shù)具有應(yīng)用層面廣、操作簡(jiǎn)單便捷、吸附性強(qiáng)、分離效率高及分析迅速等優(yōu)勢(shì)。在現(xiàn)代食品檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，該技術(shù)的應(yīng)用主要分為氣相色譜法和高效液相色譜法兩種形式。其中，氣相色譜法是以氣體作為流動(dòng)相，利用不同物質(zhì)極性、吸附性及沸點(diǎn)的差異性對(duì)混合物進(jìn)行分離，并且可根據(jù)出峰順序、時(shí)間、峰的面積大小和高低，實(shí)現(xiàn)化合物的定量分析。隨著高靈敏性檢測(cè)設(shè)備的不斷研發(fā)，近幾年氣相色譜法的應(yīng)用范圍、分析靈敏度和效率得到進(jìn)一步提升，成為有機(jī)磷、有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)分析的檢測(cè)技術(shù)手段。而高效液相色譜法是以液體為流動(dòng)相，利用高壓輸液系統(tǒng)，將不同比例的混合劑、緩沖劑或具有不同極性的單一溶劑泵送到裝有固定相的色譜柱中，并在色譜柱中對(duì)待測(cè)物中各成分進(jìn)行分離，然后利用專業(yè)檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行定性、定量分析[3]。

2.1.2 波譜解析法

波譜解析法的檢測(cè)原理為殘留農(nóng)藥中的特征官能團(tuán)，會(huì)在特定條件下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，形成具有獨(dú)特波長(zhǎng)的顏色反映，通過對(duì)顏色進(jìn)行波譜解析來確定農(nóng)藥殘留成分及殘留量?，F(xiàn)階段，美國(guó)分析化學(xué)家 協(xié) 會(huì)（Association of Official Analytical Chemists，AOAC）要求相關(guān)檢測(cè)機(jī)構(gòu)和技術(shù)人員在進(jìn)行食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)時(shí)，利用紅外光譜法檢測(cè)食品中敵敵畏、甲拌磷等類型農(nóng)藥的殘留情況，用分光光度法對(duì)食品中馬拉硫磷、對(duì)硫磷等類型農(nóng)藥的殘留情況進(jìn)行檢測(cè)。而表面增強(qiáng)拉曼光譜與近紅外衰減全反射光譜能夠顯著提升檢測(cè)分析的靈敏度，且具有所需樣品量少、檢測(cè)分析快速等特征，近幾年在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中得到了廣泛的應(yīng)用[4]。

2.2 新興農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)

2.2.1 酶抑制法

酶抑制法是基于酶活性易受酶抑制劑（有機(jī)磷或其他物質(zhì)）影響，而出現(xiàn)活力下降或喪失現(xiàn)象的原理，來實(shí)現(xiàn)物質(zhì)定性定量分析的一種新興生化分析檢測(cè)技術(shù)。在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作中，檢測(cè)技術(shù)人員會(huì)根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)動(dòng)物體內(nèi)乙酰膽堿（AChE）具有明顯抑制作用的原理，向待檢測(cè)樣品中加入相應(yīng)的酶抑制劑，然后觀察樣品吸光度值和顏色變化，并進(jìn)行酶抑制率計(jì)算，以此實(shí)現(xiàn)對(duì)食品農(nóng)藥殘留情況的準(zhǔn)確檢測(cè)。在實(shí)際生活中，該快速檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用主要有以下兩種形式。①試紙法。即將待測(cè)樣品和試劑一同放在專業(yè)的檢測(cè)試紙上，然后根據(jù)反應(yīng)現(xiàn)象對(duì)農(nóng)藥殘留情況進(jìn)行判斷。此方法操作簡(jiǎn)單便捷、檢測(cè)速度快、檢測(cè)結(jié)果較為明顯，在食品農(nóng)藥殘留現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中具有廣泛的應(yīng)用。②比色法。該方法以可生成有色化合物的顯色反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過對(duì)有色化合物溶液顏色的比較和測(cè)量，來測(cè)定待測(cè)樣品中的農(nóng)藥殘留情況。此方法具有靈敏度高、穩(wěn)定性好、選擇性高以及適宜條件下檢測(cè)速度快等應(yīng)用優(yōu)勢(shì)[5]。

酶抑制法既具有適應(yīng)性強(qiáng)、檢測(cè)速度快、操作便捷以及對(duì)樣品無特殊要求等應(yīng)用優(yōu)勢(shì)，也存在檢測(cè)藥劑無法回收再利用、檢測(cè)精度較低、對(duì)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥以外的農(nóng)藥辨識(shí)度較低等技術(shù)缺陷，因此需要檢測(cè)技術(shù)人員根據(jù)實(shí)際條件和檢測(cè)需求合理使用。

2.2.2 酶免疫法

酶免疫法是利用抗原與抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)來實(shí)現(xiàn)相應(yīng)的檢測(cè)分析目標(biāo)，其與單一性的抗體、抗原檢測(cè)技術(shù)的本質(zhì)性差異在于二者具有完全不同的檢測(cè)對(duì)象，前者的檢測(cè)對(duì)象是酶，而后者的檢測(cè)對(duì)象是輔酶。從實(shí)際應(yīng)用情況來看，酶免疫法具有檢測(cè)成本低、檢測(cè)效果較好、檢測(cè)速度快且能夠同步進(jìn)行多次試驗(yàn)等優(yōu)點(diǎn)。但其技術(shù)弊端也比較明顯，對(duì)試劑的選擇性具有較為苛刻的要求，在檢測(cè)具有類似結(jié)構(gòu)的化合物時(shí)，容易出現(xiàn)一定程度的交叉反應(yīng)或“假陽性”結(jié)果判斷，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，酶免疫技術(shù)更適用于單殘留物質(zhì)的檢測(cè)[6]。

2.2.3 膠體金法

膠體金法指的是在鞣酸、枸櫞酸鈉、白磷和抗壞血酸等還原劑的作用下，氯金酸（HAuCl4）會(huì)逐漸聚合成一定大小的“金?！?，并在靜電作用下呈現(xiàn)出具有良好穩(wěn)定性的膠體狀態(tài)，成為帶負(fù)電的疏水膠溶液。在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，該方法的應(yīng)用主要依靠膠體金免疫測(cè)試紙來實(shí)現(xiàn)，即試紙利用雙抗體夾心法、層析原理、間接法或免疫競(jìng)爭(zhēng)法，應(yīng)用待測(cè)物質(zhì)的特異性及能與其發(fā)生特異反應(yīng)的抗體或抗原，以氯金酸在還原劑作用下生成的“金?！睘轱@色劑，來檢測(cè)分析食品樣品中的農(nóng)藥殘留情況。具體操作方法如下。

檢測(cè)技術(shù)人員將待測(cè)樣品加入膠體金免疫檢測(cè)卡的加樣孔中，此時(shí)樣品會(huì)在檢測(cè)卡的層析作用下逐漸向另一端層析，隨著樣品不斷層析，其中存在的待測(cè)成分會(huì)固定在測(cè)試線（T 線）上并且呈現(xiàn)出明顯的顏色變化。約5 min 后，檢測(cè)人員便可參照控制線（C 線），判斷出樣品中殘留農(nóng)藥的類別和殘留量。該檢測(cè)方法無需復(fù)雜的儀器設(shè)備且短時(shí)間內(nèi)便可觀察到檢測(cè)結(jié)果，因此非常適用于食品農(nóng)藥殘留的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)[7]。

2.2.4 納米生物法

近幾年，隨著我國(guó)納米技術(shù)的愈發(fā)成熟，納米生物法在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用愈發(fā)廣泛。由相同成分組成的普通材料和納米材料，在生物學(xué)特性和物理性質(zhì)方面卻存在顯著的差別，納米生物法便是利用這一技術(shù)原理來實(shí)現(xiàn)食品農(nóng)藥殘留的定性和定量檢測(cè)。目前，納米生物法在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用主要有多壁碳納米管、量子點(diǎn)、納米金粒子3 種形式，如納米金粒子是一種經(jīng)過包覆劑處理，表面帶有負(fù)電荷的粒子，而大部分農(nóng)藥中的有機(jī)成分都會(huì)包含帶有正電荷的氨基，因此將納米金粒子加入到待測(cè)樣品中，若樣品中有農(nóng)藥殘留，則納米金粒子便會(huì)在靜電吸附作用下與氨基結(jié)合，與此同時(shí)，有機(jī)農(nóng)藥中的某些基團(tuán)能夠取代納米金粒子表面的包覆劑，在理化因素的共同作用下，樣品中的納米金粒子會(huì)發(fā)生團(tuán)聚現(xiàn)象，呈現(xiàn)出明顯的顏色變化，通常團(tuán)聚現(xiàn)象和顏色變化越明顯，說明樣品中的農(nóng)藥殘留量越大[8]。

3 結(jié)語

農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)的科學(xué)性、檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性都會(huì)對(duì)食品安全性的判斷產(chǎn)生直接影響，因此相關(guān)檢測(cè)技術(shù)人員必須熟悉現(xiàn)階段食品安全檢測(cè)中常見的樣品前處理技術(shù)、傳統(tǒng)農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)以及新興農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)，了解各類技術(shù)的檢測(cè)原理、技術(shù)特點(diǎn)、應(yīng)用優(yōu)勢(shì)以及技術(shù)弊端，并在實(shí)際工作中進(jìn)行靈活、科學(xué)的選用。這樣才能最大限度保證農(nóng)藥殘留檢測(cè)的科學(xué)性和準(zhǔn)確性，為食品安全提供有力保障。