李紅軍,朱曉文

(臨夏市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心, 甘肅 臨夏 731100)

近年來養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展壯大和活畜交易量的增多，引發(fā)羊只的疫病種類越來越多，疫情防控難度越來越大，對此國家高度重視，不斷制訂、完善動(dòng)物防疫方案和政策，實(shí)施強(qiáng)制免疫的疫苗逐年增加。傳統(tǒng)的春秋兩季“一畜一針，分次注射”免疫工作模式，使基層防疫人員工作量和工作強(qiáng)度不斷增大，而且費(fèi)時(shí)費(fèi)力，工作效率不高，免疫效果差，增加了養(yǎng)殖戶勞動(dòng)強(qiáng)度,使免疫動(dòng)物的注射應(yīng)激反應(yīng)增加。為了提高免疫工作效率、強(qiáng)化免疫效果，探索不同日齡段的羊只多種疫苗同時(shí)組合進(jìn)行接種，所產(chǎn)生的免疫抗體效果及注射安全性，從而為基層從事羊只免疫工作的村級動(dòng)物防疫員提供科學(xué)依據(jù)。筆者于2021年3月25日～5月13日，在城郊鎮(zhèn)肖家村馬木灑養(yǎng)殖場、枹罕鎮(zhèn)銅匠莊村佳源牧業(yè)進(jìn)行了3種疫苗不同日齡上組合接種對比試驗(yàn)。

1 試驗(yàn)材料及方法

1.1 試驗(yàn)羊的選擇及分組

在2個(gè)養(yǎng)殖場內(nèi)選取3個(gè)不同日齡段羊只，經(jīng)獸醫(yī)臨床檢查，選取無臨床疾病表現(xiàn)的健康羊。選取的實(shí)驗(yàn)羊在免疫接種前對他們進(jìn)行有關(guān)抗體滴度測定，口蹄疫、小反芻獸疫、羊痘感染抗體陰性，母源抗體滴度低于1∶16選為實(shí)驗(yàn)對象。

根據(jù)日齡段每25只為1個(gè)組，共設(shè)立9個(gè)實(shí)驗(yàn)小組，即30～60日齡內(nèi)未斷奶的羔羊75只分成3個(gè)小組A1、A2、A3；90 ～120日齡內(nèi)育肥羊75只分成3個(gè)小組B1、B2、B3；150日齡以上的育成羊75只分成3個(gè)小組C1、C2、C3，再按接種疫苗的不同組合將實(shí)驗(yàn)對象分成3個(gè)大組。

1.2 試驗(yàn)方法

所選試驗(yàn)羊的以不同疫苗接種組合方式，在不同年齡段的羊只上進(jìn)行免疫注射。第I組(A1、B1、C1組)為頸兩側(cè)同時(shí)肌內(nèi)注射小反芻獸疫和口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活苗，14 d后免疫羊痘苗；第II組(A2、B2、C2組)頸部肌注、尾根皮下同時(shí)注射小反芻獸疫和羊痘苗，14 d后免疫口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活苗；第Ⅲ組(A3、B3、C3組)為頸部肌注、尾根皮下注射同時(shí)口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活苗和羊痘苗,14 d后免疫小反芻獸疫苗。

1.3 接種疫苗及注射劑量

采用山東綠都生物制科技有限公司生產(chǎn)的山羊痘活疫苗，批號(hào)2009014；選用中農(nóng)威特生物科技股份有限公司生產(chǎn)的批號(hào)為D201009J口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活苗；小反芻獸疫疫苗為天康生物股份有限公司生產(chǎn)的小反芻獸疫活疫苗，批號(hào)2020037-1。各種疫苗均按照免疫說明書規(guī)定的使用方法和劑量注射。

1.4 檢測試劑及判定標(biāo)準(zhǔn)

1.4.1 檢測試劑信息 所用檢測試劑均為正規(guī)廠家合格有效期產(chǎn)品，如表1所示。

表1 檢測試劑信息

1.4.2 判斷標(biāo)準(zhǔn)

(1)采用液相阻斷ELISA方法檢測口蹄疫免疫抗體，嚴(yán)格按照檢測試劑盒說明書進(jìn)行具體的操作，判定標(biāo)準(zhǔn)為抗體效價(jià)≥1∶128，判定為抗體陽性；抗體效價(jià)<1∶128，判定為抗體陰性。(2)采用競爭ELISA方法檢測小反芻獸疫免疫抗體效價(jià)，嚴(yán)格按照檢測試劑盒的操作說明書開展檢測，判定標(biāo)準(zhǔn)為抗體效價(jià)PI>50，判定為免疫抗體陽性；抗體效價(jià)PI≤50，判定為免疫抗體陰性。(3)采用間接ELISA方法檢測羊痘免疫抗體效價(jià)，具體的檢測操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行，判定標(biāo)準(zhǔn)為檢測樣品OD450≥臨界值，判定為抗體陽性；檢測樣品OD450<臨界值，判定為抗體陰性。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 免疫副反應(yīng)

實(shí)驗(yàn)羊接種疫苗后的72 h內(nèi)觀察其活動(dòng)狀態(tài)、采食量、臨床生理指標(biāo)變化情況，結(jié)果在選擇免疫的225只試驗(yàn)羊中，采用第I種免疫組合方式接種組中有8只實(shí)驗(yàn)羊注射疫苗3 h后出現(xiàn)發(fā)熱、呼吸加快，采食量下降的現(xiàn)象，因癥狀不明顯，均未采取任何的處理，48 h后均恢復(fù)正常，應(yīng)激反應(yīng)率占試驗(yàn)羊數(shù)的3.5%，B1組發(fā)生意外死亡1只。試驗(yàn)過程中所有選擇的實(shí)驗(yàn)羊只沒有發(fā)生1只因免疫副反應(yīng)而引起的死亡。

2.2 實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果

第一組、第二組和第三組免疫抗體檢測結(jié)果見表2、表3和表4。

表2 第I種組合免疫抗體檢測結(jié)果 只，份，%

表3 第II種組合免疫抗體檢測結(jié)果 只，份，%

表4 第Ⅲ種組合免疫抗體檢測結(jié)果 只，份，%

3 討論

3.1 各種疫苗組合安全性

無論是采用那種疫苗組合接種方式，都沒有出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)羊只免疫副反應(yīng)而引起死亡的情況發(fā)生，所以說口蹄疫、小反芻獸疫、羊痘疫苗的上述三種組合接種方式都是安全可行的。

3.2 各種疫苗組合接種效果

羊痘與口蹄疫苗分點(diǎn)同時(shí)注射免疫組合方式的免疫抗體合格率在三種組合方式中是最好的，實(shí)驗(yàn)羊既沒有明顯的免疫副反應(yīng)，并且不同畜齡實(shí)驗(yàn)羊免疫抗體檢測合格率最高。口蹄疫和羊痘、小反芻獸疫和羊痘不管在那種組合免疫方式或不同畜齡段羊只上，免疫效果很好，產(chǎn)生免疫抗體的差異不顯著，不同疫苗產(chǎn)生的抗體之間相互干擾、拮抗作用不顯著，按照國標(biāo)檢測標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測的免疫抗體合格率均在78%以上，都達(dá)到了國家規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)。

3.3 口蹄疫與小反芻獸疫疫苗同時(shí)分點(diǎn)注射的組合方式

雖然免疫抗體檢測的合格率在不同畜齡實(shí)驗(yàn)羊只上都達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)，但這種組合的免疫接種方式實(shí)驗(yàn)羊的應(yīng)激反應(yīng)率較大(占該試驗(yàn)組75只實(shí)驗(yàn)羊的13.3%)。因此，在實(shí)際的基層防疫工作中要謹(jǐn)慎選用。