周玲，廖明鈺，李行，沈如飛，張玉玲，彭桂亮，鄭宏庭，隆敏*

1陸軍軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科，重慶 400037；2南京大學醫(yī)學院附屬金陵醫(yī)院內(nèi)分泌科，南京 210016

多囊卵巢綜合征(polycystic ovarian syndrome，PCOS)是以月經(jīng)紊亂、高雄激素血癥、卵巢多囊樣改變?yōu)橹饕R床特征的生殖內(nèi)分泌疾病[1-2]。有研究發(fā)現(xiàn)，超過50%的PCOS患者超重或肥胖[3]，提示PCOS易引起糖尿病。PCOS和2型糖尿病(T2DM)兩種疾病聯(lián)系緊密，臨床應加強肥胖PCOS患者的糖尿病篩查。T2DM是一種胰島素抵抗或分泌不足引起的慢性代謝性疾病，可導致糖脂代謝異常及相關代謝紊亂[4-5]，繼而引發(fā)心血管疾病、肝臟病變等，嚴重威脅人類健康[6-7]；另有研究發(fā)現(xiàn)，肥胖與T2DM的發(fā)病率呈正相關[8]。近年來，越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，過氧化還原酶6(peroxidoreductase 6，PRDX6)參與了細胞氧化還原過程，可調(diào)節(jié)磷脂代謝轉換并保護細胞免受氧化損傷[9]，并參與了動脈粥樣硬化和T2DM的發(fā)病，但其在肥胖中的作用尚不清楚[10]；此外還有研究發(fā)現(xiàn)，PRDX6參與了脂肪酸代謝等氧化還原過程[11-12]。但鮮有PCOS患者血漿PRDX6與糖脂代謝和性激素指標相關性的研究。因此，本研究分析了血漿PRDX6在PCOS患者中的表達變化及其與糖脂代謝、性激素指標的相關性，旨在為將其作為PCOS潛在的治療靶點提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 本研究為回顧性病例對照研究。收集2020年1－10月就診于陸軍軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院的47例PCOS患者(PCOS組)的臨床資料，年齡為23～31(27.1±4.2)歲，并收集同期在本院體檢中心體檢的60名健康女性作為健康對照組，年齡為21～31(26.3±5.1)歲。進一步根據(jù)體重指數(shù)(BMI)分為兩個亞組：正常體重組(BMI≤24 kg/m2，其中PCOS組17例、健康對照組36名)與超重體重組(BMI＞24 kg/m2，其中PCOS組30例、健康對照組24名)。PCOS診斷采用2003年鹿特丹標準[13]，即滿足以下3條中的任意2條：(1)排卵稀發(fā)或無排卵；(2)高雄激素血癥的臨床和(或)生化證據(jù)；(3)多囊卵巢。納入標準：在符合PCOS診斷標準的基礎上，僅納入年齡為23～31歲的患者；排除標準[14]：(1)通過相應檢查排除甲狀腺功能障礙(甲狀腺功能八項)、高催乳素血癥(血清催乳素)、庫欣綜合征(皮質(zhì)醇節(jié)律)、先天性腎上腺皮質(zhì)增生(17α-羥孕酮)、腎上腺腫瘤(腎上腺CT)、婦科惡性腫瘤(婦科彩超)等疾??；(2)近1個月內(nèi)使用激素或降糖藥物；(3)有酗酒或藥物濫用史。本研究獲陸軍軍醫(yī)大學第二附屬醫(yī)院倫理委員會批準(2020-研第124-01)，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 檢測指標及定義 測量所有受試對象的身高、體重、臀圍(H)、腰圍(W)，計算體重指數(shù)(BMI)和腰臀比(WHR)。所有研究對象采血要求空腹8 h，次日清晨采集3 ml靜脈血，且入院后均在同一時間用水銀測壓計連續(xù)測量右臂血壓3次，取后兩次血壓平均值記錄收縮壓(SBP)和舒張壓(DBP)，檢測空腹血糖(FBG)、尿酸(UA)、總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、糖化血紅蛋白(HbA1c)、谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GGT)、尿素氮(UREA)、肌酐(CREA)、白細胞計數(shù)(WBC)、空腹胰島素(FINS)、睪酮(T)、促黃體素(LH)、促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、催乳素(PRL)水平。其中FBG和UA測定采用酶法，TC、TG、HDL、LDL采用比色法，HbA1c采用陰離子交換高效液相色譜法，ALT、AST、γ-GGT、UREA、CREA、WBC采用熒光染色法，F(xiàn)INS、T、LH、FSH、E2、P、PRL采用化學發(fā)光免疫分析法。計算穩(wěn)態(tài)模型評估的胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)[HOMA-IR=FINS(mU/L)×空腹血糖(mmol/L)/22.5]、胰島β細胞功能(HOMA-β)[H O M A-β=(F I N S×2 0)/(空腹血糖-3.5)]、BMI[BMI=體重(kg)/身高(m)2]、WHR[WHR=腰圍/臀圍]及促黃體素/促卵泡素(LH/FSH)比值。疾病定義如下：糖尿病(FBG ＞7 mmol/L)、高脂血癥(TG ＞1.7 mmol/L或TC ＞5.2 mmol/L)、胰島素抵抗(HOMA-IR ＞2.5)、高血壓(SBP ＞139 mmHg)。

1.2.2 血漿PRDX6水平測定 外周靜脈血3000 r/min(離心半徑為140 mm)離心5 min，收集部分血漿于-80 ℃凍存。采用武漢云克隆科技股份有限公司(貨號：SEF756Hu；批號：L200515133)的ELISA試劑盒進行PRDX6水平測定。試劑盒的最低檢測濃度為0.114 ng/ml，可測濃度范圍為0.312～20.000 ng/ml，批內(nèi)差＜10%，批間差＜12%。

1.2.3 指標分析 對PCOS組與健康對照組的血漿PRDX6及糖脂代謝、性激素水平進行比較，然后進一步分析PRDX6與糖脂代謝、性激素水平的相關性，并通過受試者工作特征(ROC)曲線分析PRDX6對糖脂代謝和性激素指標的診斷效能。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 22.0(IBM Co.，USA)軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料符合正態(tài)分布的以±s表示，兩組間比較采用t檢驗，不符合正態(tài)分布的采用M(Q1，Q3)表示，組間比較采用非參數(shù)檢驗；計數(shù)資料以例(%)表示，兩組間比較采用χ2檢驗。當血漿PRDX6水平與一般臨床資料、糖脂代謝及性激素的關系符合正態(tài)分布時采用Pearson相關分析，不符合正態(tài)分布時采用Spearman相關分析。采用ROC曲線分析PRDX6對糖脂代謝和性激素指標的診斷效能。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 兩組血漿PRDX6水平比較 PCOS組患者的血漿PRDX6水平較健康對照組升高約2.3倍，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.0001)；BMI＞24 kg/m2時，PCOS組患者的血漿PRDX6水平較健康對照組升高約4.86倍，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.0001)；BMI＜24 kg/m2時，PCOS組患者的血漿PRDX6水平較健康對照組升高約1.95倍，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.0001)。

2.2 兩組臨床資料比較 PCOS組BMI、體重、DBP、γ-GGT、UA、CREA和WBC高于健康對照組(P＜0.05)，且糖尿病、高脂血癥、胰島素抵抗的患病率高于健康對照組(P＜0.05)；當BMI≤24 kg/m2時，PCOS組UA、CREA高于健康對照組(P＜0.05)，AST低于健康對照組(P＜0.05)，且胰島素抵抗患病率高于健康對照組(P＜0.05)；當BMI＞24 kg/m2時，PCOS組DBP、ALT、AST、γ-GGT、UA和WBC高于健康對照組(P＜0.05)，高脂血癥和胰島素抵抗患病率高于健康對照組(P＜0.05)(表1)。

2.3 兩組糖脂代謝和性激素指標比較 糖脂代謝指標方面，PCOS組TG、LDL、FINS、HbA1c、HOMA-IR和HOMA-β高于健康對照組(P＜0.05)，HDL低于健康對照組(P＜0.05)；當BMI≤24 kg/m2時，PCOS組FBG低于健康對照組(P＜0.05)；當BMI＞24 kg/m2時，PCOS組TG、LDL、FINS、HbA1c、HOMA-IR和HOMA-β高于健康對照組(P＜0.05)，HDL低于健康對照組(P＜0.05)。性激素指標方面，PCOS組T、LH和LH/FSH高于健康對照組(P＜0.05)，E2和P低于健康對照組(P＜0.05)；當BMI≤24 kg/m2時，PCOS組T和LH/FSH高于健康對照組，E2和P低于健康對照組(P＜0.05)；當BMI＞24 kg/m2時，PCOS組T、LH、LH/FSH高于健康對照組(P＜0.05)，E2和P低于健康對照組(P＜0.05)(表2)。

表2 PCOS組與健康對照組糖脂代謝和性激素指標的比較Tab.2 Comparison of glucose and lipid metabolism and sex hormone indexes between PCOS group and healthy group

2.4 P R DX 6 水平與糖脂代謝和性激素指標的相關性 由于PCOS組BMI明顯高于健康對照組[(24.27±2.82) kg/m2vs. (23.24±1.93) kg/m2，P=0.035，表1]，因此，采用偏相關校正BMI后進行相關性分析，結果顯示，血漿PRDX6水平與HDL呈負相關(r=-0.225)，與TG、LDL、HOMA-β呈正相關(r分別為0.223、0.229、0.201，P＜0.05)；此外，血漿PRDX6水平與T、LH、LH/FSH呈正相關(r分別為0.397、0.251、0.279，P＜0.01)，與E2、P呈負相關(r分別為-0.249、-0.231，P＜0.05)(表3)。

當BMI≤24 kg/m2時，PCOS組與健康對照組BMI差異無統(tǒng)計學意義(P=0.613，表1)，因而無需校正BMI。相關分析顯示，血漿PRDX6水平與SBP呈負相關(r=-0.382，P＜0.05)，與其他糖脂代謝指標無相關性(P＞0.05)；此外，血漿PRDX6水平與E2、P呈負相關(r分別為-0.355、-0.500，P＜0.05)，與T呈正相關(r=0.371，P＜0.05)(表3)。

表1 PCOS組與健康對照組的臨床資料比較Tab.1 Comparison of the clinical data and other indicators between PCOS group and healthy group

表3 PRDX6與糖脂代謝和性激素指標的相關性Tab.3 Correlation of PRDX6 with glucose and lipid metabolism and sex hormone indexes

當BMI＞24 kg/m2時，PCOS組與健康對照組BMI差異無統(tǒng)計學意義(P=0.142，表1)，因而無需校正BMI。相關分析顯示，血漿PRDX6水平與DBP、TG、LDL、FINS、HbA1c、HOMA-IR、HOMA-β呈正相關(r分別為0.387、0.352、0.286，0.375、0.422、0.355、0.287，P＜0.05)，與HDL呈負相關(r=-0.451，P=0.001)；此外，血漿PRDX6水平與T、LH、LH/FSH呈正相關(r分別為0.428、0.490、0.597，P＜0.005)，與E2呈負相關(r=-0.288，P=0.033)(表3)。

2.5 PRDX6預測糖脂代謝和性激素指標的ROC曲線分析 PRDX6預測所有患者糖脂代謝指標HOMA-IR的ROC曲線下面積(AUC)為0.753(95%CI 0.684～0.822，P＜0.0001)，預測所有患者性激素指標LH的AUC為0.592(95%CI 0.515～0.668，P＜0.0001)。PRDX6預測PCOS患者糖脂代謝指標HOMA-IR的AUC為0.917(95%CI 0.860～0.973，P＜0.0001)，預測PCOS患者性激素指標LH的AUC為0.544(95%CI 0.426～0.663，P=0.461)(圖1)。

圖1 PRDX6預測糖脂代謝和性激素指標的ROC曲線Fig.1 ROC curve of PRDX6 predicting glucose and lipid metabolism and sex hormone indicators

3 討 論

PCOS是以月經(jīng)紊亂、高雄激素血癥、卵巢多囊樣改變?yōu)橹饕卣鞯纳硟?nèi)分泌疾病，常并發(fā)排卵障礙、肥胖、糖耐量減低、高血壓、大血管疾病和血脂異常、外周胰島素抵抗等。肥胖型PCOS患者更容易產(chǎn)生胰島素抵抗，引起糖脂代謝紊亂，二者的相關性也已被證實，但其發(fā)病機制仍未明確[15-16]。有研究發(fā)現(xiàn)，PCOS患者的糖脂代謝異常與雄激素[17]、胰島素敏感性[18-19]、血脂水平[20]等諸多指標相關。目前普遍認為機體發(fā)生代謝異常的最初表現(xiàn)為胰島素抵抗和高胰島素血癥，其中胰島素抵抗可導致血糖、低密度脂蛋白膽固醇升高，TG、血清高密度脂蛋白水平降低，進而促進繼發(fā)性高胰島素血癥相關的體重增加，導致胰島素抵抗惡化及其代謝后遺癥；而胰島素抵抗作為肥胖相關疾病的基礎，可增高T2DM和PCOS的患病率[21-22]。因此，本研究探討了PCOS患者與健康人血漿PRDX6水平的差異及其與糖脂代謝、性激素指標的相關性。

PRDX6是一種新型的抗氧化酶，可調(diào)節(jié)氧化應激和炎性因子水平，其結構獨特，是連接氧化還原穩(wěn)態(tài)與增殖的重要環(huán)節(jié)，可表現(xiàn)出多種功能，其活性調(diào)控受亞細胞定位、底物結合及翻譯后修飾等因素影響[23]。目前的研究證實，PRDX6在不同的代謝性疾病、眼損傷、男性不育、腫瘤、炎性疾病、缺血性腦卒中、創(chuàng)傷性腦損傷及神經(jīng)退行性病變中發(fā)揮作用[24-25]。但血漿PRDX6在PCOS中的作用仍未明確，迄今鮮有研究報道血漿PRDX6與PCOS患者糖脂代謝或性激素的相關性。

本研究結果發(fā)現(xiàn)，P C O S 組患者的血漿P R D X 6 水平明顯高于健康對照組，相關分析結果顯示，當B M I ＞2 4 k g/m2時，P C O S 組患者較健康對照組出現(xiàn)了明顯的胰島素抵抗和高脂血癥，血漿P R D X 6 水平與糖脂代謝指標DBP、TG、LDL、FINS、HbA1c、HOMA-IR、HOMA-β等呈正相關，與HDL呈負相關(P＜0.05)，提示血漿PRDX6水平與BMI＞24 kg/m2的PCOS患者的糖脂代謝相關。故推測血漿PRDX6可能通過增加胰島素抵抗而使超重的PCOS患者發(fā)生糖脂代謝紊亂，與既往報道胰島素抵抗引起糖脂代謝紊亂的結論一致[26-27]，也與文獻認為肥胖型PCOS患者更易產(chǎn)生胰島素抵抗而引發(fā)糖脂代謝紊亂的結論一致[15-16]。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)，與健康對照組比較，BMI＞24 kg/m2的PCOS患者血漿PRDX6水平與性激素指標T、LH、LH/FSH呈正相關，與E2呈負相關(P＜0.05)，提示血漿PRDX6與BMI＞24 kg/m2的PCOS患者的性激素代謝相關。而當BMI≤24 kg/m2時，P CO S 患者未出現(xiàn)任何糖脂代謝指標異常(P＞0.05)，但其血漿PRDX6水平與性激素指標T呈正相關(P＜0.001)，與E2和P呈負相關(P＜0.05)，提示血漿PRDX6水平可能是影響PCOS患者糖脂代謝和性激素指標的危險因素，可參與代謝性疾病的發(fā)生，與文獻報道一致[28]。血漿PRDX6水平增高對BMI＞24 kg/m2的PCOS患者糖脂代謝和性激素紊亂的影響較BMI＜24 kg/m2的PCOS患者更大，推測其可能是PCOS患者糖脂代謝、性激素指標異常的預警指標。最后，本研究ROC曲線分析結果顯示，PRDX6預測所有患者糖脂代謝指標HOMA-IR的AUC為0.753，而預測PCOS患者HOMA-IR的AUC(0.917)明顯增加，提示血漿PRDX6可作為PCOS患者糖脂代謝異常的預測因子。

綜上所述，本研究結果顯示，血漿PRDX6水平與PCOS患者糖脂代謝、性激素指標異常有關，并發(fā)現(xiàn)BMI＞24 kg/m2的PCOS患者血漿PRDX6水平升高對糖脂代謝、性激素紊亂的敏感性更高，并可能通過增加胰島素抵抗而引起糖脂代謝異常。遺憾的是，本試驗未將臨床研究結合基礎實驗進行相互印證，因此，下一步擬開展基礎研究探討PRDX6調(diào)控超重PCOS患者糖脂代謝和性激素指標的機制，這可能有助于尋找PCOS的發(fā)病機制，改善預后，并提高患者的生活質(zhì)量。