李啟生

(微山縣人民醫(yī)院 山東 濟(jì)寧 277600)

肺癌是一種呼吸系統(tǒng)常見疾病，發(fā)病率和致死率均較高，是威脅患者生命安全的主要惡性腫瘤。因此，及早發(fā)現(xiàn)、診斷和明確患者病理類型，對(duì)肺癌患者治療效果提升和預(yù)后改善具有重要意義。薄層液基細(xì)胞學(xué)(TCT)是臨床篩查肺癌等疾病的重要方法，具有操作簡便，準(zhǔn)確度及特異度高等優(yōu)勢(shì)，且給患者造成的創(chuàng)傷小，屬于微創(chuàng)檢測(cè)，但是容易出現(xiàn)漏診或誤診等情況[1]。液基細(xì)胞學(xué)檢查通常應(yīng)用于宮頸癌等疾病篩查，現(xiàn)在該方法在細(xì)胞學(xué)診斷中也應(yīng)用廣泛。DNA定量分析技術(shù)是一種新型的DNA含量測(cè)量技術(shù)，主要利用基因水平快速測(cè)量和自動(dòng)分析細(xì)胞內(nèi)DNA含量，也是診斷肺癌的重要手段，為了解這兩種檢測(cè)方式聯(lián)合應(yīng)用于肺癌診斷的臨床效果，本文對(duì)其研究如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

納入2016年1月～2021年1月期間在我院接受治療的疑似肺癌患者130例，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)所有患者經(jīng)胸部CT檢查發(fā)現(xiàn)肺部存在陰影；(2)存在咳痰、咳血等臨床癥狀，臨床判斷為疑似肺癌；(3)自愿參與研究并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近期服用抗生素治療者；(2)合并周圍神經(jīng)病變；(3)合并心血管疾?。?4)合并惡性腫瘤；(5)肝腎等臟器功能不全或不配合者。其中男性76例，女性54例，年齡31～82歲，平均年齡(52.96±4.72)歲。病理檢查確診為陽性80例，陰性50例。

1.2方法

本研究所有患者均采集晨起痰液標(biāo)本，對(duì)其進(jìn)行TCT和DNA定量分析，(1)TCT檢測(cè)：采集痰液標(biāo)本，將其保存于新柏液基細(xì)胞保存瓶中，靜置半小時(shí)后使用黏液消解劑對(duì)痰黏液進(jìn)行消除，然后使用美國豪洛捷醫(yī)療公司生產(chǎn)的膜式TCT制片機(jī)進(jìn)行薄層細(xì)胞學(xué)片制作，實(shí)施HE染色后，對(duì)其實(shí)施TCT檢測(cè)。(2)DNA定量分析：稱取0.9g的二硫蘇糖醇(DTT)固體粉末，將其加入到100毫升50%乙醇中，充分?jǐn)嚢韬笈渲贸蒁TT溶解液，將其密封保存于4℃條件下。取適量痰液標(biāo)本， 加入20ml的清洗液和和2～3滴DTT溶解液，振蕩10分鐘以促進(jìn)黏液消化，操作完成后將痰液標(biāo)本轉(zhuǎn)移至含有細(xì)胞保存液的試管中，以每分鐘2500轉(zhuǎn)的速度對(duì)標(biāo)本進(jìn)行離心處理，去除上清液后，若細(xì)胞層仍肉眼可見黏液或血可重復(fù)上述步驟，留下離心管尖底部細(xì)胞，轉(zhuǎn)移至細(xì)胞分散液中，將其制作成兩張薄層細(xì)胞片，經(jīng)HE染色、Feulgen染色等處理后，應(yīng)用DNA定量分析系統(tǒng)進(jìn)行DNA倍體定量分析。

1.3觀察指標(biāo)

由經(jīng)驗(yàn)豐富的病理科醫(yī)生進(jìn)行TCT鏡下閱片與診斷。(1)TCT檢查根據(jù)痰細(xì)胞學(xué)診斷結(jié)果分為正常、異型、可疑惡性和惡性腫瘤，其中前兩者納入為陰性，后兩者確定為陽性。(2)DNA陰性：正常細(xì)胞的DNA指數(shù)(DI)為1；可疑惡性：有1～2個(gè)DI≥2.5的DNA倍體異常細(xì)胞；惡性：3個(gè)及以上DI≥2.5的DNA倍體異常細(xì)胞及出現(xiàn)異倍體峰。分析比較兩種檢查方法對(duì)肺癌患者的組織學(xué)類型檢出結(jié)果，并分析TCT與DNA定量單獨(dú)應(yīng)用和聯(lián)合應(yīng)用對(duì)肺癌的診斷效能。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 TCT檢查對(duì)肺癌組織學(xué)類型的診斷結(jié)果

本研究130例經(jīng)病理檢查確診為陽性80例，陰性50例，通過對(duì)其病理組織類型進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，TCT檢查對(duì)鱗癌的診斷準(zhǔn)確率為66.67%，對(duì)腺癌的診斷準(zhǔn)確率為63.16%，對(duì)小細(xì)胞癌診斷準(zhǔn)確率53.85%，對(duì)大細(xì)胞癌和類癌的診斷準(zhǔn)確率分別為42.86%和56.25%。詳見下表1。

表1 TCT檢查對(duì)肺癌組織學(xué)類型的診斷結(jié)果

2.2 DNA定量分析對(duì)肺癌組織學(xué)類型的診斷結(jié)果

DNA定量分析檢出正常21例，可疑惡性22例，惡性37例，其中鱗癌診斷準(zhǔn)確率86.67%，腺癌準(zhǔn)確率78.95%，小細(xì)胞癌、大細(xì)胞癌準(zhǔn)確率分別為65.38%和71.42%，類癌準(zhǔn)確率50.00%。見表2。

表2 DNA定量分析對(duì)肺癌組織學(xué)類型的診斷結(jié)果

2.3 TCT與DNA定量分析對(duì)肺癌的診斷效能

通過對(duì)130例患者的檢查結(jié)果進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，TCT單獨(dú)檢測(cè)真陽性45例，真陰性42例，DNA定量分析單獨(dú)應(yīng)用的真陽性與真陰性數(shù)分別為59例和44例，而將兩者聯(lián)合應(yīng)用后的真陽性和真陰性檢出數(shù)量均顯著增加。見表3。

表3 TCT與DNA定量分析單獨(dú)與聯(lián)合應(yīng)用診斷效能

TCT與DNA定量分析聯(lián)合對(duì)肺癌的診斷靈敏度為92.50%，準(zhǔn)確度為93.08%，陰性預(yù)測(cè)值88.68%，與單獨(dú)TCT和單獨(dú)DNA定量分析檢測(cè)結(jié)果比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表4。

表4 不同檢查方法的診斷效能比較

3 討論

肺癌屬于臨床常見病，對(duì)于該疾病的具體發(fā)病機(jī)制目前尚無定論，分析其可能與遺傳、職業(yè)、空氣污染以及飲食等因素相關(guān)，患者臨床主要表現(xiàn)為咳嗽、呼吸困難以及胸痛等癥狀，影響患者的生活質(zhì)量，若治療不及時(shí)容易導(dǎo)致上腔靜脈阻塞綜合征、骨轉(zhuǎn)移等情況出現(xiàn)，威脅患者生命安全[2]。由于該病早期臨床癥狀無特異性，部分患者確診時(shí)已達(dá)到中晚期，治療難度加大，具有較高死亡率。因此，及早發(fā)現(xiàn)和明確肺癌疾病性質(zhì)，才能制定針對(duì)性治療方案，從而提升患者療效。常規(guī)細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)在肺癌診斷中特異性較高，是臨床常用于診斷肺癌的檢驗(yàn)方法之一，但該方法檢驗(yàn)過程中極易受到多種因素的影響，導(dǎo)致其敏感性下降，一定程度上影響了診斷準(zhǔn)確性。薄層液基細(xì)胞學(xué)是一種新興的細(xì)胞制片技術(shù)，常用于婦科腫瘤的早期篩查診斷，但近幾年該方法也逐漸應(yīng)用于肺癌診斷中。

TCT檢測(cè)具有操作簡單、制片規(guī)范及制片效果好等特點(diǎn)，患者比較容易接受，且自帶標(biāo)本制備和自動(dòng)制片系統(tǒng)，不僅能大批量處理標(biāo)本，提高普查效率，還能改變傳統(tǒng)檢驗(yàn)中細(xì)胞形態(tài)改變、涂片太厚或背景污穢等問題，有助于進(jìn)一步提高細(xì)胞學(xué)診斷準(zhǔn)確性[3]。TCT檢測(cè)可在標(biāo)本取出后直接將其浸入細(xì)胞保存液中，一方面可保留取樣器中的完整標(biāo)本，避免有價(jià)值標(biāo)本細(xì)胞死亡；另一方面也能避免普通標(biāo)本制作時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞過度干燥的情況，最大限度保護(hù)了細(xì)胞原有形態(tài)。TCT還能減少細(xì)菌涂抹面積，縮短臨床閱片時(shí)間，進(jìn)而達(dá)到提高工作效率的目的，一定程度上避免過度疲勞而出現(xiàn)假陽性[4]。但是TCT檢查也存在一定不足，該方法主要根據(jù)細(xì)胞形態(tài)變化對(duì)病情做出病情，在痰標(biāo)本中脫落癌細(xì)胞較少和細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)不典型的情況下，可影響診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，容易導(dǎo)致疾病漏診或誤診。

DNA定量分析是對(duì)細(xì)胞DNA實(shí)施特異染色，然后應(yīng)用全自動(dòng)掃描系統(tǒng)對(duì)玻片上細(xì)胞核進(jìn)行掃描，然后根據(jù)細(xì)胞核內(nèi)DNA參數(shù)進(jìn)行自動(dòng)分類和技術(shù)，結(jié)合細(xì)胞DI判定檢測(cè)結(jié)果。采用該方法進(jìn)行檢測(cè)，能夠使細(xì)胞學(xué)檢查從傳統(tǒng)的單一形態(tài)學(xué)檢查，進(jìn)一步上升至分子水平的定量分析，能夠及早發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)DNA含量的微小變化，從而及早預(yù)測(cè)患者癌癥風(fēng)險(xiǎn)。有研究報(bào)道，DNA定量分析通過利用自動(dòng)掃描系統(tǒng)對(duì)各細(xì)胞的細(xì)胞核進(jìn)行識(shí)別，能夠快速識(shí)別出標(biāo)本中的癌變細(xì)胞，且能夠更為客觀地體現(xiàn)形態(tài)學(xué)特征，具有較TCT檢查更高的陽性檢出率，能夠?yàn)榕R床疾病診斷與治療提供指導(dǎo)[5]。目前DNA定量分析已經(jīng)在各類良惡性腫瘤的鑒別診斷中應(yīng)用廣泛，如甲狀腺腫瘤、子宮頸癌、乳腺癌等疾病診斷中均可應(yīng)用該方法，但關(guān)于該方法在肺癌診斷中的應(yīng)用報(bào)道相對(duì)較少。本研究顯示，不論是TCT和DNA定量分析均可較好地判斷患者的病理組織類型，且TCT檢查與DNA定量分析聯(lián)合診斷的靈敏度、準(zhǔn)確度、陰性預(yù)測(cè)值分別達(dá)到了92.50%、93.08%、88.68%，優(yōu)于單獨(dú)TCT和DNA定量分析結(jié)果，說明將這兩種方法充分結(jié)合可顯著提升臨床對(duì)肺癌的診斷效果。

總而言之，在采集痰液標(biāo)本進(jìn)行肺癌診斷時(shí)，采用TCT聯(lián)合DNA定量分析能夠充分發(fā)揮這兩種檢查方法的優(yōu)勢(shì)，減少人為干擾等因素的影響，確保檢測(cè)結(jié)果更為客觀和準(zhǔn)確，具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，能夠?yàn)榕R床肺癌診斷及預(yù)后評(píng)估提供重要依據(jù)。