鄭鎮(zhèn)永　陳春娣　黃昌杰　黃華強(qiáng)　楊素明

摘要：目的：驗(yàn)證HPLC法測(cè)定醋延胡索飲片中的延胡索乙素含量，探索不同炮制溫度醋延胡索飲片中延胡索乙素的相關(guān)性，以及內(nèi)在差異;方法： 色譜方法為：采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-0.1%磷酸溶液（55：45）為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm; 結(jié)果：醋炙溫度的變化會(huì)影響醋延胡索中延胡索乙素的含量。結(jié)論：本檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好;能準(zhǔn)確的指導(dǎo)日常醋炙溫度參數(shù)的設(shè)置，用140℃進(jìn)行醋炙延胡索乙素含量最高。

關(guān)鍵詞：醋延胡索;延胡索乙素;醋炙;溫度;

【中圖分類號(hào)】R97???????????? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A???????????? 【文章編號(hào)】2107-2306（2022）1--01

延胡索（CORYDALIS RHIZOMA）為罌粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥塊莖。夏初莖葉枯萎時(shí)采挖，除去須根，洗凈，置沸水中煮至恰無白心時(shí)，取出，曬干。延胡索辛、苦，溫。歸肝、脾經(jīng)。能活血，行氣，止痛。用于胸脅、脘腹疼痛，胸痹心痛，經(jīng)閉痛經(jīng)，產(chǎn)后瘀阻，跌撲腫痛^[1]。。延胡索藥用價(jià)值高，應(yīng)用范圍廣，臨床常用來鎮(zhèn)痛抗炎，抗腫瘤，治療胃腸道及心血管疾病;延胡索主要生于丘陵草地。本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法測(cè)定醋延胡索飲片中延胡索乙素含量測(cè)定，進(jìn)一步分析醋炙溫度和時(shí)間與其延胡索乙素含量的相關(guān)性，為該飲片提供更全面的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，探索更合理的醋炙條件。

1儀器、設(shè)備與試藥

1.1儀器

LC-16型高效液相色譜儀（島津儀器（蘇州）有限公司）;HH-8型數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州澳華儀器有限公司）;SHZ-D（Ⅲ）型循環(huán)水式多用真空泵（河南省予華儀器有限公司）; MSE3.6P-0CE-DM型精密分析天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）;AUW120D型分析天平（日本島津）;DZF6020MBE型真空干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司）;QHRO-10L型超純水儀 （東莞市謙和水處理工程有限公司）等。

1.2 設(shè)備

RY-3000潤藥機(jī)（方型）（杭州富陽康華制藥機(jī)械有限公司）、SQY-300往復(fù)式切藥機(jī)（杭州富陽康華制藥機(jī)械有限公司）、LG-KFFRS-15IIW熱泵烘干抽濕機(jī)（東莞市藍(lán)冠環(huán)保節(jié)能科技有限公司）、CY550-Ⅲ電熱炒藥機(jī)（常熟市中藥機(jī)械廠）、XY-700洗藥機(jī)（杭州富陽康華制藥機(jī)械有限公司）等。

1.3 試藥

延胡索乙素（批號(hào)：110726-202020，中國食品藥品檢定研究院）;甲醇、乙腈（色譜純，霍尼韋爾貿(mào)易（上海）有限公司），其余試劑均為分析純;延胡索樣品來自浙江，經(jīng)副主任中藥師黃昌杰鑒定為罌粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥塊莖，具體信息見表1;米醋（批號(hào)：F200401，山西醯湖美食品有限公司）。

2 飲片的制備

2.1 炮制工藝

2.1.1 凈制：清除混在藥材中的雜質(zhì)及霉變品、泥土及灰塵等。

2.1.2 洗潤：將凈制后的中間產(chǎn)品，用流動(dòng)的飲用水清洗，將藥材表面的泥沙雜質(zhì)清洗干凈，用潔凈的盛器接盛洗好的藥材。

2.1.3 切制：按切藥機(jī)操作規(guī)程操作，設(shè)置好刀距及切制速度，切藥時(shí)先試切，用游標(biāo)卡尺檢測(cè)，調(diào)整好切制厚度，符合要求后再正式切藥，片厚3mm。

2.1.4 醋炙：設(shè)置炒藥機(jī)溫度，開啟炒藥機(jī)預(yù)熱，待升至設(shè)定溫度時(shí)，將悶潤好的藥材倒入炒藥機(jī)中;每次醋炙時(shí)，用文火^[5]（120～150℃）炒干，微有醋香氣，出料。

2.2 樣品的準(zhǔn)備? 取延胡索藥材，除去雜質(zhì)后清洗干凈瀝干水，加入米醋拌勻，放入潤藥機(jī)中潤15h至無干心米醋吸盡，切3mm片的;炒藥機(jī)分別設(shè)置120℃、125℃、130℃、135℃、140℃、145℃、150℃進(jìn)行醋炙。

3 方法與結(jié)果

3.1 測(cè)定方法

對(duì)照品溶液的制備? 取延胡索乙素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含46μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備? 取經(jīng)2.2處理過的粉末（過三號(hào)篩）約0.5g，精密稱定，置平底燒瓶中，精密加入濃氨試液-甲醇（1：20）混合溶液50ml，稱定重量，冷浸1小時(shí)后加熱回流1小時(shí)，放冷，再稱定重量，用濃氨試液-甲醇（1：20）混合溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

色譜條件? 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-0.1%磷酸溶液（三乙胺調(diào)pH值至6.0）（55：45）為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm。理論板數(shù)按延胡索乙素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

測(cè)定法? 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

3.2線性關(guān)系考察

分別制成濃度為9.32μg/ml、23.30μg/ml、46.35μg/ml、74.56μg/ml、93.20μg/ml的對(duì)照品溶液，按3.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，以對(duì)照品濃度x為橫坐標(biāo)，峰面積y為縱坐標(biāo)，計(jì)算回歸方程：y= 8274.8x+40890，r=0.9996，表明延胡索乙素在0.093ug～0.932ug范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

3.3精密度試驗(yàn)

精密吸取46.35μg/ml對(duì)照品溶液10uL，連續(xù)進(jìn)樣6次，按3.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，結(jié)果：峰面積RSD：0.4%，出峰時(shí)間RSD：0.04%（n=6），表明儀器精密度良好。

3.4重復(fù)性試驗(yàn)

按照3.1項(xiàng)下供試品溶液的制備方法平行制備6份供試品溶液，按3.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定延胡索乙素的含量，延胡索乙素的平均含量：0.103%，RSD：0.5%（n=6），說明該方法重現(xiàn)性良好。

3.5 加樣回收率試驗(yàn)

取醋延胡索粉末9份，按照3.1項(xiàng)下供試品溶液的制備9份供試品溶液，分別加入46.35μg/ml對(duì)照品溶液5ml、10 ml、15 ml各3份，按3.1項(xiàng)下色譜條件測(cè)定含量。結(jié)果平均加樣回收率：99.8%，RSD：1.1%。結(jié)果見表2。

3.6 測(cè)定

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得，見表3

4討論

4.1? 從表3數(shù)據(jù)可得出，溫度升高會(huì)影響醋延胡索中延胡索乙素含量。

4.2 本研究進(jìn)行了延胡索不同醋炙溫度的比較，溫度達(dá)到140℃時(shí)，延胡索乙素到達(dá)一個(gè)最高值，隨后溫度的升高延胡索乙素的含量也會(huì)相應(yīng)的下降;實(shí)驗(yàn)表明延胡索乙素會(huì)隨著溫度升高到一個(gè)頂點(diǎn)后，隨著溫度再次升高會(huì)趨于下降狀態(tài)。

4.3 通過對(duì)醋炙延胡索溫度的研究，結(jié)合HPLC指標(biāo)成分分析，建立中藥有效成分含量與醋炙溫度的技術(shù)研究，有利于規(guī)范法定標(biāo)準(zhǔn)炮制條件的設(shè)定，更客觀的對(duì)中藥飲片進(jìn)行質(zhì)量控制。根據(jù)不同的溫度對(duì)含量影響探究，才能更好地把控飲片的質(zhì)量，促使中藥飲片行業(yè)向著更好的方向發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

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