李丹丹 天津市第三中心醫(yī)院分院檢驗(yàn)科 （天津 300250）

內(nèi)容提要： 目的：分析強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清淀粉樣蛋白A（SAA）的性能。方法：選擇本院2020年10月～2020年12月健康體檢中心進(jìn)行體檢者50例為研究對(duì)象，采集體檢者晨起空腹外周靜脈血3mL，常溫下靜置至血液凝固后以3000 r/m的速度離心后收集血清，立即送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。采用美國(guó)強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀對(duì)血液樣本中SAA進(jìn)行檢測(cè)，按照衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，對(duì)Vitros350全自動(dòng)生化分析儀的精密度、準(zhǔn)確度做出評(píng)價(jià)。結(jié)果：SAA濃度的批內(nèi)精密度結(jié)果：低值CV（1.43%）、高值CV（1.62%），均≤8.0%；批間精密度結(jié)果：質(zhì)控1 CV（2.27%）、質(zhì)控2 CV（2.34%），均≤8.3%，精密度測(cè)定結(jié)果均符合要求；以校準(zhǔn)品為檢驗(yàn)參照標(biāo)準(zhǔn)，線性回歸方程為Y=0.979X+1.306，r2=0.994＞0.95，相關(guān)性良好；血液樣本與便準(zhǔn)品的檢測(cè)結(jié)果比較，t=0.002，P=0.927，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），準(zhǔn)確度符合要求；對(duì)50例血液樣本中SAA檢測(cè)結(jié)果，均≤10mg/L，符合率為100.00%。結(jié)論：強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀的精密度符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，檢測(cè)SAA的準(zhǔn)確度高，結(jié)果可靠，可以滿足臨床工作要求。

血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）廣泛存在于各種禽類(lèi)及哺乳動(dòng)物中，是一種急性相蛋白并與血漿高密度脂蛋白結(jié)合的產(chǎn)物，正常情況下體內(nèi)血液中含量極低，當(dāng)受到細(xì)菌感染、炎癥、損傷等刺激時(shí)，其表達(dá)水平會(huì)在4～6h內(nèi)急速上升約1000倍，而當(dāng)機(jī)體抗體-抗原清除后，則可在短時(shí)間內(nèi)降至正常水平[1-3]。SAA與C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）相比，具有升高幅度大、升高時(shí)間早及靈敏度高等優(yōu)勢(shì)，且可作為病毒感染的敏感診斷指標(biāo)，是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。目前，臨床上對(duì)SAA的檢測(cè)主要應(yīng)用于疾病急性反應(yīng)期間的診斷，此過(guò)程中，儀器的檢測(cè)準(zhǔn)確性和精密度對(duì)于臨床診斷具有十分重要的意義[4-6]。強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀為臨床廣泛應(yīng)用的一種生化儀器，在臨床應(yīng)用中具有操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)速度快等優(yōu)勢(shì)，為保證強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和有效性，需要對(duì)儀器進(jìn)行性能驗(yàn)證。本研究選擇本院2020年10月～2020年12月健康體檢中心進(jìn)行體檢者50例為研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)其檢測(cè)SAA的精密度、準(zhǔn)確率進(jìn)行了驗(yàn)證和評(píng)價(jià)，以期為臨床提供一定指導(dǎo)依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 臨床資料

選擇本院2020年10月～2020年12月健康體檢中心進(jìn)行體檢者50例為研究對(duì)象。其中，男性26例，女性24例，年齡18～60歲，平均（45.24±8.55）歲。排除患有感染性疾病、惡性腫瘤等患者。所有研究對(duì)象均對(duì)本研究知情且簽署同意書(shū)。采集體檢者晨起空腹外周靜脈血3mL，常溫下靜置至血液凝固后以3000 r/m的速度離心后收集血清，立即送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑：檢測(cè)儀器為美國(guó)強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀及其配套試劑、相應(yīng)質(zhì)控品。SAA配套試劑盒批號(hào)：20200516；SAA質(zhì)控品批號(hào)：20200814，低水平濃度范圍7.5～11.5mg/L，高水平濃度范圍30.6～46.3mg/L；SAA校準(zhǔn)品批號(hào)：20200626；檢測(cè)采用免疫比濁法。

1.2.2 檢測(cè)方法

①精密度評(píng)價(jià)：參照衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WS/T 420-2013）[7]，批內(nèi)精密度：取SAA質(zhì)控品高低濃度各1支，分別連續(xù)檢測(cè)20次，取其均值為最終測(cè)量結(jié)果，計(jì)算變異系數(shù)（CV）=（標(biāo)準(zhǔn)差/均值）×100%。批間精密度：取SAA質(zhì)控品高低濃度各1支，每日檢測(cè)1次，連續(xù)檢測(cè)20日，計(jì)算CV，批內(nèi)CV允許誤差≤8.0%，批間CV允許誤差范圍≤8.3%。

②準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)：參照WS/T 420-2013，以校準(zhǔn)品為檢驗(yàn)參照，同時(shí)檢測(cè)50份新鮮血液樣本，計(jì)算兩種方法的回歸方程和決定系數(shù)（r2），檢測(cè)結(jié)果參考值≤10mg/L期間應(yīng)達(dá)到90%以上。計(jì)算偏倚值，偏倚值=（測(cè)定均值-參考值）/參考值×100%，允許范圍為≤2.2%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)整理和分析處理分別采用Excel軟件和SPSS 21.0軟件，SAA濃度以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，采用Graphpad Prism7.0繪制線性回歸方程，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)SAA的精密度評(píng)價(jià)

按照WS/T 420-2013要求，SAA濃度的批內(nèi)精密度結(jié)果：低值CV（1.43%）、高值CV（1.62%），均≤8.0%；批間精密度結(jié)果：質(zhì)控1 CV（2.27%）、質(zhì)控2 CV（2.34%），均≤8.3%，以上測(cè)定結(jié)果均符合要求，且顯著的批內(nèi)精密度和批間精密度為檢測(cè)SAA的準(zhǔn)確性提供了可靠的保證。見(jiàn)表1。

表1. 強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)SAA的精密度評(píng)價(jià)結(jié)果

2.2 強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)SAA的準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)

以校準(zhǔn)品為檢驗(yàn)參照標(biāo)準(zhǔn)，繪制線性回歸方程為Y=0.979X+1.306，r2=0.994＞0.95，說(shuō)明Vitros350全自動(dòng)生化分析儀對(duì)SAA的準(zhǔn)確度于標(biāo)準(zhǔn)品有較好的相關(guān)性，對(duì)血液樣本與便準(zhǔn)品的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)比較結(jié)果顯示，t=0.002，P=0.927，提示差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），準(zhǔn)確度符合要求。Vitros350全自動(dòng)生化分析儀對(duì)50例血液樣本中SAA檢測(cè)結(jié)果均≤10mg/L，符合率為100.00%。該結(jié)果表明強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定在SAA檢測(cè)中穩(wěn)定性好、準(zhǔn)確性高。

3.討論

近年來(lái)，SAA在臨床評(píng)價(jià)急性創(chuàng)傷、診斷病毒感染等多種疾病中的特異度和敏感度極高，已越來(lái)越受到臨床廣大醫(yī)生的青睞，通過(guò)對(duì)患者血液中SAA水平的檢測(cè)，可以快速、準(zhǔn)確地鑒別出患者病情和感染程度[8-11]。有專(zhuān)家共識(shí)指出：血液中SAA＜10 mg/L時(shí)，提示感染的風(fēng)險(xiǎn)不高，而SAA≥10mg/L時(shí)，提示感染事件風(fēng)險(xiǎn)增加；SAA水平持續(xù)12～24h高于10mg/L而低于100mg/L,病毒感染可能性大；在判斷病情嚴(yán)重程度方面，SAA≥500mg/L提示病情嚴(yán)重;在預(yù)后評(píng)估方面，抗生素治療24h后下降30%可判斷治療有效。因此，SAA檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性在鑒別患者發(fā)生感染致病菌和抗生素治療效果等方面提供重要的指導(dǎo)作用，有助于臨床對(duì)治療藥物的選擇和治療方案的制定，使患者獲得良好的治療效果。

準(zhǔn)確度是指檢測(cè)結(jié)果均值與真值的一致程度，精密度是重復(fù)檢測(cè)結(jié)果間的一致程度，一種儀器的準(zhǔn)確度和精密度是保證實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確的基礎(chǔ)。為提高實(shí)驗(yàn)室對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度，根據(jù)我國(guó)對(duì)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制準(zhǔn)則的相關(guān)規(guī)定，新型儀器設(shè)備在使用前需進(jìn)行精密度和精確度檢測(cè)和校正，是儀器能夠被使用和廣泛應(yīng)用的前提[12-15]。強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀可通過(guò)免疫比濁法對(duì)SAA進(jìn)行檢測(cè)，雖然廠家已給出了性能評(píng)價(jià)指標(biāo)，但儀器檢測(cè)受溫度、環(huán)境、檢測(cè)人員等多種因素的影響[16,17]。因此，要求在檢查前需進(jìn)行性能驗(yàn)證。本研究按照WS/T 420-2013要求及參照廠家給出的數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)Vitros350全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)SAA的性能進(jìn)行了測(cè)試和驗(yàn)證，結(jié)果顯示，SAA濃度的批內(nèi)精密度低值CV（1.43%）、高值CV（1.62%）均≤8.0%；批間精密度質(zhì)控1 CV（2.27%）、質(zhì)控2 CV（2.34%），均≤8.3%，均符合實(shí)驗(yàn)室血液檢測(cè)分析質(zhì)量要求，且以上研究結(jié)果均優(yōu)于國(guó)家相關(guān)規(guī)定，顯著的批內(nèi)精密度和批間精密度為檢測(cè)SAA的準(zhǔn)確性提供了可靠的保證。測(cè)定結(jié)果均符合要求；將血液樣本與廠家校準(zhǔn)品進(jìn)行對(duì)比結(jié)果顯示，Vitros350全自動(dòng)生化分析儀對(duì)SAA的檢測(cè)準(zhǔn)確度與標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)性良好，50例血液樣本中SAA檢測(cè)結(jié)果符合率達(dá)到100.00%，表明儀器測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定性好、準(zhǔn)確性高，性能驗(yàn)證結(jié)果滿意[18-21]。以上研究結(jié)果表明，Vitros350全自動(dòng)生化分析儀在SAA的測(cè)定中，精確度和準(zhǔn)確度與標(biāo)準(zhǔn)品具有一致性，能夠保證實(shí)驗(yàn)室SAA檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。黃梅霞[22]等在血清淀粉樣蛋白A與C反應(yīng)蛋白聯(lián)合檢測(cè)研究結(jié)果中指出，SAA和CRP兩者聯(lián)合檢測(cè)更利于感染性疾病的早期診斷，在臨床上可考慮使用Vitros350聯(lián)合檢測(cè)評(píng)估患者病情。崔薇薇[23]等曾報(bào)道，強(qiáng)生Vitros350干式生化儀24h不關(guān)機(jī)處于使用狀態(tài)，可加速儀器老化，可造成儀器精密度下降，使實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生誤差。因此，可選用Vitros350聯(lián)合檢測(cè)多個(gè)指標(biāo)，全面、高效的作出疾病的診療方案；在Vitros350全自動(dòng)生化分析儀使用中，可通過(guò)制定儀器使用管理方案和選用科學(xué)的質(zhì)量改進(jìn)方案，做好儀器的日常保養(yǎng)，可提高儀器檢測(cè)質(zhì)量水平，避免差錯(cuò)的發(fā)生。

綜上所述，強(qiáng)生Vitros350全自動(dòng)生化分析儀的精密度好，對(duì)SAA的測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性高，性能驗(yàn)證結(jié)果符合國(guó)家衛(wèi)生行業(yè)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，可以滿足臨床工作要求。