宣富君 ，常國亮 ，鮑成滿 ，陳友明 ，王華 ，張林杰

（1.鹽城師范學(xué)院濕地學(xué)院，江蘇省鹽土生物資源研究重點實驗室，江蘇 鹽城 224051；2.淮陰師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，江蘇省特色水產(chǎn)繁育工程研究中心，江蘇 淮安 223300；3.江蘇省淡水水產(chǎn)研究所，江蘇 南京 210017；4.阜寧宏滿農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，江蘇 鹽城 224422）

小龍蝦，學(xué)名克氏原螯蝦（Procambarus clarkii），隸屬于甲殼綱，十足目，螯蝦科。近年來隨著稻蝦綜合種養(yǎng)面積的不斷擴(kuò)大，由于早上市成蝦價格較高，為獲取較高收益，養(yǎng)殖戶對小龍蝦春季早苗的需求量迅速增加。研究發(fā)現(xiàn)，小龍蝦屬于變溫動物，其繁殖、發(fā)育、生長對溫度變化極為敏感，低溫往往導(dǎo)致其生長停滯甚至死亡。現(xiàn)于2021 年2 月，在鹽城師范學(xué)院江蘇省灘涂生物資源與環(huán)境保護(hù)重點實驗室，開展了溫度驟變對不同規(guī)格小龍蝦苗種成活率影響的試驗，其結(jié)果可為養(yǎng)殖戶和科技工作者提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

小龍蝦苗種來源于阜寧羅橋鎮(zhèn)雙聯(lián)村宏滿農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司的稻蝦試驗田。按不同規(guī)格分組，分別為（5～8 g，L1 組；2～4 g，L2 組；0.8～1.2 g，L3組；0.2～0.5 g，L4 組）分別暫養(yǎng)于 4 個底部鋪沙、面積為500 cm×400 cm 的品字形水缸內(nèi)。其間，保證溶解氧與食物（魚糜）充沛，水體清新。

1.2 試驗方法

選用 3 個低溫恒溫培養(yǎng)箱（SANYO，MIR-153），可控溫度為-10～40 ℃。每個培養(yǎng)箱內(nèi)均放入8 個容積為 240 cm×160 cm×80 cm 的長方形塑料盒，每種規(guī)格龍蝦組（L1—L4）各2 盒，每個盒內(nèi)放入10 尾健康活潑的蝦苗。每個規(guī)格組設(shè)置6 個平行。暫養(yǎng)3 d 后，開始試驗，試驗可分為3 個階段。

階段Ⅰ：降溫10 ℃，溫度驟變至5 ℃。將裝有蝦苗的盒子放入低溫恒溫培養(yǎng)箱，開始時設(shè)置為 15 ℃，12 h 后設(shè)置為 5 ℃，24 h 后設(shè)置為 15 ℃，36 h 后結(jié)束試驗。根據(jù)每個盒內(nèi)蝦苗的死亡數(shù)，統(tǒng)計每組的存活率。

階段Ⅱ：降溫10 ℃，溫度驟變至冰點。將裝有蝦苗的盒子放入低溫恒溫培養(yǎng)箱，開始時設(shè)置為10 ℃，12 h 后設(shè)置為 0 ℃（表層出現(xiàn)浮冰），24 h 后設(shè)置為10 ℃，36 h 后結(jié)束試驗，統(tǒng)計存活率。

階段Ⅲ：重復(fù)階段Ⅱ，加入抗應(yīng)激反應(yīng)的維生素C（V）。參考Vc 可以提升小龍蝦的免疫性能及抗應(yīng)激能力的相關(guān)研究，配制含Vc（VC 應(yīng)激靈，漁美惠）的水溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%，對大規(guī)格蝦苗（≥2 g，L1，L2）重復(fù)階段Ⅱ。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 13.0 軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，采用SigmaPlot 14.0 軟件作圖。其中，采用單因素方差分析法和Bonferroni 法進(jìn)行組間多重比較，組內(nèi)進(jìn)行獨立樣本t 檢驗，P＜0.05 為差異具統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.01 為差異極具統(tǒng)計學(xué)意義。

2 試驗結(jié)果

溫度驟變對小龍蝦不同規(guī)格苗種存活率的影響見圖 1（A）（B），圖中不同字母 a、b、c 表示各組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。由圖1 可見，經(jīng)歷溫度驟變10 ℃，根據(jù)設(shè)置條件（階段Ⅰ—Ⅱ），不同規(guī)格小龍蝦苗種存活率在組間（L1—L4）差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

圖1 溫度驟變對小龍蝦不同規(guī)格苗種存活率的影響

階段Ⅰ：溫度變化在冰點以上，不同規(guī)格苗種存活率始終維持較高水平，其中L4 組最高，為96.67%，L1 組最低，為88.33%，整體并未出現(xiàn)大的差異。

階段Ⅱ：溫度變化在冰點附近（10 ℃→0 ℃→10 ℃），水層表面出現(xiàn)浮冰，組間存活率差異極具統(tǒng)計學(xué)意義，整體上表現(xiàn)為苗種規(guī)格越小，存活率越高。苗種規(guī)格≥2 g（L1，L2）時，存活率小于 55%；規(guī)格≤1.2 g（L3，L4）時，存活率大于 86%。

階段Ⅲ：溫度驟變對L1—L2 組小龍蝦苗種存活率的影響見圖2，圖中“*”表示L1 和L2 組經(jīng)歷試驗Ⅱ—Ⅲ階段，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。由圖2 可見，階段Ⅲ小龍蝦存活率比階段Ⅱ顯著提高，L1 和L2組存活率分別提高到78.33%和86.67%（P＜0.01），均接近階段Ⅰ存活率（P＞0.05）。

圖2 溫度驟變對小龍蝦較大規(guī)格苗種存活率的影響

3 討論

該試驗中，小龍蝦苗種經(jīng)歷階段Ⅰ，依然保持較高存活率，說明小龍蝦苗種自身亦對極端天氣（寒潮和倒春寒）具有一定的適應(yīng)性；養(yǎng)殖戶在外塘進(jìn)行春苗秋繁等早苗培育時，面對一般的降溫、升溫（水溫在5 ℃以上），對早苗無須特別養(yǎng)護(hù)。經(jīng)過階段Ⅱ，大規(guī)格蝦苗出現(xiàn)大量死亡，對小規(guī)格苗種影響不大，總體看來，規(guī)格越大、病死率越高。至于階段Ⅱ試驗中，大規(guī)格苗種顯著死亡，小規(guī)格依然保持較高存活率的原因，尚需進(jìn)一步研究。

因此，培育優(yōu)質(zhì)大規(guī)格早春苗時，應(yīng)格外注意溫度驟降至0 ℃、水體表層出現(xiàn)浮冰的天氣，采取相應(yīng)措施，防止大規(guī)格苗種死亡。目前常規(guī)采用的方法是提高水位，也有養(yǎng)殖戶和技術(shù)人員通過提前補(bǔ)充藻種和有益菌的方法。由于該試驗在室內(nèi)進(jìn)行，暫時無法對以上方法進(jìn)行系統(tǒng)客觀的評價。研究表明，Vc 不僅能夠促進(jìn)蝦類的存活與生長發(fā)育，改善繁殖性能，還可以提升蝦類的非特異性免疫應(yīng)答、抗應(yīng)激和抗氧化能力。

4 結(jié)論

秋冬時節(jié)培育的小龍蝦苗種對溫度驟變（寒潮和倒春寒）具有一定的適應(yīng)性。降溫之前，在水體中加入Vc 類抗應(yīng)激類藥物，可以提升大規(guī)格苗種的存活率。