夏穎，嚴(yán)菲，李耕，陳民輝（江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，南京 210019）

環(huán)硅酸鋯鈉散（sodium zirconium cyclosilicate powder，商品名：利倍卓）是一種口服懸浮劑，適應(yīng)證為成人高鉀血癥，2018年在美國(guó)批準(zhǔn)上市，2020年在我國(guó)上市，用于高鉀血癥患者的快速降鉀以及長(zhǎng)期維持治療。長(zhǎng)期應(yīng)用環(huán)硅酸鋯鈉散可獲得良好的治療效果，但臨床試驗(yàn)表明該藥物存在水腫的不良反應(yīng)，發(fā)生率約為8%～11%。該不良反應(yīng)發(fā)生可能的原因是每5 g 環(huán)硅酸鋯鈉中約含有400 mg 鈉，會(huì)引起身體鈉負(fù)荷增加，導(dǎo)致水鈉潴留，從而引起水腫。因此有必要對(duì)本品中的鈉含量進(jìn)行控制。

現(xiàn)行進(jìn)口藥品注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)（No.JX20190188）未對(duì)環(huán)硅酸鋯鈉散中的鈉含量進(jìn)行控制，目前也尚無(wú)關(guān)于本品中鈉的測(cè)定方法的報(bào)道。本研究首次建立環(huán)硅酸鋯鈉散中總鈉和游離鈉的含量測(cè)定方法，為產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供參考。

藥品中鈉含量測(cè)定常用的方法有原子吸收分光光度法和離子色譜法。環(huán)硅酸鋯鈉散的原料藥為微孔環(huán)硅酸鋯鈉，是一種不溶于水的無(wú)機(jī)物，化學(xué)式為NaHZrSiO·2 ～3HO，鈉在本品中大部分以結(jié)合態(tài)存在，因此選擇合適的前處理方式非常重要。如采用原子吸收分光光度法，常見(jiàn)的前處理方式為濕法消解、微波消解和堿熔消解等，對(duì)于無(wú)機(jī)晶體化合物，上述操作方法均存在步驟煩瑣的缺點(diǎn)。環(huán)硅酸鋯鈉散是通過(guò)氫和鈉選擇性地交換鉀離子，從而達(dá)到降低鉀離子的效果，本文采用高濃度的氯化鉀溶液通過(guò)振搖的方式將樣品中的鈉置換成鈉離子，并采用離子色譜法進(jìn)行測(cè)定，樣品前處理方法簡(jiǎn)單，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，適用于環(huán)硅酸鋯鈉散中總鈉和游離鈉的測(cè)定。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Dionex ICS-6000 型離子色譜儀（美國(guó)Thermo Fisher Scientific 公司）；XS205 型電子天平（瑞士Mettler Toledo 公司）；Milli-Q 超純水儀（Millipore公司）。

1.2 試藥

鈉單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心，1000 μg·mL，批號(hào)：204021-6）；氯化鈉純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，純度：100%，批號(hào)：17071）；環(huán)硅酸鋯鈉散（企業(yè)A，批號(hào)：MA3216B、MA3081B）；氯化鉀為分析純；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Dionex IonPac CS12A（4 mm×250 mm）；保護(hù)柱：DionexIonPac CG12A 柱（4 mm×50 mm）；CDRS600 型抑制器（4 mm）；檢測(cè)器：電導(dǎo)檢測(cè)器；淋洗液發(fā)生器：Dionex EGC 500 MSARFIC；淋洗液：20 mmol·L甲磺酸溶液；流速：1.0 mL·min；柱溫：30℃；抑制電流59 mA；分析時(shí)間：15 min；進(jìn)樣量：25 μL。

2.2 溶液制備

2.2.1 空白溶液 精密量取200 mmol·L氯化鉀溶液1 mL，置25 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為空白溶液。

2.2.2 對(duì)照品溶液 精密量取鈉單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000 μg·mL） 1 mL，置25 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.2.3 總鈉含量測(cè)定的供試品溶液 取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于總鈉40 mg），精密稱定，置具塞離心管中，精密加入200 mmol·L氯化鉀溶液40 mL，振搖至少2 h，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1 mL，置25 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為總鈉含量測(cè)定的供試品溶液（無(wú)特殊說(shuō)明，下文中提到的供試品溶液均指此溶液）。

2.2.4 游離鈉含量測(cè)定的供試品溶液 取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于總鈉4 mg），精密稱定，置100 mL 量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為游離鈉含量測(cè)定的供試品溶液。

2.3 方法學(xué)研究

2.3.1 專屬性試驗(yàn) 精密量取水及“2.2” 項(xiàng)下的空白溶液、對(duì)照品溶液和供試品溶液各25 μL 注入離子色譜儀，記錄色譜圖。典型色譜圖見(jiàn)圖1，其中鈉離子和鉀離子分離度為5.8。空白溶液均不干擾測(cè)定。

圖1 空白溶液（A）、對(duì)照品溶液（B）和供試品溶液（C）的HPLC 色譜圖Fig 1 HPLC chromatograms of blank solution（A），reference solution（B）and sample solution（C）

2.3.2 線性試驗(yàn) 分別精密量取鈉單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000 μg·mL），用水稀釋制得鈉離子質(zhì)量濃度約為8、20、32、40、48、60 和80 μg·mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。以鈉離子的質(zhì)量濃度（

C

）為橫坐標(biāo)，峰面積（

A

）為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸擬合，回歸方程為

A

＝0.2640

C

－0.0225（

r

＝1.000），鈉離子在8 ～80 μg·mL與峰面積線性關(guān)系良好。2.3.3 回收試驗(yàn) 取本品細(xì)粉適量（約相當(dāng)于總鈉16 mg、20 mg 和24 mg），精密稱定，置具塞離心管中，分別精密加入氯化鈉純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（約相當(dāng)于鈉16 mg、20 mg 和24 mg），混勻，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制成鈉離子含量分別約為32、40 和48 μg·mL的溶液，作為回收試驗(yàn)溶液。每個(gè)濃度平行制備3 份，進(jìn)樣分析，記錄色譜圖，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果在低、中、高水平的平均回收率（

n

＝3）分別為99.73%、100.30%和98.60%，

RSD

分別為0.80%、1.2%和0.40%，表明該方法準(zhǔn)確度高。2.3.4 精密度和重復(fù)性試驗(yàn) 精密量取“2.2.2”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6 次，結(jié)果鈉離子峰面積

RSD

為0.040%；表明方法進(jìn)樣精密度良好。精密量取“2.2”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液和供試品溶液（平行制備6 份），進(jìn)樣分析，結(jié)果6 份樣品中總鈉的含量的

RSD

（

n

＝6）為0.60%，方法重復(fù)性良好。由不同的分析人員在不同日期重復(fù)上述操作，計(jì)算得12 份樣品中總鈉的含量

RSD

（

n

＝12）為0.60%，表明該方法具有良好的中間精密度。2.3.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.2”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別于室溫放置0、2、4、8、12和24 h 注入離子色譜儀，進(jìn)樣分析，對(duì)照品和供試品溶液各時(shí)間點(diǎn)峰面積的

RSD

均為0.20%，表明在室溫條件下24 h 內(nèi)穩(wěn)定。2.3.6 靈敏度試驗(yàn) 取上述線性對(duì)照品溶液逐步稀釋，按“2.1”項(xiàng)下方法測(cè)定，以

S/N

≈10 為定量限，

S/N

≈3 為檢測(cè)限，結(jié)果鈉離子的定量限為0.04 μg·mL，檢測(cè)限為0.01 μg·mL。

2.3.7 樣品測(cè)定 取本品適量，按“2.2”項(xiàng)下方法分別制備用于總鈉測(cè)定和游離鈉測(cè)定的供試品溶液，進(jìn)樣分析，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同批次樣品中鈉含量測(cè)定結(jié)果
Tab 1 Determination of sodium in samples

批次規(guī)格/g總鈉含量/%游離鈉含量/%MA3216B107.90.1 MA3081B 57.80.1

3 討論

3.1 鉀離子濃度的選擇

環(huán)硅酸鋯鈉是一種結(jié)構(gòu)獨(dú)特的高選擇性鉀離子結(jié)合劑，作用機(jī)制為用氫和鈉交換鉀，本試驗(yàn)采用高濃度的鉀離子置換出樣品中的鈉，并對(duì)鈉的含量進(jìn)行測(cè)定，因此，前處理過(guò)程中保證鈉能被鉀完全置換出來(lái)是關(guān)鍵。試驗(yàn)中，比較了不同濃度的鉀離子溶液（濃度分別為5、10、50、100、150 和200 mmol·L）振搖處理3 h后鈉的測(cè)定結(jié)果，結(jié)果表明，隨著鉀離子濃度升高，所測(cè)得鈉含量升高，其中150 mmol·L和200 mmol·L鉀離子濃度測(cè)得的鈉含量無(wú)顯著差別，故認(rèn)為鈉已經(jīng)置換完全，最終選擇200 mmol·L鉀離子作為提取溶液。

3.2 振搖時(shí)間的確定

采用200 mmol·L鉀離子振搖提取，考察不同提取時(shí)間（0.5、1、1.5、2、2.5、3 h）對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，發(fā)現(xiàn)提取1.5 h 后，測(cè)得鈉含量無(wú)顯著增加，說(shuō)明在1.5 h 時(shí)已經(jīng)基本置換完全。最終確定振搖提取至少2 h，在縮短分析時(shí)間的基礎(chǔ)上保證鈉完全被置換出來(lái)。

4 小結(jié)

本文首次建立了環(huán)硅酸鋯鈉散中總鈉和游離鈉的含量測(cè)定方法，并對(duì)其進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證。該方法專屬、靈敏、準(zhǔn)確度高、重復(fù)性好，可為環(huán)硅酸鋯鈉散的質(zhì)量控制提供參考和依據(jù)。由于本品的鈉含量與不良反應(yīng)相關(guān)，因此建議生產(chǎn)廠家對(duì)鈉含量情況進(jìn)行考察，制訂合適的限度，并在穩(wěn)定性考察過(guò)程中關(guān)注游離態(tài)鈉的變化情況。