郭志飛
獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)簡(jiǎn)稱艾滋病,主要是因?yàn)镠IV 對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)進(jìn)行攻擊而造成的?,F(xiàn)階段,艾滋病是臨床無(wú)法治愈的疾病,具有較高的死亡率,所以又被稱為世紀(jì)殺手。因?yàn)榘滩【哂休^長(zhǎng)的潛伏期,許多患者在感染艾滋病后依然是健康的,同時(shí)伴有輕微癥狀或者無(wú)癥狀,很可能導(dǎo)致HIV 傳染給其他人員,具有終生傳染性[1,2]。所以,如何在短時(shí)間內(nèi)明確診斷為艾滋病,并將攜帶HIV 患者篩查出,是當(dāng)前控制艾滋病傳播及發(fā)展的主要方法?,F(xiàn)階段,主要利用HIV 抗體檢測(cè)方法診斷HIV 感染,而酶聯(lián)免疫法是以往常用的一種檢測(cè)方法,在醫(yī)學(xué)技術(shù)日益提高的背景下,金標(biāo)法被廣泛應(yīng)用于臨床中,以便更好的篩查HIV。因而,本次研究針對(duì)金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法在HIV抗體檢測(cè)中的應(yīng)用效果進(jìn)行簡(jiǎn)單闡述,具體如下。
1.1 一般資料 本次研究選取本院2019 年1 月~2020 年5 月接收的120 例接受HIV 抗體檢測(cè)的患者,其中男64 例,女56 例;年齡最小18 歲,最大65 歲,平均年齡(33.65±10.45)歲;文化水平:小學(xué)23 例,初中28 例,高中31 例,大專及大專以上38 例。經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn):自愿參與研究并簽署同意書;研究資料齊全、完整;具備正常溝通、表達(dá)、理解能力;具備良好的依從性。排除標(biāo)準(zhǔn):合并血液系統(tǒng)疾病或者免疫系統(tǒng)疾??;存在心理障礙或者具有精神疾病史;合并惡性腫瘤;哺乳期或者妊娠期婦女。
1.2 方法 采集所有患者5 ml 的空腹血液標(biāo)本,血液樣本檢測(cè)前,均未被污染,同時(shí)也無(wú)溶血現(xiàn)象。血液采集過(guò)程中,全面落實(shí)無(wú)菌操作原則。
1.2.1 金標(biāo)法檢測(cè) 在25 μl 的血清中添加金標(biāo)法試劑,然后添加一滴緩沖液,靜置20 min,通過(guò)肉眼觀察,如果試紙上存在2 條紅線,表示血液標(biāo)本檢測(cè)為陽(yáng)性;若是無(wú)2 條紅線,表示血液樣本檢測(cè)為陰性,準(zhǔn)確記錄紅線產(chǎn)生時(shí)間。
1.2.2 酶聯(lián)免疫法檢測(cè) 應(yīng)用酶聯(lián)免疫試劑及配套儀器,按照說(shuō)明書進(jìn)行操作,檢測(cè)過(guò)程中,應(yīng)用酶標(biāo)儀,對(duì)標(biāo)準(zhǔn)a 值進(jìn)行檢測(cè):參考波長(zhǎng)為630 nm,檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為450 nm,若a 值≥1,說(shuō)明血液樣板檢測(cè)為陽(yáng)性;若a 值<1,說(shuō)明血液樣本檢測(cè)為陰性。酶聯(lián)免疫檢測(cè)血液樣本期間,嚴(yán)格按照檢測(cè)儀器及說(shuō)明書進(jìn)行,同時(shí)讓相同的檢測(cè)人員檢測(cè)血液樣本。
不同檢測(cè)方法初次檢驗(yàn)后明確診斷為陽(yáng)性的血液樣本,需要二次檢測(cè),進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn),將確認(rèn)試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的血液樣本送至疾控中心展開免疫印跡檢測(cè)。
1.3 觀察指標(biāo) 準(zhǔn)確記錄酶聯(lián)免疫法與金標(biāo)法檢測(cè)結(jié)果,并進(jìn)行比較。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
金標(biāo)法血液樣本陽(yáng)性率為9.17%,酶聯(lián)免疫法血液樣本陽(yáng)性率為2.50%。金標(biāo)法血液樣本陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.855,P=0.028<0.05)。以免疫印跡檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn),金標(biāo)法檢測(cè)HIV 抗體的假陽(yáng)性率為0.91%(1/110),酶聯(lián)免疫法檢測(cè)HIV 抗體的漏診率為70.00%(7/10)。見表1。
表1 不同檢測(cè)方法對(duì)HIV 抗體的檢測(cè)結(jié)果比較[n(%),n=120]
艾滋病是由于HIV 感染而引起的病情相對(duì)嚴(yán)重的傳染疾病,具有盜汗、持續(xù)發(fā)熱等臨床癥狀,中青年人是主要患病人群,主要通過(guò)母嬰、性接觸及血液方式等傳播。艾滋病自身具有較大的危害性,是因?yàn)镠IV 感染造成的。HIV 是一種可以對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)造成攻擊的病毒,其主要負(fù)責(zé)攻擊免疫系統(tǒng)中相對(duì)重要的CD4 淋巴細(xì)胞,使得該細(xì)胞受損,機(jī)體免疫功能喪失[3]。所以,機(jī)體很容易感染各種各樣的疾病,同時(shí)也可能導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生,具有較高的死亡率。一般情況下,機(jī)體中HIV 潛伏期是8~9 年,HIV 潛伏階段,患者無(wú)任何癥狀,也不會(huì)對(duì)正常工作和生活造成影響[4]。所以需要及早檢測(cè)潛伏在機(jī)體的HIV,其直接影響著艾滋病的控制及傳播?,F(xiàn)階段,抗體檢測(cè)是診斷艾滋病常用方法,機(jī)體HIV 感染后,其會(huì)在短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)抵抗性抗體及免疫反應(yīng),其能夠更好的控制寄生蟲、病毒和病原體的入侵等。
金標(biāo)法是一種全新的體外診斷方法,其具有特異性高、靈敏性高等特點(diǎn),該方法操作快捷、簡(jiǎn)答,且具有較高的檢測(cè)準(zhǔn)確率。通過(guò)特制的檢驗(yàn)盒能夠快速取得檢測(cè)結(jié)果,詳細(xì)操作如下[5]:血液標(biāo)本采集后,在試紙上滴注血液樣本,靜置20 min 后,仔細(xì)觀察試紙顏色是否發(fā)生改變,如果顏色改變,表示初步檢測(cè)為陽(yáng)性。對(duì)于大部分患者和醫(yī)院均比較適用,該方法具有操作便捷、方便、檢測(cè)準(zhǔn)確高等特點(diǎn)。酶聯(lián)免疫法是改良酶免疫測(cè)定原理的技術(shù),其包括三種,分別是抗體競(jìng)爭(zhēng)法、間接法與雙抗原夾心法。當(dāng)前,雙抗原夾心法試劑是國(guó)外及國(guó)內(nèi)常用的檢測(cè)方法,操作步驟如下[6]:在酶反應(yīng)中添加底物,因?yàn)槊复呋饔?導(dǎo)致底物轉(zhuǎn)變成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量存在緊密關(guān)聯(lián)。所以,需要根據(jù)顏色反應(yīng)進(jìn)行定量分析或者定性分析。由于酶催化具有較高頻率,所以能夠進(jìn)一步放大反應(yīng)效果,進(jìn)而提高了檢測(cè)方法的敏感度。
本次研究主要在空腹?fàn)顟B(tài)下采集5 ml 血液樣本,采集期間,全面落實(shí)無(wú)菌操作原則,指導(dǎo)患者分別實(shí)施酶聯(lián)免疫法與金標(biāo)法檢測(cè),研究結(jié)果顯示,金標(biāo)法血液樣本陽(yáng)性率為9.17%,酶聯(lián)免疫法血液樣本陽(yáng)性率為2.50%。金標(biāo)法血液樣本陽(yáng)性率高于酶聯(lián)免疫法,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。以免疫印跡檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn),金標(biāo)法檢測(cè)HIV 抗體的假陽(yáng)性率為0.91%(1/110),酶聯(lián)免疫法檢測(cè)HIV 抗體的漏診率為70.00%(7/10)。由此可見,金標(biāo)法在HIV 抗體檢測(cè)中具有靈敏度高等特點(diǎn),而且酶聯(lián)免疫法具有較高的特異度。不同血液中HIV抗體檢測(cè)方法,從檢測(cè)原理和操作兩個(gè)方面分析,存在一定差異,金標(biāo)法不僅能夠快速反應(yīng),而且并不需要消耗大量時(shí)間和特殊設(shè)備,從容取得檢測(cè)結(jié)果。對(duì)于病情嚴(yán)重者,如果采用酶聯(lián)免疫法對(duì)血液進(jìn)行檢測(cè),很可能延誤病情,如果血液檢測(cè)時(shí)未確診,則會(huì)導(dǎo)致臨床醫(yī)師在未知狀態(tài)下展開手術(shù),進(jìn)而增加了艾滋病傳播風(fēng)險(xiǎn)[7]。所以,通過(guò)金標(biāo)法能夠有效解決急診中遇到的該類狀況,協(xié)助醫(yī)師更好的診斷病情。但是酶聯(lián)免疫法在監(jiān)測(cè)精準(zhǔn)度方面較金標(biāo)法高,且具有較低的誤差。盡管操作較為復(fù)雜,對(duì)于非緊急狀況較為適用。
金標(biāo)法在血液HIV 抗體檢測(cè)中具有較高的靈敏度和特異度。兩種方法血液HIV 抗體檢測(cè)中具有重要作用,從檢測(cè)過(guò)程及檢測(cè)原理兩個(gè)方面來(lái)看,存在許多不同地方[8]。通常情況下,金標(biāo)法能夠在短時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),而且檢測(cè)期間不應(yīng)用特殊設(shè)備,檢測(cè)時(shí)間短,能夠在短時(shí)間內(nèi)取得血液樣本檢測(cè)結(jié)果。針對(duì)病情嚴(yán)重者,若應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測(cè),則會(huì)對(duì)疾病診斷時(shí)間造成影響,未取得血液檢測(cè)結(jié)果前,則會(huì)對(duì)臨床醫(yī)生的診治造成影響,進(jìn)而提高了傳播風(fēng)險(xiǎn)[9]。而金標(biāo)法可以彌補(bǔ)酶聯(lián)免疫法的不足,在短時(shí)間內(nèi)了解患者病情。酶聯(lián)免疫法的檢測(cè)效果更加明顯,但是該方法操作繁瑣、復(fù)雜,導(dǎo)致使用范圍受到影響。
金標(biāo)法具有操作簡(jiǎn)單、方便、檢測(cè)速度快、敏感性高等特點(diǎn),對(duì)于個(gè)人檢測(cè)和中小醫(yī)院更加適用。酶聯(lián)免疫法同樣具有良好的特異性及敏感性,但是其需要結(jié)合酶標(biāo)儀等設(shè)備輔助,而且對(duì)專業(yè)人員的操作要求較高,且操作繁瑣,往往需要大量時(shí)間檢查,對(duì)于單份標(biāo)本的檢測(cè)不適用。本次研究中,金標(biāo)法與酶聯(lián)免疫法均具有良好的診斷效果,所以應(yīng)加強(qiáng)對(duì)檢測(cè)方法的選擇,從而更好的判斷疾病,根據(jù)診斷結(jié)果予以患者相應(yīng)的治療,從而促進(jìn)患者治療效果和生活質(zhì)量的提高,改善其身體狀況。
總而言之,HIV 抗體檢測(cè)過(guò)程中,酶聯(lián)免疫法與金標(biāo)法均具有一定效果,臨床檢測(cè)過(guò)程中,需要根據(jù)患者實(shí)際狀況對(duì)檢測(cè)方法進(jìn)行選擇,從而促進(jìn)診斷準(zhǔn)確率的提高,以便醫(yī)生根據(jù)檢測(cè)結(jié)果為患者提供針對(duì)性治療方法,改善患者身體狀況和生活質(zhì)量。