李春梅

欽州市第二人民醫(yī)院 廣西 欽州 535000

乙肝病毒是引起乙型肝炎的病原體，可造成肝實(shí)質(zhì)炎癥性損傷，并進(jìn)展為肝硬化、肝功能衰竭、肝細(xì)胞性肝癌等惡性肝臟疾病，對(duì)健康造成影響[1]。血清學(xué)指標(biāo)是乙肝病毒檢驗(yàn)常見(jiàn)方式，診斷價(jià)值較高，具有操作簡(jiǎn)單、診斷快速的優(yōu)點(diǎn)，但無(wú)法反映乙肝病毒在體內(nèi)復(fù)制情況[2]。乙肝病毒脫氧核糖核酸（HBV-DNA）可對(duì)血清中HBV-DNA復(fù)制情況進(jìn)行分析，從而區(qū)別不同時(shí)期的感染及診斷乙肝突變株。本文現(xiàn)針對(duì)院內(nèi)427例患者進(jìn)行研究，內(nèi)容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

自本院收治的乙肝病毒患者中抽取214例作為疾病組，另從院內(nèi)體檢中心進(jìn)行健康體檢的健康人員中抽取213例作為健康組，所有患者均于2021年8月-2021年10月期間在本院就診。疾病組納入患者男女比114：100，16歲～90歲，均值（53.26±6.43）歲；健康組納入患者男女比110:103，17歲～90歲，均值（53.54±6.36）歲。組間無(wú)差異，P＞0.05。

1.2 方法

兩組患者均進(jìn)行HBV-DNA及血清學(xué)指標(biāo)檢驗(yàn)，詳細(xì)步驟如下：

HBV-DNA檢驗(yàn)：于患者晨起空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血3～5ml，3000r/min離心五分鐘后分離出血清，如果沒(méi)有及時(shí)檢測(cè)可將血清放置于-20℃環(huán)境內(nèi)保存，保存期6個(gè)月，檢測(cè)時(shí)取出200uL血清與450uLDNA提取液混合，用振蕩器劇烈震蕩混勻15S，瞬時(shí)離心數(shù)秒。100℃恒溫處理10分鐘。離心速度為12000r/min，離心時(shí)間為5min，取出上清備用。分別取2uL處理后的樣品及標(biāo)準(zhǔn)品，加入PCR反應(yīng)管中進(jìn)行離心處理，離心速度為8000r/min，離心數(shù)秒后取出將其放入儀器樣品槽，相關(guān)反應(yīng)參數(shù)設(shè)置為93℃預(yù)變性2min，1個(gè)循環(huán)；93℃45秒→55℃ 60秒 10個(gè)循環(huán)，93℃30秒→55℃ 45秒 30個(gè)循環(huán)循環(huán)完成后如果在FAM檢測(cè)通道擴(kuò)增曲線無(wú)對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期或CT值等于30，在VIC檢測(cè)通道擴(kuò)增曲線有對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期，則判樣品的HBV-DNA濃度小于檢測(cè)靈敏度。如果在FAM檢測(cè)通道擴(kuò)增曲線有對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期且CT值小于30，則按以下方法判斷：若樣品的C<100，則該樣品的HBV-DNA濃度<100IU/mL:若樣品的100≦C≦5.00E+008，則該樣品的HBV-DNA濃度=C IU/mL:若樣品的C>5.00E+008,則該樣品的HBV-DNA濃度>5×108IU/mL。如果需要精確定量結(jié)果，可將樣品用陰性質(zhì)控品稀釋到線性范圍后再檢測(cè)。則該樣品的HBV-DNA濃度=（C×稀釋倍數(shù)）IU/mL。

血清學(xué)指標(biāo)檢驗(yàn)：于患者晨起空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血3～5ml，3000r/min離心五分鐘后分離出血清，如果沒(méi)有及時(shí)檢查將血清放置于-20℃環(huán)境內(nèi)保存，保存期為6個(gè)月，檢測(cè)時(shí)采用乙型肝炎血清標(biāo)志物ELISA定性試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，診斷標(biāo)準(zhǔn)如下：①HBsAg陽(yáng)性：≧0.2ng/ml，陰性：＜0.2ng/ml；②抗-HBs濃度陽(yáng)性：≧10mIU/ml，陰性：＜10mIU/ml；③E抗原陽(yáng)性：≧0.5PEIU/ml，陰性：＜0.5PEIU/ml；④核心抗體陽(yáng)性：≧0.45IU/ml，陰性：＜0.45IU/ml；⑤e抗體陽(yáng)性：≧0.2PEIU/ml，陰性：＜0.2PEIU/ml。

1.3 觀察指標(biāo)

比較組間HBV-DNA及血清學(xué)指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

疾病組相較于健康組HBV-DNA、HBsAg、抗-BHs濃度、e抗原、核心抗體、抗-HBe水平較高，P＜0.05，見(jiàn)表1。

表1 組間HBV-DNA及血清學(xué)指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果比較

3 討論

乙肝病毒可通過(guò)血液、母嬰、密切接觸等途徑進(jìn)行傳播，感染后可對(duì)患者肝臟造成損傷，從而誘發(fā)乙型肝炎，對(duì)患者機(jī)體健康造成影響，因此臨床需及時(shí)采取有效檢驗(yàn)方式進(jìn)行疾病診斷，便于臨床治療[3]。

血清標(biāo)志物檢驗(yàn)是臨床常見(jiàn)的乙肝病毒檢驗(yàn)方式，可準(zhǔn)確分辨出是否攜帶乙肝病毒，在臨床篩查中具有重要意義，但無(wú)法反映乙肝病毒在體內(nèi)的復(fù)制情況。HBV-DNA是乙肝病毒感染最直接、特異性強(qiáng)及靈敏性高的指標(biāo)，可直接、準(zhǔn)確地反映乙肝病毒復(fù)制情況[4]。本文經(jīng)過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，疾病組相較于健康組HBV-DNA及血清標(biāo)志物水平較高，P＜0.05。表明通過(guò)HBV-DNA與血清標(biāo)志物檢驗(yàn)可進(jìn)行乙肝病毒患者鑒別。當(dāng)機(jī)體內(nèi)感染乙肝病毒后，可對(duì)免疫功能造成影響，出現(xiàn)免疫功能低下的情況下，乙肝病毒可在體內(nèi)不斷復(fù)制，同時(shí)血液中HBeAg水平升高，出現(xiàn)免疫功能較高的情況時(shí)，乙肝病毒停止復(fù)制，血液中HBeAg水平降低，但e抗體升高，因此聯(lián)合應(yīng)用HBV-DNA與血清標(biāo)志物檢驗(yàn)，可使疾病診斷準(zhǔn)確率提高。

綜上所述，在乙肝病毒檢驗(yàn)中，可采用HBV-DNA聯(lián)合血清標(biāo)志物的方式進(jìn)行檢驗(yàn)，獲得較為準(zhǔn)確的檢驗(yàn)結(jié)果，及時(shí)進(jìn)行疾病診斷及治療。