崔曉磊，云興福，田曉春，武日華，劉杰才

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝與植物保護(hù)學(xué)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010011；2.內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)技術(shù)推廣中心農(nóng)墾經(jīng)濟(jì)發(fā)展處，內(nèi)蒙古呼和浩特 010010；3.巴彥淖爾市臨河區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，內(nèi)蒙古臨河 015000）

近年來(lái)，由于黃瓜的栽培面積逐年增加，加之我國(guó)南菜北運(yùn)，黃瓜成一種可以四季供應(yīng)的蔬菜，在“菜籃子工程”中占有重要的地位[1]。隨著我國(guó)設(shè)施黃瓜的普遍種植，為了給黃瓜提供充足的溫度和濕度，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)反季節(jié)供應(yīng)，周期性規(guī)模種植的一系列問(wèn)題相應(yīng)產(chǎn)生[2]。高溫高濕環(huán)境雖然加速了黃瓜的生長(zhǎng)，但也給病原菌的侵染提供了溫床[3]，導(dǎo)致目前黃瓜生產(chǎn)上發(fā)生的病害越來(lái)越多，且程度越來(lái)越嚴(yán)重，從而影響黃瓜的產(chǎn)量與品質(zhì)。種帶菌病害是生產(chǎn)上制約黃瓜產(chǎn)量與品質(zhì)的最重要因素之一[4]。

種帶菌病害依據(jù)病原菌分為真菌性種帶菌病害和細(xì)菌性種帶菌病害[5]。霜霉病、角斑病、白粉病是常見(jiàn)的種帶菌病害，在黃瓜生產(chǎn)過(guò)程中發(fā)病周期短，傳播速度快，嚴(yán)重的甚至?xí)裹S瓜葉片全部死亡，對(duì)于黃瓜來(lái)說(shuō)是一場(chǎng)毀滅性的病害[6-8]。在我國(guó)東北、華北和華東地區(qū)，很容易受到這些病害的侵染。植株一旦感染，導(dǎo)致黃瓜產(chǎn)量減少，嚴(yán)重時(shí)甚至絕收，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和農(nóng)民增收帶來(lái)很大影響[9-10]。

生產(chǎn)中通常使用化學(xué)試劑和農(nóng)藥進(jìn)行種子消毒，但是消毒過(guò)程中可能造成黃瓜種子污染，導(dǎo)致產(chǎn)生對(duì)人體有害的物質(zhì)，威脅人類的身體健康[11]。為了解決蔬菜生產(chǎn)中種子傳播病害的問(wèn)題，并減輕黃瓜受到的農(nóng)藥污染，提高食品安全質(zhì)量，干熱處理黃瓜種子具有重要意義。關(guān)于干熱處理黃瓜種子的試驗(yàn)已有報(bào)道，李明等[12]研究發(fā)現(xiàn)，在70 ℃和76 ℃下干熱處理24、48、72 h 對(duì)于種子表面真菌和細(xì)菌有防治效果，70 ℃處理72 h 防治效果最好，并且不影響種子發(fā)芽和種子活力。周賢達(dá)等[13]將種子置于72 ℃處理12 h，結(jié)果表明，干熱處理可以有效殺滅種子病菌和病毒。本試驗(yàn)將黃瓜種子在60、70、80、90、100 ℃溫度下分別處理2、4、6、8、10、12 h，旨在尋找通過(guò)干熱處理殺死黃瓜種帶病原真菌、細(xì)菌且不影響種子萌發(fā)力的最佳溫度與時(shí)間，為黃瓜的綠色生產(chǎn)提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

黃瓜種子品種選用亮豐77（購(gòu)自內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院種子經(jīng)銷部，種子含水量5%以下），干熱儀器為電熱鼓風(fēng)干燥箱。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及方法

1.2.1 干熱處理對(duì)黃瓜種子萌發(fā)的影響

在60、70、80、90、100 ℃溫度下處理2、4、6、8、10、12 h，共30 個(gè)處理，對(duì)照（CK）為同批未經(jīng)干熱處理的黃瓜種子，每個(gè)處理重復(fù)3 次，測(cè)量各處理的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率。在培養(yǎng)皿中墊兩層濾紙，用蒸餾水浸濕，將干熱處理后的黃瓜種子置于培養(yǎng)皿中，每個(gè)培養(yǎng)皿中放50 粒黃瓜種子。然后將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱中催芽，溫度為28 ℃，各處理每天定時(shí)加入定量的蒸餾水保證黃瓜種子正常發(fā)芽（保證其濕潤(rùn)又不流出水分）。每天記錄黃瓜種子的發(fā)芽情況。

1.2.2 干熱處理對(duì)黃瓜種帶菌活力的影響

無(wú)菌條件下，將經(jīng)過(guò)干熱處理的黃瓜種子，分別用鑷子放置到PDA 培養(yǎng)基（200 g 馬鈴薯+20 g蔗糖+16 g 瓊脂+1 000 mL 蒸餾水）和LB 培養(yǎng)基（10 g 蛋白胨+5 g 酵母提取物+10 g NaCl+15 g 瓊脂+1 000 mL 蒸餾水）內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，每個(gè)培養(yǎng)皿放50粒黃瓜種子。PDA 培養(yǎng)基放置在25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中，LB 培養(yǎng)基放置在37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中。第4 天時(shí)觀察黃瓜種子種帶菌情況，記錄被污染的種子數(shù)量。PDA 培養(yǎng)基測(cè)定真菌性種帶菌滅活率，LB 培養(yǎng)基測(cè)定細(xì)菌性種帶菌滅活率。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用Microsoft Excel 2010 和SPSS 17.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 干熱處理對(duì)黃瓜種子萌發(fā)的影響

由表1 可知，發(fā)芽勢(shì)隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升后降的趨勢(shì)。干熱處理60、70、80 ℃各處理發(fā)芽勢(shì)顯著高于90、100 ℃發(fā)芽勢(shì)（P＜0.05）。60 ℃處理4、6、8、10 h，70 ℃處理2、4、6、8、10 h，80 ℃處理4、6 h發(fā)芽勢(shì)高于CK 且發(fā)芽勢(shì)為72.67%～78.00%。黃瓜種子發(fā)芽勢(shì)最高的是70 ℃干熱處理4 h，為78.00%。而90、100 ℃干熱處理發(fā)芽勢(shì)低于CK。

表1 不同溫度不同時(shí)間處理后黃瓜種子的發(fā)芽勢(shì) 單位：%

由表2 可知，發(fā)芽率隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)呈先升后降的趨勢(shì)。60 ℃處理6、8、10、12 h，70 ℃處理2、4、6、8 h，80 ℃處理4、6 h 發(fā)芽率為90.00%～98.00%，均高于CK。發(fā)芽率最高的是70 ℃處理4 h，為98.00%。60、70、80 ℃各處理與90、100 ℃各處理相比差異顯著（P＜0.05）。對(duì)種子萌發(fā)來(lái)說(shuō)，干熱處理的上限溫度為80 ℃，干熱處理超過(guò)80 ℃，種子萌發(fā)率顯著降低。

表2 不同溫度不同時(shí)間處理后黃瓜種子的發(fā)芽率 單位：%

2.2 干熱處理對(duì)黃瓜種帶菌活力的影響

2.2.1 不同處理的黃瓜種子在PDA 培養(yǎng)基的真菌性種帶菌滅活率

由表3 可知，PDA 培養(yǎng)基中，黃瓜種子在60 ℃處理下，隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)真菌性種帶菌活力下降，說(shuō)明干熱處理對(duì)真菌性種帶菌活力有抑制作用。在70 ℃下，真菌性種帶菌滅活率隨干熱時(shí)間的增加呈先升后降的趨勢(shì)。70 ℃和80 ℃處理2、4、6、8、10、12 h 滅活率均顯著高于CK（P＜0.05）。70 ℃處理2、4、6、8、10 h，80 ℃處理4、6 h 滅活率為81.33%～97.33%。滅活率最高的為70 ℃處理4 h，滅活率為97.33%。

表3 不同處理的黃瓜種子在PDA 培養(yǎng)基的真菌性種帶菌滅活率 單位：%

2.2.2 不同處理的黃瓜種子在LB 培養(yǎng)基的細(xì)菌性種帶菌滅活率

由表4 可知，在LB 培養(yǎng)基中，60 ℃各處理滅活率為0，說(shuō)明在60 ℃下干熱處理不能滅活細(xì)菌性種帶菌。70 ℃和80 ℃處理2、4、6、8、10、12 h 與CK 差異顯著（P＜0.05）。70 ℃處理4 h 滅活率最高，滅活率為96.67%。在70 ℃和80 ℃干熱處理下，細(xì)菌性種帶菌活力隨處理時(shí)間的增加，呈先升后降的趨勢(shì)。在干熱處理中，殺死黃瓜種帶菌且不顯著降低種子萌發(fā)力的最佳溫度與時(shí)間為70 ℃、4 h。

表4 不同處理的黃瓜種子在LB 培養(yǎng)基的細(xì)菌性種帶菌滅活率 單位：%

3 討論與結(jié)論

孟姍姍等[14]在進(jìn)行干熱處理時(shí)，對(duì)于攜帶細(xì)菌和病毒的黃瓜種子，將處理溫度從35 ℃提高至65～75 ℃進(jìn)行處理，黃瓜種子置于75 ℃處理72 h 可有效抑制黃瓜細(xì)菌性角斑病、黃瓜綠斑駁花葉病毒病引起的種拌細(xì)菌性和病毒性病害，而種子的發(fā)芽率不受影響。高山睦雄等[15]研究發(fā)現(xiàn)，將黃瓜種子在70 ℃干熱處理3 d 或80 ℃處理2 d 可以有效防治黃瓜根腐病，且干熱處理后不影響種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)，不存在發(fā)芽障礙，對(duì)植株鮮重也沒(méi)有影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，60、70、80 ℃各處理發(fā)芽勢(shì)顯著（P＜0.05）高于90、100 ℃各處理。60、70、80 ℃各處理發(fā)芽率與CK 差異不顯著（P＞0.05），而90、100 ℃各處理與CK 差異顯著（P＜0.05），說(shuō)明干熱處理超過(guò)80 ℃，種子萌發(fā)率顯著（P＜0.05）降低，干熱處理上限溫度為80 ℃。這與高山睦雄等[15]試驗(yàn)結(jié)果趨勢(shì)一致，干熱處理溫度在70、80 ℃時(shí)不影響種子發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率。

在PDA 培養(yǎng)基中，70 ℃和80 ℃處理2、4、6、8、10、12 h 滅活率顯著（P＜0.05）高于CK，滅活率最高的為70 ℃處理4 h，為97.33%。在LB 培養(yǎng)基中70 ℃和80 ℃處理2、4、6、8、10 h 滅活率與CK 差異顯著（P＜0.05）。70 ℃處理4 h 滅活率最高，為96.67%，說(shuō)明在干熱處理中，殺死黃瓜種帶病原細(xì)菌且不顯著降低種子萌發(fā)力的最佳溫度與時(shí)間為70 ℃處理4 h。周賢達(dá)等[13]的試驗(yàn)結(jié)果是70 ℃處理12 h，可有效防治病害。本試驗(yàn)的結(jié)果是70 ℃處理4 h 為干熱處理最合適的溫度與時(shí)間，且干熱處理后不影響種子萌發(fā)，明顯降低了干熱處理時(shí)間。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，70 ℃處理4 h 黃瓜種子在PDA 培養(yǎng)基的真菌性種帶菌活力最低，滅活率達(dá)到了97.33%且顯著（P＜0.05）高于CK。在LB 培養(yǎng)基的細(xì)菌性種帶菌活力最低，滅活率達(dá)到了96.67%且顯著（P＜0.05）高于CK，且發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率比CK 顯著（P＜0.05）提高，說(shuō)明70 ℃處理4 h 效果最好。干熱處理可以有效防治真菌、細(xì)菌性種帶菌。