韓 琳，張明月,2，孫 穎,2

1 解放軍總醫(yī)院第五醫(yī)學(xué)中心 肝病醫(yī)學(xué)部肝病科，北京 100039； 2 解放軍醫(yī)學(xué)院 研究生院，北京 100039

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)在歐美國家發(fā)病率較高[1]，隨著對(duì)其認(rèn)識(shí)不斷深入和自身抗體檢測(cè)及肝穿刺活檢廣泛開展，我國AIH檢出率亦呈現(xiàn)逐年升高的趨勢(shì)。

AIH的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，免疫耐受失衡在自身免疫性肝病的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用[2]。通過糖皮質(zhì)激素抑制機(jī)體免疫功能是目前AIH治療的主要策略，但是長期使用可引起一系列不良反應(yīng)，從而限制了其在AIH治療中的廣泛應(yīng)用。調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)參與AIH的發(fā)生、發(fā)展過程[3]，T淋巴細(xì)胞免疫球蛋白和免疫受體酪氨酸抑制基序(immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif,ITIM)結(jié)構(gòu)域(T cell immunoglobulin and ITIM domain,TIGIT)是Treg發(fā)揮免疫抑制功能的重要分子，TIGIT+Treg能夠選擇性抑制輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)1和Th17的促炎反應(yīng)。本文旨在介紹TIGIT+Treg對(duì)AIH的免疫調(diào)控機(jī)制，為獲得無糖皮質(zhì)激素的治療優(yōu)化方案提供思路。

1 Treg在AIH免疫機(jī)制中的作用

目前認(rèn)為AIH的發(fā)生主要是基于T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷、免疫細(xì)胞調(diào)節(jié)失衡以及免疫耐受缺失使機(jī)體對(duì)外來抗原的免疫應(yīng)答缺陷3個(gè)方面。發(fā)揮促炎作用的Th17和抗炎作用的Treg在維持免疫穩(wěn)態(tài)和預(yù)防自身免疫性疾病中發(fā)揮著重要作用[4]，二者的失衡是AIH發(fā)病的免疫學(xué)基礎(chǔ)之一。肝臟微環(huán)境中各種免疫細(xì)胞和非免疫細(xì)胞形成相互作用的網(wǎng)絡(luò)，Treg分泌的免疫抑制性細(xì)胞因子能夠抑制效應(yīng)性細(xì)胞的增殖和功能，當(dāng)Treg數(shù)量減少或功能缺陷時(shí)[4]，調(diào)節(jié)性細(xì)胞因子的分泌減少，對(duì)其他細(xì)胞的抑制作用也同時(shí)減弱，引起機(jī)體免疫耐受失衡，產(chǎn)生針對(duì)肝臟抗原成分的異常免疫攻擊，導(dǎo)致肝內(nèi)進(jìn)行性的炎癥、壞死及纖維化而誘發(fā)AIH[5]。Treg的缺陷影響肝臟炎癥的嚴(yán)重程度[4]，Th17和Treg之間的失衡與AIH的免疫損傷密切相關(guān)[6]。促進(jìn)Treg數(shù)量及功能的恢復(fù)有助于AIH免疫耐受的重建，這為AIH的臨床治療提供了重要線索。

2 Treg的調(diào)控

2.1 TIGIT及其功能 作為共抑制信號(hào)分子的TIGIT是免疫球蛋白超家族成員之一，在固有免疫和適應(yīng)性免疫中均發(fā)揮重要的抑制作用。TIGIT主要表達(dá)于Treg，還可表達(dá)在活化性、記憶性T淋巴細(xì)胞亞群和自然殺傷(NK)細(xì)胞上[7]。程序性細(xì)胞死亡蛋白1(programmed death-1,PD-1)與TIGIT的表達(dá)模式高度一致，70%以上TIGIT陽性細(xì)胞表達(dá)PD-1，90%以上PD-1陽性細(xì)胞TIGIT陽性。TIGIT的配體CD155、CD112主要表達(dá)于單核細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和多種非造血組織[5]。TIGIT能夠與共刺激分子CD226競爭性結(jié)合配體CD155或CD112，從而抑制T淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞活化。當(dāng)TIGIT在Treg上表達(dá)時(shí)，可增強(qiáng)Treg抑制免疫細(xì)胞的活性。

2.2 TIGIT信號(hào)通路對(duì)Treg的調(diào)控作用 在健康人群體內(nèi)78.1%的Treg可表達(dá)TIGIT，占CD4+TIGIT+T淋巴細(xì)胞總數(shù)的26.9%[8]。TIGIT+Treg比TIGIT-Treg具有更強(qiáng)的抑制能力，能夠選擇性抑制具有促炎作用的Th1和Th17的免疫反應(yīng)。在Treg中，TIGIT可通過直接誘導(dǎo)抑制性介質(zhì)的產(chǎn)生和間接增強(qiáng)Treg的抑制功能來發(fā)揮免疫抑制作用，維持抑制功能的穩(wěn)定性。TIGIT主要通過3種不同途徑選擇性抑制Th1和Th17自身反應(yīng)性T淋巴細(xì)胞應(yīng)答[9]。(1)直接抑制：TIGIT與TIGIT受體(poliovirus receptor,PVR，即CD155)結(jié)合后，通過其細(xì)胞內(nèi)尾部的ITIM和/或免疫球蛋白尾部酪氨酸基序發(fā)出信號(hào)，直接抑制T淋巴細(xì)胞活化和增殖。(2)間接抑制：TIGIT在效應(yīng)性T淋巴細(xì)胞(T effector cell，Teff)和Treg表達(dá)后能夠吸引抗原呈遞細(xì)胞，并與其表面的PVR結(jié)合，結(jié)合后可誘導(dǎo)抗原呈遞細(xì)胞分泌IL-10，進(jìn)而抑制抗原呈遞、減少共刺激分子表達(dá)，降低促炎細(xì)胞因子分泌，并進(jìn)一步促進(jìn)IL-10分泌。(3)TIGIT能夠以高親和力與PVR結(jié)合，同時(shí)破壞CD226的同型二聚化，進(jìn)而抑制CD226信號(hào)傳導(dǎo)。

3 TIGIT在自身免疫性疾病發(fā)生、發(fā)展及治療中的作用

TIGIT+Treg參與了多種自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制。在具有腎損傷表現(xiàn)的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者中，TIGIT+T淋巴細(xì)胞頻率顯著下降[10]。在自身免疫性腎小球腎炎患者中，TIGIT可通過增強(qiáng)Treg功能和促進(jìn)IL-10的分泌發(fā)揮免疫抑制功能，從而減輕腎小球腎炎的自身免疫反應(yīng)。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中，疾病活動(dòng)與CD4+T淋巴細(xì)胞的TIGIT表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，患者關(guān)節(jié)液中TIGIT+CD4+T淋巴細(xì)胞頻率在疾病活動(dòng)期顯著低于非活動(dòng)期，且活動(dòng)期患者關(guān)節(jié)液中CD4+T淋巴細(xì)胞上TIGIT的表達(dá)明顯下調(diào)，當(dāng)誘導(dǎo)TIGIT表達(dá)后，CD4+T淋巴細(xì)胞的增殖則顯著被抑制，同時(shí)IFNγ及IL-17分泌下降，IL-10的分泌增加，從而發(fā)揮抑制外周血T淋巴細(xì)胞的作用。在小鼠狼瘡模型的研究[11]中發(fā)現(xiàn)，重組TIGIT-Ig能夠有效地預(yù)防和治療小鼠狼瘡，經(jīng)TIGIT-Ig處理的狼瘡小鼠，其出現(xiàn)蛋白尿的時(shí)間延遲，存活率顯著增加。在原發(fā)性膽汁性膽管炎(primary biliary cholangitis,PBC)患者中，TIGIT+CD8+T淋巴細(xì)胞頻率與肝功能指標(biāo)中的TBil、DBil、TBA、GGT、ALP呈負(fù)相關(guān)，與血小板水平呈正相關(guān)，當(dāng)TIGIT呈高表達(dá)時(shí)，可抑制CD226信號(hào)傳導(dǎo)，從而降低CD226+CD8+T淋巴細(xì)胞亞群活性，緩解疾病的活動(dòng)狀態(tài)[12]。與TIGIT+Treg的抑制作用相反，當(dāng)TIGIT在外周血濾泡輔助性T(follicular helper T,Tfh)淋巴細(xì)胞表達(dá)時(shí)，則能夠輔助B淋巴細(xì)胞調(diào)控抗體的產(chǎn)生。Akiyama等[13]研究發(fā)現(xiàn)IgG4相關(guān)性疾病(IgG4 related disease,IgG4-RD)患者外周血TIGIT+Tfh細(xì)胞較TIGIT-Tfh細(xì)胞能夠表達(dá)更多的IL-21，在B淋巴細(xì)胞分化和細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的活化中均發(fā)揮著重要作用，TIGIT+Tfh與IgG4-RD活動(dòng)性呈正相關(guān)，但是經(jīng)過糖皮質(zhì)激素治療后，外周血TIGIT+Tfh細(xì)胞頻率呈現(xiàn)顯著下降。作為共抑制信號(hào)分子，TIGIT在上述自身免疫性疾病發(fā)生、發(fā)展及治療中的作用表明，該分子在治療自身免疫性疾病方面具有很大的潛力，靶向TIGIT抑制異常免疫反應(yīng)有望成為一個(gè)新的治療方法。

4 TIGIT+Treg在AIH治療中的應(yīng)用前景

4.1 TIGIT單抗的腫瘤免疫治療對(duì)AIH治療的啟示 自身免疫性疾病是腫瘤的一種鏡像，它們的作用雖相反，但分子機(jī)制卻相似。免疫反應(yīng)是受抗原呈遞細(xì)胞和Teff之間傳遞的免疫刺激信號(hào)及免疫抑制信號(hào)的協(xié)同作用所調(diào)節(jié)，腫瘤細(xì)胞主要利用觸發(fā)Teff抑制通路的受體或配體，如TIGIT、程序性死亡配體1、PD-1、細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4、CD155，使這種相互作用更趨于免疫抑制，而自身免疫性疾病則趨于免疫活化。在不同小鼠模型中，基因敲除或使用抗體阻斷T淋巴細(xì)胞表面的TIGIT，能夠增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞的抗腫瘤活性[14]。TIGIT在肝癌患者CD4+T淋巴細(xì)胞和Treg上呈高表達(dá)，其表達(dá)水平與腫瘤分化程度呈負(fù)相關(guān)，與甲胎蛋白水平及疾病進(jìn)展和不良預(yù)后呈正相關(guān)。在肝癌的發(fā)病過程中，PD-1+TIGIT+T淋巴細(xì)胞群的增殖速度加快，而肝癌的惡性程度與該細(xì)胞頻率呈正相關(guān)。阻斷TIGIT的表達(dá)能夠促進(jìn)T淋巴細(xì)胞受體的表達(dá)，增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞活性，從而恢復(fù)免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤的抑制作用。

4.2 TIGIT有望突破AIH治療的瓶頸問題 糖皮質(zhì)激素是目前AIH治療的一線藥物，主要通過與糖皮質(zhì)激素受體等結(jié)合上調(diào)Treg，抑制機(jī)體免疫功能[15]，從而恢復(fù)機(jī)體失調(diào)的免疫穩(wěn)態(tài)[16]，緩解AIH病情，控制疾病進(jìn)展。但激素治療仍存在很多問題，部分患者因存在激素治療禁忌證，或因激素治療中出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)而限制其使用[17]，即使對(duì)于能夠使用激素治療的患者，仍有約13%的應(yīng)答不佳而無法緩解疾病進(jìn)程，而激素應(yīng)答良好的患者，亦存在停藥反彈的風(fēng)險(xiǎn)，甚至需要長期使用糖皮質(zhì)激素治療。研究顯示，采用Treg過繼性免疫療法有助于治療自身免疫性疾病(表1)，然而Treg與Teff中某些信號(hào)通路相互沖突，單用Treg治療不足以誘導(dǎo)機(jī)體免疫耐受的重建[26]。

表1 Treg及TIGIT與自身免疫性肝病治療的相關(guān)研究

TIGIT+Treg較TIGIT-Treg具有更強(qiáng)的免疫抑制作用，TIGIT可通過抑制Treg活化而控制自身免疫反應(yīng)、糾正自身免疫Treg的缺陷[27]。調(diào)控TIGIT的表達(dá)，可誘導(dǎo)Treg的分化，使機(jī)體免疫耐受重建，進(jìn)而使疾病獲得緩解。綜上所述，TIGIT可能成為一個(gè)潛在的AIH治療候選靶點(diǎn)，將為AIH免疫治療研究提供思路和方向。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。

作者貢獻(xiàn)聲明：韓琳、張明月負(fù)責(zé)資料分析，撰寫論文；孫穎負(fù)責(zé)擬定寫作思路，指導(dǎo)撰寫文章并最后定稿。