劉 瑩，張永剛，李先國(guó)，張大海，李兆新，邢麗紅，孫曉杰

(1.中國(guó)海洋大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，山東青島 266100；2.青島市漁業(yè)技術(shù)推廣站，山東青島 266071；3.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)院黃海水產(chǎn)研究所，山東青島 266071)

中華鱉()又稱甲魚(yú)、水魚(yú)，是世界上重要的水生爬行動(dòng)物物種之一，廣泛分布于中國(guó)、日本、韓國(guó)等亞洲國(guó)家，并因其高營(yíng)養(yǎng)和高藥用價(jià)值而聞名。目前，中華鱉已成為我國(guó)淡水養(yǎng)殖中重要的經(jīng)濟(jì)養(yǎng)殖品種之一，2019年我國(guó)鱉的養(yǎng)殖總產(chǎn)量約為32.5萬(wàn)噸。然而，隨著中華鱉養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的迅速擴(kuò)大、養(yǎng)殖密度增加、水環(huán)境惡化，使得養(yǎng)殖過(guò)程中細(xì)菌性疾病大規(guī)模爆發(fā)，且感染率及死亡率較高，導(dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，阻礙了中華鱉養(yǎng)殖業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。

甲砜霉素(thiamphenicol，TAP)為第二代人工合成的氯霉素類廣譜抗菌藥物，抑菌效果及作用機(jī)理與氯霉素相似，但是毒性有所降低。因其低成本、吸收快，與常用抗菌藥物無(wú)交叉耐藥性等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)細(xì)菌性疾病預(yù)防和治療過(guò)程中。但是由于在養(yǎng)殖過(guò)程中的過(guò)度使用、濫用，導(dǎo)致TAP在養(yǎng)殖環(huán)境中殘留，對(duì)生態(tài)系統(tǒng)和人類健康造成嚴(yán)重的負(fù)面影響。已有研究表明，TAP在一定劑量下具有較強(qiáng)的血液毒性、胚胎毒性和免疫抑制作用，甚至可影響動(dòng)物、植物和微生物的生理功能。目前，關(guān)于TAP在松浦鏡鯉()、鯽()、大菱鲆()、眼斑擬石首魚(yú)()等水產(chǎn)動(dòng)物的血液毒性或藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究已有較多報(bào)道，但關(guān)于TAP對(duì)中華鱉毒性的研究鮮有報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)在水溫26.0 ℃條件下，研究了口灌不同用藥劑量的TAP對(duì)中華鱉血液生化指標(biāo)、組織抗氧化酶活及各組織器官損傷的毒性作用，旨為指導(dǎo)TAP在中華鱉病害防控過(guò)程中的科學(xué)使用提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和臨床用藥理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

實(shí)驗(yàn)用中華鱉規(guī)格約(500±50)g/只，由山東省平度百歲泊中華鱉養(yǎng)殖基地提供。實(shí)驗(yàn)鱉暫養(yǎng)在養(yǎng)殖池中7 d后，選取體質(zhì)健壯、活力強(qiáng)、無(wú)病無(wú)傷的中華鱉進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，給藥前停飼24 h。養(yǎng)殖池規(guī)格為150 m，水深 1.5～2 m，中華鱉養(yǎng)殖密度約300只/池，投喂飼料為幼鱉飼料。

1.2 藥品與試劑

TAP標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥99.5%)，購(gòu)自德國(guó)Dr.Ehrenstorfer GmbH公司；TAP原料粉(純度≥99.5%)，生產(chǎn)批號(hào)：C10056838，購(gòu)自上海麥克林公司。

血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、尿素氮(UN)、血糖(GLU)、氯離子(Cl)、鉀離子(K)、鈣離子(Ca)和堿性磷酸酶(AKP)等血清生化指標(biāo)試劑盒，超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)組織抗氧化相關(guān)指標(biāo)測(cè)定試劑盒，購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.3 TAP藥物配制

參考2015年版《中華人民共和國(guó)獸藥典》中TAP對(duì)魚(yú)的推薦用藥劑量(16.7 mg/kg)，使用0.9%生理鹽水將TAP原料粉配制濃度為16.7、50.1及83.5 mg/mL的藥液(魚(yú)推薦用藥劑量的1、3、5倍)。

1.4 實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)

設(shè)3個(gè)實(shí)驗(yàn)組(16.7、50.1及83.5 mg/kg)和1個(gè)對(duì)照組，每組設(shè)置3個(gè)平行，每個(gè)平行10只中華鱉，取樣時(shí)自每個(gè)平行中取3個(gè)樣品作為生物學(xué)重復(fù)(=3)進(jìn)行測(cè)定。為了保持給藥量精確，給藥采用口服灌喂方式。用帶有橡皮軟管的注射器吸取0.5 mL的藥液，將注射器慢慢深入中華鱉口中灌喂，保持中華鱉形體豎立約半分鐘，然后放入養(yǎng)殖水槽正常飼養(yǎng)。若有回吐，則棄去，再新取另一只口灌。對(duì)照組口灌等同體積的生理鹽水。實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行4 d，口灌1次/d，實(shí)驗(yàn)期間水溫保持在26.0 ℃。

1.5 樣品采集方法

中華鱉給藥停止24 h后采樣。每組隨機(jī)取3只中華鱉采集血液，之后依次取肝臟、脾臟、心臟、腎臟、肌肉、睪丸和精巢等組織。

1.6 血液生化指標(biāo)測(cè)定方法

采集的血液在室溫靜置2～3 h后，置于4 ℃冰箱過(guò)夜，以4 ℃ 5 500 r/min離心15 min，取上清液，置于-80 ℃冰箱中備測(cè)。按試劑盒說(shuō)明書(shū)中步驟，分別測(cè)定血清中TP、ALB、ALT等10個(gè)生理生化指標(biāo)。

1.7 肝臟、脾臟抗氧化指標(biāo)的測(cè)定方法

將采集的肝臟和脾臟組織勻漿處理，按試劑盒說(shuō)明書(shū)中步驟，測(cè)定組織中SOD、CAT、NOS活性及MDA含量。

1.8 組織切片處理方法

將采集的中華鱉肝臟、脾臟、腎臟、心臟、肌肉、腸道、精巢和睪丸等組織或器官在Davidson’s固定液中固定24 h后，將固定液換成70%的乙醇。參照王凱的方法，進(jìn)行樣品的脫水、石蠟包埋、切片(5 μm)和染色等處理后，在光學(xué)顯微鏡下觀察、拍照。

1.9 數(shù)據(jù)分析方法

2 結(jié)果與分析

2.1 TAP對(duì)中華鱉血清生理生化指標(biāo)的影響

對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組血清生理生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果如表1所示。與對(duì)照組相比，給藥組血清中的ALT和AST均有所增加，在83.5 mg/kg劑量組達(dá)到最高值，分別為對(duì)照組的7倍和3.7倍；AKP、ALB、TP、K及GLU等血清生化指標(biāo)在16.7 mg/kg劑量組顯著升高，隨著用藥劑量增加，含量逐漸降低，83.5mg/kg劑量組的AKP活性低于對(duì)照組，其他均高于對(duì)照組。Cl濃度隨著TAP的使用有所降低，Ca的濃度變化不顯著。

表1 TAP對(duì)中華鱉血清中生理生化指標(biāo)的影響

2.2 TAP對(duì)中華鱉肝臟、脾臟抗氧化指標(biāo)的影響

2.2.1 TAP對(duì)肝臟SOD、CAT、NOS活性和MDA含量的影響

如圖1所示，與對(duì)照組相比，16.7 mg/kg劑量組肝臟中的SOD和NOS活性顯著增加，具有明顯的誘導(dǎo)作用；而50.1和83.5 mg/kg劑量組活性逐漸降低。肝臟中的CAT活性在50.1 mg/kg劑量組達(dá)到最高值，83.5 mg/kg劑量組活性逐漸降低但仍高于對(duì)照組。16.7 mg/kg劑量組肝臟中的MDA含量有所下降，50.1和83.5 mg/kg劑量組活性逐漸升高，在83.5 mg/kg劑量組最高。

圖1 TAP對(duì)中華鱉肝臟抗氧化酶活性的影響

說(shuō)明TAP以推薦劑量口灌中華鱉時(shí)，對(duì)肝臟的SOD、CAT、NOS活性起到誘導(dǎo)作用，當(dāng)超過(guò)一定濃度范圍時(shí)，誘導(dǎo)作用逐漸減弱。而肝臟MDA含量的變化趨勢(shì)與之相反，在16.7 mg/kg劑量組，肝臟MDA含量與對(duì)照組相同，隨著給藥劑量的增加，MDA含量呈逐漸上升的趨勢(shì)，在83.5 mg/kg劑量組時(shí)，MDA含量達(dá)到最高值。

2.2.2 TAP對(duì)脾臟SOD、CAT、NOS活性和MDA含量的影響

口服灌喂TAP前后，中華鱉脾臟中的SOD、CAT、NO活性和MDA含量測(cè)定結(jié)果如圖2所示。與對(duì)照組相比，各給藥組脾臟的SOD、CAT、NOS活性呈先升后降的趨勢(shì)，在16.7 mg/kg劑量組時(shí)均達(dá)到最高值，50.1和83.5 mg/kg劑量組顯著降低，且均低于對(duì)照組。說(shuō)明在規(guī)定劑量濃度下口灌TAP，可誘導(dǎo)中華鱉脾臟SOD、CAT、NOS活性，反之則降低。而MDA含量與對(duì)照組相比，16.7 mg/kg劑量組顯著低于對(duì)照組，隨著給藥濃度的增加，MDA含量呈上升趨勢(shì)，83.5 mg/kg劑量組MDA含量最高。

圖2 TAP對(duì)中華鱉脾臟抗氧化酶活性的影響

2.3 TAP對(duì)中華鱉組織損傷的影響

腎臟:對(duì)照組中華鱉腎臟由許多腎小管和少量結(jié)締組織構(gòu)成，組織結(jié)構(gòu)清晰，排列整齊，未見(jiàn)有組織病理變化(圖版I-腎臟A)。與對(duì)照組相比，16.7 mg/kg劑量組腎臟組織結(jié)構(gòu)較清晰，但管腔內(nèi)有少量炎性細(xì)胞出現(xiàn)(圖版I-腎臟B)；而隨著給藥劑量的增加，50.1 mg/kg劑量組腎小管管壁增厚，炎性細(xì)胞增多(圖版I-腎臟C)；83.5 mg/kg劑量組組織界限模糊(圖版I-腎臟D)。

肝臟:對(duì)照組與16.7 mg/kg劑量組肝組織致密、結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞呈多角狀，排列整齊緊密，呈放射狀圍繞中央靜脈排列(圖版I-肝臟A-B)；50.1 mg/kg劑量組肝小管出現(xiàn)炎癥，管壁細(xì)胞腫脹彼此融合(圖版I-肝臟C)；而83.5 mg/kg劑量組肝血竇擴(kuò)張嚴(yán)重，有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肝細(xì)胞染色淺淡(圖版I-肝臟D)。

脾臟:對(duì)照組與16.7 mg/kg劑量組脾臟紅髓和白髓結(jié)構(gòu)明顯，排列有序，成熟紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、吞噬細(xì)胞等密集相間，未見(jiàn)有組織病理變化(圖版I-脾臟A-B)；隨著給藥劑量的增加，50.1 mg/kg劑量組脾臟小梁靜脈中充滿大量炎性細(xì)胞(圖版I-脾臟C)；83.5 mg/kg劑量組小梁動(dòng)脈出現(xiàn)炎癥，管壁增厚(圖版I-脾臟D)。

腸道:對(duì)照組與16.7 mg/kg劑量組腸由黏膜、肌層和漿膜三層構(gòu)成，黏膜層結(jié)構(gòu)完整，黏膜上皮清晰，細(xì)胞類型正常，未見(jiàn)有組織病理變化(圖版I-腸道A-B)；50.1 mg/kg劑量組腸絨毛結(jié)構(gòu)不完整，出現(xiàn)脫落現(xiàn)象，細(xì)胞核固化(圖版I-腸道C)；隨著給藥劑量的增加，83.5 mg/kg劑量組腸紋狀緣、固有膜嚴(yán)重受損，杯狀細(xì)胞增多(圖版I-腸道D)。

心臟:16.7 mg/kg劑量組與對(duì)照組心肌纖維排列有序、相互縱橫交叉，構(gòu)成復(fù)雜的網(wǎng)狀組織，無(wú)組織病理變化(圖版I-心臟A-B)；隨著給藥劑量的增加，50.1 mg/kg劑量組心肌纖維斷裂現(xiàn)象逐漸嚴(yán)重，其間有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)(圖版I-心臟C)；83.5 mg/kg劑量組心外膜受損，心肌纖維斷裂，部分組織出現(xiàn)崩解現(xiàn)象，呈空泡狀(圖版I-心臟D)。

精巢:16.7 mg/kg劑量組與對(duì)照組精巢結(jié)構(gòu)完整無(wú)病理特征，精小囊內(nèi)充斥著大量的生殖細(xì)胞，細(xì)胞質(zhì)致密(圖版I-精巢A-B)；隨著用藥劑量的增加，50.1 mg/kg劑量組精小囊內(nèi)生殖細(xì)胞逐漸減少，生精小管受損(圖版I-精巢C)；而83.5 mg/kg劑量組精小囊內(nèi)生殖細(xì)胞完全消失(圖版I-精巢D)。

睪丸:睪丸間質(zhì)由結(jié)締組織細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞組成，對(duì)照組與16.7 mg/kg劑量組曲精管腔結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)腔充滿了大量生殖細(xì)胞群體，未見(jiàn)病理變化(圖版I-睪丸A-B)；隨著用藥劑量的增加，50.1和83.5 mg/kg劑量組曲精管腔內(nèi)生殖細(xì)胞或游離的精子逐漸減少(圖版I-睪丸C)，83.5 mg/kg劑量組受損程度嚴(yán)重，曲精管腔留有大面積的空白區(qū)域(圖版I-睪丸D)。

肌肉:肌肉由白肌和紅肌組成，肌纖維成束排列，紅肌橫斷面為圓形或近圓形，白肌為三角形或多邊形，16.7和50.1 mg/kg劑量組肌肉組織結(jié)構(gòu)與對(duì)照組相似，組織結(jié)構(gòu)正常未見(jiàn)病理變化(圖版I-肌肉A-C)；而83.5 mg/kg劑量組的肌肉細(xì)胞核固化，肌原纖維受損，導(dǎo)致肌束間間隙增大(圖版I-肌肉D)。

圖版I 口灌TAP對(duì)中華鱉組織的病理變化

3 討論

3.1 TAP對(duì)中華鱉血液生化指標(biāo)的影響

血液在動(dòng)物體內(nèi)有著十分重要的作用，參與機(jī)體的新陳代謝、防御、免疫及維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定等，血液學(xué)指標(biāo)不僅能反映動(dòng)物的生理狀態(tài)，也廣泛用于評(píng)價(jià)動(dòng)物的健康狀況。目前，關(guān)于TAP對(duì)魚(yú)類血液毒性的研究已有報(bào)道，但對(duì)于中華鱉血液毒性的研究較少。

本實(shí)驗(yàn)采用口灌的方法，研究了TAP對(duì)中華鱉10項(xiàng)血清生化指標(biāo)的影響，發(fā)現(xiàn)TAP對(duì)中華鱉血清生化指標(biāo)影響顯著，且存在明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。在本研究中，ALT、AST活力與藥物濃度成正比，在83.5 mg/kg劑量組達(dá)到最高值，明顯高于對(duì)照組，與楊洪波等報(bào)道的TAP對(duì)松浦鏡鯉血清生化指標(biāo)影響的結(jié)果一致。Sobhy等也報(bào)道成年小鼠以16 mg/100 g體質(zhì)量服用TAP 7 d，其血清AST、ALT顯著升高。ALT、AST主要分布于肝細(xì)胞內(nèi)，為肝臟中兩種重要的指示酶，其升高的程度與肝細(xì)胞受損的程度相一致，由此可見(jiàn)，TAP對(duì)中華鱉肝臟可能有一定的損傷作用。

TP、ALB可反映動(dòng)物機(jī)體組織器官功能狀態(tài)，肝腎功能受損可引起其在血清中含量的降低。在本研究中，16.7 mg/kg劑量組血清TP、ALB含量顯著高于對(duì)照組，但隨著藥物濃度的增加而逐漸降低。說(shuō)明TAP在推薦劑量下可提高機(jī)體的蛋白合成代謝功能，當(dāng)超過(guò)閾值時(shí)導(dǎo)致肝腎功能受損，含量降低。本結(jié)果與唐海蓉等報(bào)道的TAP對(duì)肉雞血清TP、ALB變化趨勢(shì)的影響存在一定差異，可能與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)周期不同有關(guān)。

UN及動(dòng)物機(jī)體內(nèi)環(huán)境中各種離子濃度的變化，對(duì)機(jī)體健康狀況有著重要的影響，均可衡量腎臟功能的受損情況。UN來(lái)源于肝臟，而通過(guò)腎臟隨尿排出，當(dāng)腎臟受損時(shí)，濾過(guò)增多，血清中含量就增高；UN較低表明機(jī)體蛋白合成效率高。在本研究中，16.7和50.1 mg/kg劑量組UN含量和對(duì)照組無(wú)顯著差異，而83.5 mg/kg劑量組顯著高于其他三組；實(shí)驗(yàn)組K濃度顯著高于對(duì)照組，Cl濃度顯著降低，Ca無(wú)顯著差異，表明TAP對(duì)中華鱉血清Ca濃度影響較小。本研究結(jié)果與唐海蓉等的報(bào)道結(jié)果相似，可能由于隨著藥物濃度的增加，加大了肝腎負(fù)擔(dān)，對(duì)肝腎的代謝功能造成了一定的壓力，降低了蛋白合成效率，導(dǎo)致其相對(duì)應(yīng)的指標(biāo)含量下降。

AKP是生物體的一種重要的代謝調(diào)控酶，在堿性環(huán)境下能水解磷酸單酯起到解毒、免疫防御的作用。在本研究中，血清AKP活性在16.7 mg/kg劑量組顯著升高，50.1和83.5 mg/kg劑量組顯著降低。SONG等報(bào)道，當(dāng)大量病毒在血細(xì)胞內(nèi)繁殖時(shí)，血細(xì)胞會(huì)大量減少，同時(shí)AKP的活性也會(huì)下降。原理可能與其相似，當(dāng)中華鱉在推薦劑量下口灌TAP時(shí)，可促進(jìn)血細(xì)胞的生產(chǎn)，提高血清AKP的活性，對(duì)外界刺激可達(dá)到免疫防御的作用，反之則降低。血清GLU可反映機(jī)體在脅迫環(huán)境中體內(nèi)代謝和組織器官的功能狀態(tài)。本研究中，實(shí)驗(yàn)組血清GLU含量顯著高于對(duì)照組。

3.2 TAP對(duì)中華鱉肝臟、脾臟抗氧化指標(biāo)的影響

近年來(lái)，在評(píng)價(jià)水生動(dòng)物的健康方面，利用組織抗氧化指標(biāo)來(lái)反映動(dòng)物機(jī)體損傷程度得到眾多學(xué)者的廣泛應(yīng)用，其中重要的抗氧化因子包括SOD、CAT、GST、GSH、NOS、MDA等，其活性及含量可隨外界脅迫而做出迅速響應(yīng)。

SOD、CAT、NOS三者在機(jī)體的抗氧化和免疫保護(hù)方面有著密切的關(guān)系，共同組成了抗氧化防御系統(tǒng)的第一道防線。在本研究中，除肝臟CAT外，肝臟和脾臟SOD、CAT、NOS活性均在16.7 mg/kg劑量組達(dá)到最大值，顯著高于對(duì)照組和其他實(shí)驗(yàn)組，均呈現(xiàn)先誘導(dǎo)后抑制的變化趨勢(shì)。馮艷艷等在研究氟苯尼考對(duì)脊尾白蝦()的免疫與抗氧化功能時(shí)也發(fā)現(xiàn)，低、中劑量的氟苯尼考對(duì)SOD、CAT有誘導(dǎo)作用，高劑量時(shí)則起到抑制作用。楊洪波也發(fā)現(xiàn)TAP對(duì)松浦鏡鯉()脾臟NOS活力的影響，隨著濃度增加具有先誘導(dǎo)后抑制的現(xiàn)象。上述研究與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。SOD、CAT、NOS活性的誘導(dǎo)，可能由于TAP刺激機(jī)體產(chǎn)生大量的活性氧簇，為了清除過(guò)多的氧自由基，活性增強(qiáng)；而隨著藥物濃度的增加或在高劑量的長(zhǎng)時(shí)間作用下，產(chǎn)生的氧自由基超出了機(jī)體能清除的范圍，TAP不能被完全排出體外，氧自由基攻擊抗氧化系統(tǒng)，導(dǎo)致肝臟和脾臟代謝功能下降，SOD、CAT、NOS活性被抑制。

MDA是反映機(jī)體氧化應(yīng)激性能的重要指標(biāo)，能體現(xiàn)脂質(zhì)過(guò)氧化程度。吝思琪等采用浸泡的方式研究了不同濃度(5、10 mg/L)的恩諾沙星對(duì)卵形鯧鲹抗氧化功能的影響，發(fā)現(xiàn)隨著濃度的升高，腎臟MDA含量顯著升高。王琨等報(bào)道，當(dāng)魚(yú)類肝臟、脾臟等實(shí)質(zhì)器官發(fā)生病變時(shí)，機(jī)體會(huì)發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，造成組織細(xì)胞的死亡，MDA含量顯著升高。本研究也發(fā)現(xiàn)，中華鱉肝臟和脾臟MDA含量與藥物濃度成正比，其含量的升高是脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)、脂質(zhì)過(guò)氧化物增多的表現(xiàn)，說(shuō)明高劑量的TAP對(duì)中華鱉的肝臟和脾臟可產(chǎn)生一定的損傷作用。

3.3 TAP對(duì)中華鱉組織損傷的影響

MAITA等報(bào)道以TAP200 mg/(kg·d)體重的飼喂雄性大白鼠，4周后通過(guò)組織學(xué)觀察可見(jiàn)精原細(xì)胞和精細(xì)胞的大量退行性變化，可引起繁殖障礙。MAGGINI等用TAP150 mg/(kg·d)的對(duì)ASHP小鼠進(jìn)行肌肉注射3周，發(fā)現(xiàn)肺組織粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的核糖體片段發(fā)生改變。本研究通過(guò)組織病理對(duì)中華鱉8個(gè)不同組織器官觀察發(fā)現(xiàn)，在16.7 mg/kg劑量組時(shí)，中華鱉腸道、肝臟、腎臟、脾臟、心臟、精巢、睪丸、肌肉與對(duì)照組相比，并無(wú)顯著的病理變化，而隨著給藥劑量的增加，TAP對(duì)中華鱉以上各組織的損傷逐漸加重。表現(xiàn)為腸絨毛脫落，腎結(jié)構(gòu)模糊，肝血竇擴(kuò)張、大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，脾臟小梁動(dòng)脈出現(xiàn)炎癥，心肌纖維萎縮、崩解，精巢和睪丸生殖細(xì)胞質(zhì)消失，肌纖維斷裂、肌束間隙增大。本研究結(jié)果與MAITA等、MAGGINI等的報(bào)道相似，說(shuō)明過(guò)量服用TAP對(duì)中華鱉各個(gè)組織器官均可造成嚴(yán)重的損傷，在養(yǎng)殖過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格遵守規(guī)范的用藥劑量。

綜上所述，高劑量的TAP對(duì)中華鱉具有較強(qiáng)的毒性，對(duì)血液生理生化、組織免疫酶活性均產(chǎn)生抑制作用，導(dǎo)致機(jī)體的抗氧化功能下降。從病理組織學(xué)也可以看出，高劑量TAP對(duì)中華鱉的消化器官、排泄器官、循環(huán)器官、免疫器官、生殖器官均可造成嚴(yán)重的損傷，具有一定的生殖毒性。雖然在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中未發(fā)現(xiàn)中華鱉的死亡現(xiàn)象，但如果中華鱉長(zhǎng)期過(guò)量使用TAP，可能會(huì)對(duì)其生長(zhǎng)、生殖產(chǎn)生危害。因此，在實(shí)際的中華鱉疾病預(yù)防和治療過(guò)程中，應(yīng)該嚴(yán)格控制TAP的用藥劑量，謹(jǐn)防過(guò)度使用或者濫用，以免對(duì)中華鱉機(jī)體造成損傷。