李金榮 王海洋

摘要：目的? 對成人Ph染色體陽性急性淋巴細(xì)胞白血病MICM初步的研究。方法? 選取我院2019年1月～2020年12月收治的96例急性淋巴細(xì)胞白血病患者進(jìn)行分析，根據(jù)患者的成人Ph染色體陰陽性進(jìn)行分組。其中，選取Ph染色體陽性急性淋巴細(xì)胞性白血?。≒h+all）患者作為觀察組進(jìn)行分析研究;選取Ph染色體陰性急性淋巴細(xì)胞性白血病患者作為對照組進(jìn)行MICM分析。對比兩組的研究結(jié)果，探究成人Ph+ALL的MICM特征。結(jié)果? 在96例患者中，成人Ph陽性患者為24例，占比25.00%;陰性患者為72例，占比75.00%。流式免疫分型顯示所有Ph陽性患者均為B-ALL;24例Ph+ALL中20例伴早期髓系細(xì)胞（原始粒細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞）;18例患者表達(dá)CD13或/和CD33;8例患者染色體除Ph染色體外合并其他染色體異常。結(jié)論? 通過研究顯示在成人Ph+ALL具有MICM分型特點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：成人Ph染色體陽性;急性淋巴細(xì)胞;形態(tài)學(xué);細(xì)胞遺傳學(xué);免疫分型

急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）是由于淋巴細(xì)胞的T系或B系細(xì)胞于骨髓中的異常增生而發(fā)生的，屬于一種惡性腫瘤性疾病[1]。在機(jī)體原始細(xì)胞的異常增生下，可聚集于骨髓中，對機(jī)體中的正常造血功能造成較大的不良影響;同時(shí)在病情的進(jìn)展之下，還會(huì)對骨髓外的組織造成侵犯，如胸腺、肝臟、淋巴結(jié)及腦膜等。有研究指出，ALL的發(fā)病高峰期為0～8歲的兒童期，發(fā)病約占比70%;在成人白血病中，ALL的發(fā)病率約在20%左右。在ALL中，Ph染色體陽性患者較為常見，近年來關(guān)于這種類型的臨床研究也在不斷深入，各學(xué)者所得出的臨床特征結(jié)論也基本一致。臨床發(fā)現(xiàn)，在Ph+ALL中，患者大多存在肝脾腫大、白細(xì)胞水平較高、長期生存率低及治療緩解率低等特點(diǎn)，這類患者的預(yù)后大多不佳[2]。但目前關(guān)于這種疾病類型MICM特點(diǎn)研究尚較少。本研究就ALL患者的細(xì)胞遺傳學(xué)、形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)等特征進(jìn)行分析探究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2019年1月～2020年12月收治的96例急性淋巴細(xì)胞白血病患者進(jìn)行分析，其中，男性患者56例，女性患者40例;年齡35～56歲，平均年齡（36.25±15.71）歲。根據(jù)患者的成人Ph染色體陰陽性進(jìn)行分組，選取我院收治的成人Ph+ALL患者作為觀察組進(jìn)行分析研究;并選取同期于我院接受治療的成人Ph-ALL患者作為對照組進(jìn)行分析。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①對本次研究知情，并且簽署知情同意書;②精神正常，能進(jìn)行正常的溝通交流。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①拒絕配合研究，拒絕簽署知情同意書者;②合并惡性腫瘤疾病者;③存在嚴(yán)重精神疾病者。

1.2 方法

所有患者在接受治療前均進(jìn)行MICM檢測。對細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征、免疫表型特征、細(xì)胞遺傳學(xué)特征及分子生物學(xué)進(jìn)行分析。在細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征中，按照FAB標(biāo)準(zhǔn)作為ALL診斷分型。流式細(xì)胞儀以CD45，fsc設(shè)門檢測白細(xì)胞抗原。髓系 MPO CD117 CD11b CD33 CD13 CD16? CD15 CD14 CD64 CD71 CD123 CD56 ;T系cCD3 CD7? CD3? CD4 CD8 CD9? CD5 CD2? ; B系 CD19 CD10 CD20 CD45CD22 cCD79a cCD22 IgM ; 干（祖）系 CD38? HLA-DR。細(xì)胞遺傳學(xué)檢查：采用直接法或短期培養(yǎng)法制備骨髓染色體標(biāo)本，采用RHG技術(shù)進(jìn)行核型分析。

分子生物學(xué)：留取治療前肝素抗凝骨髓液2～3ml，分離單個(gè)核細(xì)胞 ，采用套式逆轉(zhuǎn)錄聚合酶連反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測融合基因。

2結(jié)果

2.1 Ph+ALL的發(fā)病情況以及年齡分布分析

通過分析收治的96例ALL患者中，統(tǒng)計(jì)其Ph+的發(fā)病情況。結(jié)果顯示，96例患者中，有24例患者是屬于Ph+類型，占比在25.00%;Ph-有72例，占比在75.00%。

2.2 Ph+ALL形態(tài)學(xué)特點(diǎn)研究

通過骨髓涂片瑞氏染色進(jìn)行讀片顯示，Ph+ALL原始淋巴細(xì)胞，胞體中等大小，圓形、類圓形，細(xì)胞漿量少，無顆粒，細(xì)胞核圓形，染色質(zhì)細(xì)致，核仁可見，形態(tài)特點(diǎn)與其他ALL無區(qū)別。但研究發(fā)現(xiàn)，24例Ph+ALL中20例伴早期髓系細(xì)胞（原始粒細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞），而72例Ph-ALL中僅有2例伴早期髓系細(xì)胞，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 免疫學(xué)分類及特征研究

通過分析Ph+的免疫學(xué)分類，顯示患者的免疫表現(xiàn)有以下幾點(diǎn)：所有Ph+ALL均為B-ALL;在為患者開展的FCM檢測中，18例患者表達(dá)CD13或/和CD33，但不夠急性混合細(xì)胞白血病（MPAL）的診斷標(biāo)準(zhǔn);研究顯示，Ph+ALL相比較于Ph-ALL明顯高表達(dá)髓系抗原CD13或/和CD33，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；颊叩谋磉_(dá)情況見表2。

2.4 Ph+ALL細(xì)胞學(xué)遺傳特征分析

3討論

急性淋巴細(xì)胞白血病主要是起源于淋巴前體細(xì)胞，這種疾病在臨床上被劃分于造血系統(tǒng)惡性疾病中的一種類型。并且研究指出，這種疾病大多數(shù)都是來源于B淋巴細(xì)胞。根據(jù)臨床上對該疾病的研究，顯示這種疾病類似于急性髓系白血?。ˋML），其遺傳學(xué)的異常是影響這種疾病預(yù)后的關(guān)鍵所在，而伴有Ph染色體異常的B-ALL就是成人ALL中最為常見的一種。根據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，在成人ALL中，Ph染色體陽性率約占據(jù)了20%～30%。隨著臨床研究的不斷深入，有學(xué)者提出了Ph+ALL是一種起源于白血病干細(xì)胞的疾病，而并非過去認(rèn)為的僅僅來源于淋系祖細(xì)胞。

ALL的發(fā)病主要是由于機(jī)體中的造血干細(xì)胞或組織細(xì)胞的惡性病變所導(dǎo)致。根據(jù)臨床上對ALL的發(fā)病原因分析顯示，環(huán)境因素、遺傳及家族因素、獲得性基因改變等主要原因[3]。大多數(shù)ALL患者起病較急，短時(shí)間內(nèi)會(huì)快速進(jìn)展，首發(fā)癥狀主要表現(xiàn)為出血、貧血、發(fā)熱等。也有一些患者起病較為緩慢，癥狀表現(xiàn)主要為不同程度的貧血、出血、發(fā)熱等。其中，出血癥狀有皮膚瘀點(diǎn)、牙齦出血、瘀斑等，癥狀嚴(yán)重者可能出現(xiàn)內(nèi)臟出血，也可能表現(xiàn)為咯血、尿血、便血、顱內(nèi)出血等[4]?；颊叩捏w征表現(xiàn)主要為一些臟器異常，如肝、脾、淋巴結(jié)腫大等，關(guān)節(jié)、骨等疼痛，以及一些其他的浸潤體征表現(xiàn)。通常認(rèn)為，Ph+ALL約占據(jù)成人ALL的12%～32%。有研究指出，Ph+ALL的疾病類型遠(yuǎn)遠(yuǎn)比其他伴特定遺傳學(xué)異常的ALL比例更高，并且發(fā)病率隨患者年齡的不斷增大而上升。

有研究提出，在Ph+ALL初診時(shí)，其白細(xì)胞數(shù)有較大的變化，但并非所有的患病者都屬于高白細(xì)胞白血病。在Hervé Dombret等[5]報(bào)道中，對157例Ph+ALL患者進(jìn)行了研究，結(jié)果也得出了具有較大的白細(xì)胞計(jì)數(shù)變化，白細(xì)胞計(jì)數(shù)范圍為（0.5～626）×109/L，中位白細(xì)胞計(jì)數(shù)為17×109/L。因而在進(jìn)行診斷過程中，應(yīng)注意并非所有Ph+ALL均為高白細(xì)胞性白血病。若在ALL的診斷中出現(xiàn)細(xì)胞計(jì)數(shù)正?；蛏愿叩那闆r，也需要適當(dāng)考慮患者是否為Ph染色體陽性。此外，還有相關(guān)文獻(xiàn)指出，大部分Ph+ALL患者免疫學(xué)分型為前體B細(xì)胞，主要表達(dá)CD19、CD10、CD34，伴有髓系抗原表達(dá)比例增多。在Hervé Dombret等學(xué)者的報(bào)道中顯示，在157例Ph+ALL患者中，所有的免疫學(xué)表型均提示為B系A(chǔ)LL，其中表達(dá)CD34抗原的患者占比高達(dá)89%，表達(dá)CD33抗原為15%，表達(dá)CD13抗原為20%。其中，所研究的患者中有91例不僅存在Ph染色體，同時(shí)還伴隨其他異常核型（雙Ph、+7、超二倍體）。還有一些學(xué)者研究了安德森癌癥中心從1980～1997年所有初診的67例Ph+成人ALL患者，發(fā)現(xiàn)大多數(shù)是B細(xì)胞型ALL，伴有髓系抗原共同表達(dá)者明顯增多。目前對于Ph染色體在ALL中的價(jià)值已經(jīng)得到了臨床的廣泛認(rèn)可，但關(guān)于Ph+ALL是否具有獨(dú)特的免疫表型特征方面研究還不夠深入。雖然部分報(bào)道指出，成人ALL可能存在免疫表型方面的異常，但尚存在報(bào)道病例數(shù)較少、研究結(jié)果不完全一致等問題。此外，既往相關(guān)研究大多單獨(dú)采用CC分析技術(shù)檢測Ph染色體，而本研究中Ph染色體的檢測采用CC結(jié)合FISH及RQ2PCR技術(shù)，明顯提高了Ph+-ALL的檢出率[6]。

本次研究對收治的96例患者開展分析結(jié)果顯示，成人Ph染色體結(jié)果檢測呈陽性者為24例，占比25.00%;陰性為72例，占比75.00%;所有Ph陽性患者均為B-ALL。在為患者開展的FCM檢測中，18例患者表達(dá)CD13或/和CD33，占比為75%;而在72例Ph-ALL中，僅有6例表達(dá)CD13或/和CD33。研究顯示，Ph+ALL相比較于Ph-ALL明顯高表達(dá)髓系抗原CD13或/和CD33，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[7]。細(xì)胞遺傳學(xué)方面顯示，單純Ph染色體有16例，占比為66.7%;有8例患者染色體除Ph染色體外合并其他染色體異常，占比33.3%。

Ph+B-ALL患者體內(nèi)白血病細(xì)胞可能處于更早的淋巴細(xì)胞分化階段，體內(nèi)可有大量的白血病干細(xì)胞，同時(shí)該群細(xì)組織黏附能力更強(qiáng)，所獲取的生長、增殖優(yōu)勢較大。CD38是具有酶催化活性的表面標(biāo)記，能夠?qū)?xì)胞的活化和增殖進(jìn)行雙向調(diào)節(jié)，參與人類淋巴細(xì)胞核內(nèi)皮細(xì)胞的活化和黏附等重要過程;CD38在體內(nèi)主要存在于造血組織中，表達(dá)于淋系干/祖細(xì)胞和漿細(xì)胞。CD13為人體內(nèi)造血組織常見的髓系抗原，多表達(dá)于髓系細(xì)胞表面。有研究顯示，在CD34+的造血干/祖細(xì)胞向B淋系定向分化的過程中，CD38表達(dá)上升，而CD13表達(dá)下調(diào)。

綜上，Ph+ALL在形態(tài)學(xué)方面容易伴隨早期髓系細(xì)胞，流式免疫分型易伴隨CD13、CD33表達(dá)，染色體核型除Ph染色體外可出現(xiàn)其他染色體異常，具有一定MICM分型特點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)

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