王 彬,王慶爭,郭子涵,郭志強,雷 岷,李叢艷,鄺良德,梅秀麗,鄭 潔,楊 銳,謝曉紅,呂景智
(1.四川省畜牧科學研究院,動物遺傳育種四川重點實驗室,四川成都 610066;2.西南大學動物科學技術學院,重慶 400716)
目前中國已經成為世界上最大的茶葉生產國和消費國。據統(tǒng)計,2017 年我國茶園面積已超過305 萬hm,每年產生的茶葉渣超過數十萬噸。近年來,隨著茶葉生產規(guī)模的擴大,茶葉加工的機械化、自動化水平不斷提升,加工的質量和效率得到顯著提高,茶葉產品越來越多元化。茶葉渣為茶園機械修剪的茶葉及細枝條經工業(yè)提取茶多酚后的剩余物烘干粉碎而成,與茶葉的功能類似,具有一定的飼料價值。茶葉渣中不僅有一定量的常規(guī)營養(yǎng)物質,還含有對動物有益的茶多酚、茶皂素和茶堿等活性物質。茶葉渣中茶多酚的含量可達1%~2%,具有清除體內自由基、殺滅或抑制有害微生物、降低血壓和血脂的功能。目前,飼料原料供應緊張,價格不斷上漲,養(yǎng)殖成本不斷增加,而茶葉渣的開發(fā)利用還處于起步階段,大量的茶葉渣被作為工業(yè)廢棄物丟棄或作為田間肥料使用,造成了巨大的資源浪費。因此,茶葉渣作為飼料資源有很大的發(fā)展空間。本試驗旨在探討茶葉渣替代麩皮對肉兔生產性能、營養(yǎng)成分表觀消化率和血清生化指標的影響,為茶葉渣在家兔生產中的開發(fā)應用提供理論依據。
1.1 試驗材料 茶葉渣來為茶園機械修剪的茶葉及細枝條經工業(yè)提取茶多酚后的剩余物烘干粉碎而成(成都施普諾生物技術有限公司)。試驗前對茶葉渣的總能及化學成分進行測定,結果見表1。
表1 茶葉渣的總能及化學成分(風干基礎)
1.2 試驗設計及日糧 選擇28 日齡體重相近的新西蘭兔480 只,隨機分成4 個處理,每個處理5 個重復,每個重復24 只,公母各半。基礎日糧參照谷子林等推薦的營養(yǎng)水平并結合本地飼料資源設計,制成顆粒飼料(顆粒直徑3 mm,長度6~8 mm)。試驗飼糧使用茶葉渣等比例替代麩皮,替代水平分別為10%、15% 和20%,飼糧組成及營養(yǎng)成分見表2。試驗前,對兔舍和兔籠進行清潔消毒,按照常規(guī)程序免疫,兔舍自然通風和通光。每天08:00 和17:00 喂食,試驗預試期7 d,正試期42 d。
表2 飼糧組成及營養(yǎng)成分(風干基礎)
1.3 生長性能測定 試驗期間,準確記錄每天每組兔子的采食及健康情況(如疾病和死亡情況),計算死亡率,在試驗開始時和結束當天08:00 空腹測定各組仔兔的體重,計算平均日增重。每日飼喂前記錄飼喂量和余料量,計算平均日采食量。根據平均日增重和平均日采食量計算耗料增重比。
死亡率=死亡兔只數/試驗兔總只數×100%
平均日增重=(終末體重-初始體重)/(正試期試驗天數×該重復試驗兔只數)
平均日采食量=每個重復正試期總采食量/(正試期試驗天數×該重復試驗兔只數)
耗料增重比=平均日采食量/平均日增重
1.4 營養(yǎng)物質表觀消化率測定 采用全收糞法進行消化代謝試驗,連續(xù)5 d 收集(每天24 h)每只兔的糞便并稱重,混勻后按每日鮮糞樣的4% 取樣,再次混勻后于-20℃冷凍保存,對每天的飼料和剩料均勻取樣,65℃鼓風干燥箱烘48 h 后制成風干樣,粉碎待測。依據實驗室常規(guī)分析方法測定樣品中能量、粗蛋白質、粗脂肪、粗纖維、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量。
營養(yǎng)物質表觀消化率=[(飼糧中某營養(yǎng)物質的含量-糞中該營養(yǎng)物質的含量)/ 飼糧中該營養(yǎng)物質含量]×100%
1.5 血清生化指標的測定 正式試驗第35 天對各組肉兔進行空腹耳緣靜脈采血,每只兔子收集5 mL 血液,3 000 r/min 離心15 min,吸取血清(上清液)分裝于200 μL 無菌管中,置于-20℃保存。采用邁瑞B(yǎng)S-420全自動生化儀,使用商業(yè)試劑盒(南京建成生物工程研究所)測定血清中總蛋白、白蛋白、血糖、總膽固醇、尿素氮、堿性磷酸酶、谷丙轉氨酶、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量。
1.6 統(tǒng)計分析 試驗數據用Excel 2016 軟件進行記錄和初步處理,采用SPSS 19.0 統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析(One-Way ANOVA)和卡方分析,并采用 Duncan's法多重比較檢驗組間差異顯著性,結果表示為平均值±標準差,<0.05 時為差異顯著。
2.1 茶葉渣替代麩皮對肉兔生長性能的影響 由表3 可知,與對照組相比,試驗組斷奶仔兔的成活率分別提高1.70%、1.70%和3.30%;隨著茶葉渣替代水平的增加,肉兔的終重、平均日采食量和平均日增重均呈下降趨勢,耗料增重比逐漸上升。20% 茶葉渣組終重、平均日增重低于15%茶葉渣組(<0.05),15%和20%茶葉渣組終重、平均日采食量和平均日增重低于對照組和10%茶葉渣組(<0.05),10%茶葉渣組與對照組均無顯著差異。
表3 茶葉渣替代麩皮對肉兔生長性能的影響
2.2 茶葉渣替代麩皮對肉兔營養(yǎng)物質表觀消化率的影響由表4 可知,與對照組相比,茶葉渣替代不同比例麩皮對飼糧中粗蛋白質、粗脂肪、粗纖維和酸性洗滌纖維的表觀消化率無顯著影響;隨著茶葉渣替代水平的增加,飼糧中能量和中性洗滌纖維表觀消化率呈下降趨勢,其中20%茶葉渣組低于對照組和10%茶葉渣組(<0.05),而10%和15%茶葉渣組與對照組無顯著差異。
表4 茶葉渣替代麩皮對肉兔營養(yǎng)物質表觀消化率的影響 %
2.3 茶葉渣替代麩皮對肉兔血清生化指標的影響 由表5 可知,隨著茶葉渣替代比例的增加,尿素氮含量有增加趨勢,且20%茶葉渣組高于對照組和10%茶葉渣組(<0.05);而血清總膽固醇和甘油三酯有減少趨勢,且15% 和20% 茶葉渣組低于對照組(<0.05),10%茶葉渣組與對照組間無顯著差異。
表5 不同比例茶葉渣替代麩皮對肉兔血清生化指標的影響
3.1 茶葉渣替代麩皮對肉兔生長性能的影響 茶葉渣作為茶葉生產的副產物,在飼糧中適量添加對肉兔的生長性能沒有顯著影響。Kondo 等研究發(fā)現(xiàn),在母兔日糧中用茶葉渣代替大豆秸稈和紫花苜蓿其乳汁成分和乳汁性狀與對照組無顯著差異。李海利等報道,在日糧中添加0.2%~0.4%茶葉提取物可改善家兔血脂代謝、提高腸道健康。肉兔的終重、平均日增重、平均日采食量和耗料增重比是評價肉兔生長性能的重要指標。本研究發(fā)現(xiàn),隨著茶葉渣替代比例的增加,肉兔的終重、平均日增重、平均日采食量均呈下降趨勢,耗料增重比呈上升趨勢,結果表明日糧中添加茶葉渣降低了肉兔的生長性能,其中在15%和20%的替代水平下最為顯著。產生這種現(xiàn)象的可能有2 個原因。第一,日糧營養(yǎng)成分不同造成試驗組肉兔采食量降低,養(yǎng)分攝入減少,進而造成各組生產性能差異。首先,中性洗滌纖維是影響動物干物質采食量的主要因素,本試驗所用茶葉渣中中性洗滌纖維的含量達到了35.54%,隨著茶葉渣替代比例地不斷增加,各組飼糧之間中性洗滌纖維的含量存在差異;其次,高纖維含量和能量水平低的飼糧會降低動物的采食量;最后,茶渣中含有的茶多酚和咖啡堿等未經轉化分解,適口性差,降低了肉兔的采食量。第二,茶葉渣中含有一定量的抗營養(yǎng)因子,限制或降低了飼料的轉化率。安玉紅等指出,茶葉渣中含有一些難以利用的聚糖和茶皂素,且工業(yè)化產生的茶葉渣中含有一定量的酸堿物質,影響了動物機體對營養(yǎng)物質的吸收利用。綜上,在肉兔飼糧中使用茶葉渣替代麩皮是可行的,但茶葉渣的替代比例不宜過高。
3.2 茶葉渣替代麩皮對肉兔飼料養(yǎng)分表觀消化率的影響動物對飼料養(yǎng)分及能量的消化利用程度可通過消化代謝試驗測定各養(yǎng)分的消化率來評價。除養(yǎng)分供應外,給予肉兔充足的能量供應是保證養(yǎng)兔經濟效益的先決條件。本試驗中,20%茶葉渣組飼料中能量的表觀消化率顯著降低,其原因可能是茶葉渣中的粗纖維影響了肉兔對能量的吸收。Kil 等研究發(fā)現(xiàn),日糧中粗纖維水平是影響消化能值的主要因素。近年來,為了探討精準纖維營養(yǎng),中性洗滌纖維越來越多地用于評價飼糧碳水化合物組成和結構。隨著茶葉渣替代水平增加,肉兔對飼糧中性洗滌纖維消化吸收利用率呈下降趨勢,20%茶葉渣組消化率最低。本試驗中,中性洗滌纖維消化率下降可能是因為過高水平的茶葉渣增加了飼糧中中性洗滌纖維水平,而肉兔的消化能力有限,多余的中性洗滌纖維不被消化吸收而排出體外,但具體原因還有待進一步研究。
3.3 茶葉渣替代麩皮對肉兔血清生化指標的影響 血液生化指標的變化會受動物發(fā)育階段、營養(yǎng)水平和內分泌狀況等影響。血清尿素是反映動物蛋白質代謝和氨基酸平衡的一個重要指標,其含量越低說明機體對氮的利用率越高。本試驗中,隨著茶葉渣替代比例增加,肉兔血清尿素氮濃度呈上升趨勢,說明日糧中茶葉渣對蛋白質的合成和氮的沉積有負面影響。一方面,可能是茶葉渣降低了肉兔的干物質攝入,蛋白質吸收減少,體內蛋白質分解代謝增加。研究表明,飼糧中的蛋白水平顯著影響血清尿素氮含量,提高飼糧中蛋白水平可以降低血清尿素氮。另一方面,茶葉渣中多酚類物質限制了動物機體對茶葉渣蛋白質的吸收利用。國衛(wèi)杰等指出,茶葉渣經過糖化或發(fā)酵處理后再飼喂畜禽的飼喂效果好于直接飼喂。血清膽固醇和甘油三酯水平是機體脂肪沉積的重要指標。邱燕祥報道,用含0.4%和0.8%的茶多酚飼料飼喂血脂異常的兔子8 周后,能夠顯著降低其血清三酰甘油、總膽固醇和低密度脂蛋白含量。本試驗結果表明,飼糧中添加茶葉渣降低了血清膽固醇和甘油三酯含量,其中15%和20%茶葉渣替代組表現(xiàn)最為明顯,推測茶多酚及茶多糖等活性物質發(fā)揮了促進脂肪代謝的作用。Ikeda 等認為,茶多酚可以減少膽固醇顆粒在腸道內的溶解和吸收,從而降低血清中膽固醇含量。桑葉多糖是由多個單糖或其衍生物聚合而成的大分子活性物質,具有降血糖、降血脂、增強機體免疫力和抗血栓的作用。本研究中,茶葉渣組肉兔血清膽固醇、甘油三酯含量均下降,表明機體對脂質的轉運和代謝能力增加有利于促進機體健康。
本研究結果表明,日糧中使用茶葉渣替代10%的麩皮對肉兔的生產性能、營養(yǎng)成分表觀消化率和血清生化指標無顯著影響,但會降低血清總膽固醇和甘油三酯含量。因此,使用10%茶葉渣替代麩皮可改善動物機體對脂質的代謝,減少茶葉渣廢置給環(huán)境帶來的污染問題。