白 潔 王中良 李 晶

胃癌(gastric carcinoma，GC)是一種高發(fā)病率、高死亡率的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，起源于胃黏膜上皮，具有早期診斷難、晚期難治療的特征[1-2]。有研究稱胃癌的預(yù)后與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、病理類型、腫瘤浸潤深度等有關(guān)[3-4]，但是無法在患者早期患病時(shí)輕松獲取此類信息，因此需要尋找對(duì)進(jìn)展期胃癌患者的預(yù)后做出準(zhǔn)確評(píng)估的新型生物學(xué)標(biāo)志物。內(nèi)皮細(xì)胞特異性分子(ESM-1)與胃癌的分化程度關(guān)系密切[5]，胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(insulin-like growth factor binding protein 3，IGFBP3)具有調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞生長的作用[6]。轉(zhuǎn)錄因子叉頭框P3(forkheadbox P3，F(xiàn)OXP3)是FOX家族成員之一，影響多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展[7]。因此，本研究探討進(jìn)展期胃癌組織中ESM-1、IGFBP3、FOXP3的表達(dá)及對(duì)患者預(yù)后的影響?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2016年2月至2019年2月本院收治進(jìn)展期胃癌患者100例，其中男性67例，女性33例，年齡32～79歲，平均(59.78±10.68)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《胃癌診療規(guī)范》[8]，經(jīng)病理檢測(cè)確診為胃癌；② 入組患者臨床病理分期為ⅠB～ⅢA期胃癌患者；③術(shù)前未接受任何放化療治療；④患者簽署自愿受試同意書，患者及其家屬需簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：① 精神疾病患者；②合并其他惡性腫瘤患者；③合并其他器官嚴(yán)重性病變患者。

1.2 免疫組化檢測(cè)ESM-1、IGFBP3和FOXP3

取手術(shù)切除胃癌患者癌組織制作標(biāo)本，甲醛固定、石蠟包埋，脫蠟、水化處理標(biāo)本后于枸櫞酸緩沖液中浸泡，于雙氧水下孵育10 min，滴入血清孵育30 min后加入一抗，過夜孵育后加入二抗，37℃孵育30 min。清洗后進(jìn)行DAB顯色，封片。

1.3 收集資料

收集入組患者基本信息，患者術(shù)后病理相關(guān)信息，包括病理分化、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、血管癌栓、神經(jīng)侵犯等。記錄患者無復(fù)發(fā)生存期(RFS)：從根治性手術(shù)到首次復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 胃癌組織ESM-1、IGFBP3、FOXP3表達(dá)與其臨床參數(shù)的關(guān)系

胃癌組織ESM-1、IGFBP3、FOXP3蛋白表達(dá)與患者年齡、性別均無關(guān)(P>0.05)，ESM-1表達(dá)與神經(jīng)侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期顯著相關(guān)(P<0.05)；IGFBP3表達(dá)與血管癌栓、神經(jīng)侵犯、病理分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期顯著相關(guān)(P<0.05)；FOXP3表達(dá)與腫瘤病理分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)，見表1。

表1 胃癌組織中ESM-1、IGFBP3、FOXP3蛋白表達(dá)與其臨床參數(shù)的關(guān)系

2.2 單因素和多因素回歸分析影響胃癌患者RFS預(yù)后的相關(guān)因子

單因素Cox回歸分析：患者3年RFS與腫瘤病理分化、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、ESM-1、IGFBP3、FOXP3高表達(dá)之間存在相關(guān)性(P<0.05)，多因素Cox回歸分析結(jié)果顯示，患者3年RFS與ESM-1、IGFBP3、FOXP3高表達(dá)存在顯著相關(guān)性(P<0.05)，見表2。

表2 單因素和多因素回歸分析影響胃癌患者RFS預(yù)后的相關(guān)因子

3 討論

胃癌是指發(fā)生于機(jī)體胃粘膜組織的惡性腫瘤，其發(fā)病率高、病死率高、惡性程度高等特點(diǎn)，胃癌因早期癥狀與胃炎、胃潰瘍相似，無特異性臨床癥狀，早期診斷率低[9-10]。據(jù)研究報(bào)道，胃癌的發(fā)病率和死亡率呈現(xiàn)逐年增長的趨勢(shì)，50%的患者就診時(shí)已發(fā)展成晚期或者存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，失去了最佳的治療時(shí)機(jī)[11-12]。進(jìn)展期胃癌更易發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移，嚴(yán)重威脅患者生活質(zhì)量和生命健康，臨床難度也大幅提升，嚴(yán)重影響患者的預(yù)后效果[13-14]。因此，尋找合適的生物標(biāo)志物判斷胃癌患者預(yù)后是目前臨床研究的重點(diǎn)。

ESM-1是一種可溶性蛋白多糖，EAM-1在腎、肝、肺等正常組織中都存在低表達(dá)，在肝癌、腎癌、肺癌等多種腫瘤中出現(xiàn)高表達(dá)的現(xiàn)象[15-16]。有研究證實(shí)ESM-1表達(dá)水平與胃癌的分化程度呈正相關(guān)[17]。IGFBP3具有調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞生長的作用，參與腫瘤細(xì)胞的增殖有關(guān)，同時(shí)IGFBP3作為胃癌的腫瘤標(biāo)志物，與腫瘤的大小、分期及轉(zhuǎn)移有關(guān)[18-19]。Foxp3是Fox家族的重要組成成員，具有調(diào)節(jié)Treg細(xì)胞生長發(fā)育的作用[20]。研究表明，F(xiàn)oxp3在腫瘤細(xì)胞中表達(dá)異常，與乳腺癌、肺癌等癌組織細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移相關(guān)[21]。本研究發(fā)現(xiàn)ESM-1表達(dá)與患者神經(jīng)侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期顯著相關(guān)；IGFBP3與患者血管癌栓、神經(jīng)侵犯、病理分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期顯著相關(guān)；FOXP3表達(dá)與患者病理分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，說明ESM-1、IGFBP3和FOXP3與胃癌臨床病理特征有關(guān)，參與胃癌的發(fā)生演變進(jìn)程。本研究多因素Cox回歸分析結(jié)果顯示，患者3年RFS與ESM-1、IGFBP3、FOXP3高表達(dá)存在顯著相關(guān)性，進(jìn)一步說明ESM-1、IGFBP3、FOXP3高表達(dá)與胃癌增殖活性有關(guān)，可用于評(píng)估胃癌患者腫瘤細(xì)胞的凋亡壞死情況。

綜上所述，本研究證實(shí)ESM-1、IGFBP3、FOXP3異常表達(dá)與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，ESM-1、IGFBP3、FOXP3異常表達(dá)有望成為預(yù)測(cè)進(jìn)展期胃癌患者預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)。但是本研究存在一定的局限性，首先是標(biāo)本的存儲(chǔ)時(shí)間有限，無法完全保證ESM-1、IGFBP3、FOXP3檢測(cè)水平的準(zhǔn)確性，其次本研究納入的患者數(shù)量較少，且中心單一，均會(huì)對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生偏倚。因此，仍需進(jìn)一步研究證實(shí)其結(jié)果的準(zhǔn)確性。