張穎，許霞青，何勐，張振中，張月麗，郭新紅

(1.鄭州大學附屬鄭州中心醫(yī)院藥學部，鄭州 450007；2.鄭州大學藥學院，鄭州 450001)

根據(jù)世界衛(wèi)生組織發(fā)布的全球癌癥報告[1]，惡性腫瘤仍是全世界疾病死亡的主要原因，嚴重威脅著人類的生命健康。化學治療(化療)、放射治療(放療)、靶向治療等仍是抗腫瘤的主要手段。但傳統(tǒng)治療方法尤其是細胞毒類的抗腫瘤藥物存在一定的不足，如易產(chǎn)生耐藥性、不良反應大、生物利用度低等缺點，限制了其臨床應用。因此，細胞毒類的抗腫瘤藥物在減少不良反應、提高生物利用度等方面仍需進一步開發(fā)和完善。

光動力療法又名光化學療法(photodynamic therapy，PDT)[2]，即光敏劑在特定波長的光照下，吸收光子能量躍遷至激發(fā)態(tài)，后與氧分子發(fā)生作用產(chǎn)生具有強細胞毒性的活性氧(reactive oxygen species，ROS)，ROS通過氧化應激對細胞產(chǎn)生不可逆的損傷，從而誘導細胞凋亡、自噬和壞死。PDT優(yōu)勢在于治療過程微創(chuàng)性、可控制光照部位、耐藥性低等，已被美國食品藥品管理局(FDA)批準用于局部腫瘤的治療[2]。其中富勒烯(C60)[3]是一種新興光敏劑，在醫(yī)藥學領域表現(xiàn)出了非常廣闊的應用前景，有研究已表明水溶性C60能夠在光照下產(chǎn)生ROS殺死癌細胞，從而達到抗腫瘤的效果[4]。而富勒烯-苯丙氨酸(C60-Phe)衍生物具有較好的水溶性和生物相容性，因此可利用C60-Phe衍生物作為腫瘤治療的光敏劑。

多西他賽(docetaxel，DTX)又名多烯紫杉醇，是一種高效的抗腫瘤藥物，已經(jīng)廣泛應用于卵巢癌、乳腺癌、非小細胞肺癌等疾病的治療[5]。但由于多西他賽為脂溶性化合物，目前臨床上多采用表面活性劑聚山梨酯-80和乙醇增溶，易導致患者發(fā)生變態(tài)反應，化療前后需要口服大量糖皮質(zhì)激素進行預防[6]。因此，改進DTX的劑型，提高藥物溶解性，對減少變態(tài)反應的發(fā)生具有重要的意義。

納米結構脂質(zhì)載體(nanostructured lipid carriers，NLC)[7]不僅能增加難溶性藥物的吸收，提高載藥能力，而且生物穩(wěn)定性好，能延長藥物的體內(nèi)循環(huán)時間，緩釋效果顯著。本研究選用納米結構脂質(zhì)載體，同時包載脂溶性的DTX和水溶性的C60-Phe，提高藥物的溶解度，實現(xiàn)了光敏劑和化療藥聯(lián)合應用，為增加抗腫瘤效應，提供了新的藥物模型。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器 Nano-ZS90型激光納米粒度分析儀(英國馬爾文公司)；NICOLET型紅外光譜儀(美國Fisher公司)；TGL-16C型離心機(上海安亭科學儀器廠)；Ultimate3000高效液相色譜儀(美國Thermo公司)；JY92-Ⅱ型超聲波細胞粉碎機(寧波新芝生物科技有限公司)；醫(yī)用凈化工作臺(蘇州市馮氏實驗動物設備有限公司)；ZD-85 型雙功能氣浴恒溫振蕩器(江蘇省金壇市分析儀器有限公司)；Synergy HI酶標儀(美國Biotek公司)；DSC-60A 型差示掃描量熱儀(日本島津公司)。

1.1.2試藥與細胞 富勒烯(C60，濮陽市永新富勒烯科技有限公司，批號：20121009，含量>95%)；L-苯丙氨酸(天津市光復精細化工研究所)；多西他賽(DTX，含量>99%，北京怡禾生物工程有限公司，批號：120826)；單硬脂酸甘油酯(中國醫(yī)藥上?；瘜W試劑公司)；泊洛沙姆188(德國BASF公司)；注射用大豆磷脂(上海太偉藥業(yè)有限公司，批號：202007022)；pH值7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS)(鄭州創(chuàng)生生物工程有限公司，批號：69042800)；磺基羅丹明B(SRB)(美國Sigma公司)；RPMI 1640培養(yǎng)基(北京索萊寶科技有限公司，貨號：31800)；人乳腺癌細胞MCF-7(中國科學院細胞庫)；其余試劑均為市售分析純。

1.2方法

1.2.1C60-Phe衍生物的制備 精密稱取C60粉末50.00 mg，溶于甲苯中，另取苯丙氨酸和氫氧化鈉(NaOH)，溶于水中，后溶于適量的無水乙醇，后在磁力攪拌下將C60甲苯溶液滴入其中，繼續(xù)攪拌5～6 d，直到上層溶液紫色消失，下層呈黑褐色，分液去除上層的有機層，下層旋蒸除去有機溶劑，得到黏稠狀物質(zhì)，加入過量的無水乙醇純化，抽濾得到產(chǎn)物，反復洗滌3次，將終產(chǎn)物用適量的水溶解后，凍干得到產(chǎn)物粉末，即C60-Phe產(chǎn)物，進行紅外光譜驗證。合成過程見圖1。

圖1 C60-Phe合成過程Fig.1 Synthesis process of C60-Phe

1.2.2C60-Phe-DTX納米結構脂質(zhì)載體的制備 依據(jù)文獻及預實驗結果確定的最優(yōu)處方，采用高溫乳化-低溫固化[8]的方法進行制備納米結構脂質(zhì)載體，取DTX 8.00 mg，單硬脂酸甘油脂300.00 mg，油酸 60.00 mg，大豆磷脂150.00 mg，溶于乙醇和丙酮(1：1，V/V)中，50 ℃恒溫水浴上攪拌使其溶解作為有機相；另取C60-Phe衍生物，溶于濃度為10 mg·mL-1的泊洛沙姆188溶液，作為水相；在50 ℃恒溫水浴上將有機相逐滴滴入水相中，繼續(xù)恒溫攪拌5 h，后快速放置冰浴中，繼續(xù)攪拌1 h進行固化，超聲(200 W)處理3 min，所得液經(jīng)孔徑0.45 μm的濾膜濾過，即得C60-Phe-DTX-NLC混懸液，同法制備空白納米結構脂質(zhì)載體、DTX納米結構脂質(zhì)載體、C60-Phe納米結構脂質(zhì)載體。

1.2.3C60-Phe-DTX-NLC的形態(tài)、粒徑和電位考察 采用N納米粒度分布儀測定C60-Phe-DTX-NLC的粒徑和Zeta電位，同時通過透射電鏡(transmission electron microscope，TEM)觀察載藥納米結構脂質(zhì)載體的外觀形態(tài)。

1.2.4差示掃描量熱(DSC)分析 分別取空白NLC、DTX及C60-Phe-DTX-NLC適量，采用DSC-60A型差示掃描量熱儀測定，置于小鋁盤中，并以空白小鋁盤為空白對照，升溫速率10 ℃·min-1，在30～200 ℃溫度范圍內(nèi)，分別測定以上各樣品DSC曲線[9]，以考察NLC中原料藥DTX及脂質(zhì)材料的晶形存在狀態(tài)。

1.2.5C60-Phe-DTX-NLC包封率和載藥量的考察

①色譜條件。色譜柱為Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流動相為甲醇-水(75：25，V/V)；柱溫為30 ℃；流速為1 mL·min-1；檢測波長為229 nm；進樣量10 μL。C60-Phe的紫外色譜條件，檢測波長為380 nm，檢測溫度為室溫。

②超濾法加樣回收率觀察。精密制備小、中、大(5.1，51.0，102.0 μg·mL-1)3個濃度的C60-Phe PBS溶液及DTX甲醇溶液，分別量取不同藥物濃度溶液0.1 mL與0.2 mL空白納米脂質(zhì)載體混勻，加入到超濾管中，在轉速為4000 r·min-1(r=6 cm)的條件下，離心30 min，取濾液，分別進行紫外吸收檢測C60-Phe的量，HPLC測DTX量，按以下公式計算回收率?；厥章?%)=W測/W加×100。

③包封率載藥量的考察。超濾法[10]測定包封率，精密稱取C60-Phe-DTX-NLC混懸液0.5 mL置于超濾管中，在離心力18 080×g，轉速為4000 r·min-1(r=6 cm)的條件下，離心30 min，取濾液，分別進行紫外吸收檢測C60-Phe的游離量，HPLC測DTX游離量；另取NLC 0.1 mL用甲醇破乳至3 mL，渦旋2 min，取該破乳液適量10 000 r·min-1(r=6 cm)離心10 min，取上清液測制劑中DTX和C60-Phe總藥量。按以下公式計算包封率和載藥量：

包封率(%)=(W總-W游)/W總×100，載藥量(mg·mL-1)=理論載藥量(mg·mL-1)×包封率。

④脂質(zhì)材料濃度對包封率的影響。以粒徑和DTX包封率為評價指標，考察脂質(zhì)材料濃度(1.5%，2%，3%，4%，5%)對制劑的影響。

1.2.6C60-Phe-DTX-NLC穩(wěn)定性考察 將 C60-Phe-DTX-NLC分別放置于4 ℃及25 ℃條件下，分別于0，7，14，21和28 d取出，以外觀形態(tài)、包封率、平均粒徑為評價指標，考察C60-Phe-DTX-NLC 4 ℃、室溫下放置的穩(wěn)定性。

1.2.7C60-Phe-DTX-NLC體外釋放度的測定 動態(tài)透析袋法[10]測定體外釋放度，精密量取C60-Phe-DTX-NLC 0.5 mL和DTX溶液置于透析袋中，密封兩端，放于30 mL含0.5%聚山梨酯80 pH值7.4 PBS溶液釋放介質(zhì)中，然后放置于37 ℃，速度75 r·min-1恒溫氣浴振蕩器中。在設定的時間點取樣5 mL，同時補充同溫等體積的釋放介質(zhì)。取出的濾液采用HPLC測定DTX濃度。并且計算每個取樣點的藥物累積釋放百分率。

1.2.8體外抗腫瘤評價

①SRB法檢測光敏劑C60-Phe對MCF-7細胞增殖抑制作用。取生長狀態(tài)良好的對數(shù)期的MCF-7細胞，胰酶消化后，按每孔5×103個細胞數(shù)種96孔板，每孔100 μL。培養(yǎng)24 h以后，棄去舊的培養(yǎng)液，實驗組分別加入含有不同質(zhì)量濃度C60-Phe(0.25，0.5，1.00，2.00，3.00，4.00 μg·mL-1)的C60-Phe避光組，C60-Phe光照組，其中光照組采用532 nm(2.0 A)[11]激光照射3 min，同時設置空白細胞對照組，繼續(xù)培養(yǎng)48 h，后每孔需要加入50 μL預冷的10%的三氯乙酸溶液，移入4 ℃冰箱中，放置1 h。棄去含有三氯乙酸溶液的培養(yǎng)基，超純水洗滌5次，完全干燥后，在避光條件下每孔加入50 μL配制好的4% SRB[12]乙酸溶液，避光染色后，用1%乙酸溶液洗滌5遍，除去未結合的SRB，干燥后加入濃度為10 mmoL·L-1的Tris堿溶液，充分振蕩搖勻后，在565和690 nm處酶標儀測定每孔的吸光度(A值)。按以下公式計算細胞生長抑制率，繪制生長曲線。同時考察C60-Phe光照1，3，5，10 min對細胞增殖抑制作用。抑制率(%)=[1-(A實驗組-A空白組)/(A對照組-A空白組)]×100。

②SRB法檢測C60-Phe-DTX-NLC對MCF-7細胞增殖抑制作用。同“2.8.1”項方法，實驗組分別加入含有不同質(zhì)量濃度DTX(0.001，0.005，0.010，0.050，0.100 μg·mL-1)的DTX-LP，C60-Phe-DTX-NLC避光組，C60-Phe-DTX-NLC光照組[采用532 nm(2.0 A)激光照射3 min]，同時設置空白NLC組，計算細胞生長抑制率。同時考察了C60-Phe-DTX-NLC與細胞孵育不同的時間后(給藥后6，12，24 h)光照對MCF-7細胞增殖抑制作用。

2 結果

2.1C60-Phe的紅外表征 采用傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)[13]檢測C60-Phe合成情況，結果見圖2，在3430 cm-1處出現(xiàn)了強的吸收峰，為N-H的伸縮振動；1712 cm-1為C=O伸縮振動，1603 cm-1，1443 cm-1為苯環(huán)上的C=C伸縮振動；1125 cm-1為N-C60伸縮振動；668 cm-1和617 cm-1為C60的特征吸收。通過反應可推斷C60-Phe合成成功。

圖2 C60-Phe紅外光圖譜Fig.2 FT-IR spectra of C60-Phe

2.2C60-Phe-DTX-NLC形態(tài)觀察、粒徑分布和Zeta電位測定 C60-Phe-DTX-NLC的粒徑呈正態(tài)分布，結果見圖3，平均粒徑為(136.17±3.22) nm，粒徑分布指數(shù)PDI為(0.19±0.027)，Zeta電位為(-23.34±2.43) mV，TEM結果(見圖4)顯示，C60-Phe-DTX-NLC呈類球形，粒徑分布均勻，與激光納米粒度分布儀測定測粒徑大小相符，符合納米制劑的要求。

圖3 C60-Phe-DTX-NLC的粒徑圖和Zeta電位圖Fig.3 Particle size and Zeta potential of C60-Phe-DTX-NLC

圖4 C60-Phe-DTX-NLC納米粒的透射電鏡照片F(xiàn)ig.4 TEM images of C60-Phe-DTX-NLC

2.3差示掃描量熱(DSC)分析 DSC圖中(圖5)，與物理混合和空白NLC相比，載藥NLC中DTX的結晶峰基本消失，說明DTX與制劑輔料不是簡單的物理混合，而是以上物質(zhì)發(fā)生了相互作用，多西他賽不是以結晶態(tài)存在，而是以無定形態(tài)存在于制劑中[14]。

圖5 納米結構脂質(zhì)體差式掃描量熱(DSC)分析圖 Fig.5 DSC curves of NLC

2.4超濾法加樣回收率結果 超濾法是通過物理截留方法分離制劑中的游離藥物，但是超濾管對藥物有一定的吸附作用，因此本實驗考察了超濾法加樣的回收率，C60-Phe超濾離心法的平均回收率可達95.59%，RSD 0.23%；DTX超濾離心法的平均回收率可達95.79%，RSD 0.45%，具體結果見表1和表2?？煽闯鲈摲椒ǖ钠骄厥章瘦^高，RSD較小，載藥納米脂質(zhì)載體包封率的測定可采用超濾法。

表1 C60-Phe超濾法加樣回收率實驗結果Tab.1 Recovery test results of C60-Phe

表2 DTX超濾法加樣回收率實驗結果Tab.2 Recovery test results of DTX

2.5C60-Phe-DTX-NLC的包封率和載藥量 經(jīng)HPLC測得DTX的平均包封率為(85.17±2.21)%，平均載藥量為(1.75±0.05) mg·mL-1，經(jīng)UV測得的C60-Phe的包封率為(93.81±1.06)%，C60-Phe的包封率較高，可看出C60-Phe大部分存在納米脂質(zhì)載體中，二者包封率都較高，均符合《中華人民共和國藥典》2020年版規(guī)定。

同時以粒徑和DTX包封率為評價指標，考察脂質(zhì)材料濃度對制劑的影響，由表3可看出DTX的包封率，隨著脂質(zhì)濃度的增加也逐漸增大，但是當脂質(zhì)的濃度達到一定比例時，脂質(zhì)的濃度就會達到飽和，如果在增加脂質(zhì)的濃度，就會出現(xiàn)膠凝現(xiàn)象。因此脂質(zhì)濃度選擇3%，包封率達86.23%，載藥量達1.77 mg·mL-1。

表3 不同濃度脂質(zhì)對制劑的影響 Tab.3 Effect of lipid concentration on preparations

2.6C60-Phe-DTX-NLC穩(wěn)定性考察 其穩(wěn)定性結果見表4，C60-Phe-DTX-NLC混懸液在室溫條件下短期放置時，有較好的放置穩(wěn)定性，但隨著放置時間的延長，出現(xiàn)了大量碎片沉淀，穩(wěn)定性逐漸變差，而制劑在4 ℃條件下放置28 d，僅出現(xiàn)少量的碎片沉淀，放置穩(wěn)定性較好，因此適合4 ℃條件保存。

表4 C60-Phe-DTX-NLC的放置穩(wěn)定性考察 Tab.4 Stablity of C60-Phe-DTX-NLC

2.7C60-Phe-DTX-NLC體外釋放度的測定 體外釋放曲線顯示(圖6)，具體各時間點累計釋放量見表5，由結果可看出DTX溶液在4 h釋放超過88%，且在之后基本釋放完全，釋放曲線趨于平緩。載藥納米結構脂質(zhì)體在60 h內(nèi)DTX的釋放量為72.03%，與DTX溶液相比，釋放速率明顯降低，納米結構脂質(zhì)體能夠顯著延長藥物的釋放，起到緩釋的作用。

圖6 NLC中DTX的體外釋藥曲線(n=3)Fig.6 In-vitro release profiles of DTX from NLC (n=3)

表5 不同時間點的累計釋放量 Tab.5 Cumulative release at different time points

2.8體外抗腫瘤評價

2.8.1光敏劑C60-Phe對MCF-7細胞增殖抑制作用 不同濃度的C60-Phe在避光和光照兩種條件下對MCF-7細胞的生長抑制曲線如圖7所示，結果發(fā)現(xiàn)C60-Phe在黑暗避光的情況下對MCF-7細胞幾乎沒有抑制作用；而在使用532 nm激光(2.0 A)照射3 min后，MCF-7細胞的存活率明顯降低，與避光組比較差異有統(tǒng)計學意義，且C60-Phe對MCF-7細胞的光敏性作用隨著其濃度的增大而顯著增強，為C60-Phe做為光動力療法的光敏劑提供了支持。

①與避光組比較，t=3.17，P<0.01；②與避光組比較，t=13.04～25.51，P<0.001。圖7 C60-Phe光照對MCF-7細胞的作用(n=3)①Compared with dark group，t=3.17，P<0.01；②compared with dark group，t=13.04-25.51，P<0.001.Fig.7 Cytotoxicity and photocytotoxicity of C60-Phe onMCF-7 cell(n=3)

2.8.2光照時間不同C60-Phe對MCF-7細胞增殖抑制作用 光照時間不同C60-Phe對MCF-7細胞的生長抑制曲線如圖8所示，光照1，3，5，10 min與避光組比較差異均具有統(tǒng)計學意義，1～3 min時隨著光照的時間增長，抑制率明顯增加，且差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，當光照時間達到5 min，與3 min相比抑制率雖有少許增加，但差異無統(tǒng)計學意義?？紤]光照時間及對細胞狀態(tài)的影響，因此最佳光照時間選擇532 nm(2.0 A)激光照射3 min。

①與光照1 min比較，t=0.08～7.70，P<0.01；②與光照1 min比較，t=9.50，P<0.001。圖8 光照不同時間對細胞的增殖抑制作用(n=3)①Compared with illuminate 1 min group，t=0.08-7.70，P<0.01；②compared with illuminate 1 min group，t=9.50，P<0.001.Fig.8 The results of different illumination time on cytotoxicity on the cells(n=3)

2.8.3C60-Phe-DTX-NLC對MCF-7細胞增殖抑制作用 C60-Phe-DTX-NLC對MCF-7細胞增殖抑制作用如圖9所示，空白NLC對MCF-7細胞基本無抑制作用，DTX-NLC與C60-Phe-DTX-NLC避光組對MCF-7細胞抑制作用相近，抑制率分別為(60.93±1.20)%和(62.08±1.90)%，這也說明C60-Phe在避光的情況下對細胞沒有抑制作用。與DTX-NLC和避光組相比，C60-Phe-DTX-NLC光照組的細胞抑制作用明顯增加，抑制率為(77.88±1.36)%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，這表明使用光敏劑聯(lián)合化療藥，可增加對腫瘤細胞增殖的抑制作用，出現(xiàn)了明顯的協(xié)同增強作用。

①與DTX-NLC組比較，t=5.42～8.46，P<0.01；②與DTX-NLC組比較，t=9.12～16.83，P<0.001。圖9 C60-Phe-DTX-NLC光照對MCF-7細胞的增殖抑制作用(n=3)①Compared with DTX-NLC group，t=5.42-8.46，P<0.01；②compared with DTX-NLC group，t=9.12-16.83，P<0.001.Fig.9 Cell inhibition rate on MCF-7 cells after exposure to C60-Phe-DTX-NLC with illumination(n=3)

2.8.4C60-Phe-DTX-NLC孵育時間不同對MCF-7細胞增殖抑制作用 由細胞抑制結果(圖10)可知，孵育不同時間進行光照分別對MCF-7細胞表現(xiàn)出不同的抑制率，給藥后6 h進行光照的抑制程度較大，在DTX濃度為0.005～0.05 μg·mL-1時，孵育6 h進行光照比孵育12，24 h進行光照的細胞抑制率明顯增加，存在顯著性差異，因此可選擇給藥后6 h進行光照達到更好的抑制效果。

①與孵育6 h后光照組比較，t=0.89～4.457，P<0.05；②孵育6 h后光照組比較，t=4.83～7.38， P<0.01；③與孵育6 h后光照組比較，t=9.384，P<0.001。圖10 給藥后不同時間進行光照對細胞的增殖抑制作用(n=3)①Compared with lighting after 6 h incubation group，t=0.89-4.457，P<0.05；②compared with lighting after 6 h incubation group，t=4.83-7.38，P<0.01；③compared with lighting after 6 h incubation group，t=9.384，P<0.001.Fig.10 The results of irradiation at different times after administration on cytotoxicity at 48 h(n=3)

3 討論

光動力學療法是一種無創(chuàng)、高選擇性的治療方法，已廣泛用于皮膚癌和食管癌等腫瘤治療，但是由于大部分光敏劑溶解度較低，而且缺乏靶向性，且有光毒性，大大限制了光動力學療法的應用，改善光敏劑的溶解度，探索其給藥系統(tǒng)也是光敏劑的研究熱點。如光敏劑富勒烯因其疏水性限制了其應用，可通過化學修飾顯著提高其溶解度和生物相容性[15]。本研究通過化學反應合成C60-Phe，通過紅外表征其合成成功，水溶性較好，可作為光敏劑進一步研究其抗腫瘤作用。已有研究C60-Phe[13]作為光敏劑經(jīng)光照后作用于人體肝臟癌癥細胞，誘導腫瘤細胞凋亡。

DTX是在合成紫杉醇的過程中發(fā)現(xiàn)的中間產(chǎn)物，可通過促進微管聚合和穩(wěn)定已聚合微管而達到抗腫瘤效果，由于其脂溶性，在水中幾乎不溶解，目前上市的產(chǎn)品中應用聚山梨酯80增溶，但在Ⅰ期臨床試驗中仍有嚴重超敏反應出現(xiàn)，因此仍需致力于其新劑型的研究。

納米給藥系統(tǒng)的優(yōu)點眾多[10]，如可提高藥物的溶解度，也可同時遞送多個藥物，并且能夠?qū)崿F(xiàn)腫瘤靶向，因此成為近年來藥物遞送領域研究的熱點。有研究顯示采用納米給藥系統(tǒng)遞送光敏劑[16]，在減少光毒性的同時可被動或主動靶向到目標細胞，有效增強其ROS產(chǎn)生的能力，增強光動力學抗腫瘤效果。

本研究在前期實驗篩選基礎上，選用單硬脂酸甘油脂，油酸和大豆磷脂為主要處方材料，通過高溫乳化-低溫固化制備C60-Phe-DTX-NLC，其粒徑分布均勻，外形均一為類球形，具有較高的包封率和載藥量，并適合4 ℃條件保存，體外釋放結果顯示NLC能夠顯著延長藥物的釋放，起到緩釋的作用。細胞毒性結果也發(fā)現(xiàn)C60-Phe在光照后細胞抑制作用明顯高于黑暗組，且光照3 min效果最佳；與DTX-NLC和C60-Phe-DTX-NLC避光組比較，C60-Phe-DTX-NLC光照組的細胞抑制作用明顯增加，體外抗腫瘤實驗結果表明，制劑C60-Phe-DTX-NLC中由C60-Phe介導的光動力學療法和抗腫瘤藥物DTX的化學療法在給藥系統(tǒng)納米結構脂質(zhì)載體中表現(xiàn)出協(xié)同增強的抗腫瘤效果，比單一療法具有更好的抗腫瘤效果，避免單一治療方法引起的腫瘤細胞的耐藥性，提高抗腫瘤效率。目前本研究只考察了體外抗腫瘤作用，抗腫瘤機制、動物體內(nèi)抗腫瘤作用、體內(nèi)安全性等還需要進一步驗證，以期為其用于臨床研究提供理論基礎。