張朋朋 王海波 于新海 劉苗苗 魏亦山

摘 要：為評定氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定芹菜中克百威殘留量的不確定度，本文根據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》（GB 23200.113—2018），參照《測量不確定度評定與表示》（JJF 1059.1—2012），建立氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定芹菜中克百威殘留量的不確定度數(shù)學(xué)模型，分析檢測過程中的主要不確定度來源，探討控制測量不準(zhǔn)確度的方法。結(jié)果表明，芹菜中克百威殘留量為（0.018±0.001）mg/kg（P=95%，k=2），其中測定不確定度的最重要來源是標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。

關(guān)鍵詞：氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）;芹菜;克百威;不確定度

Uncertainty Evaluation for the Determination of Carbofuran Residues in Celery by Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

ZHANG Pengpeng， WANG Haibo， YU Xinhai， LIU Miaomiao， WEI Yishan

（Qingdao Agricultural Product Quality and Safety Center， Qingdao 266000）

Abstract： According to GB 23200.113—2018 ， and with reference to JJF 1059.1—2012 ， a uncertainty mathematical model for the determination of carbofuran residue in celery by gas chromatography-tandem mass spectrometry was established in order to evaluate the uncertainty. The main sources of uncertainty in the measurement process were analyzed， and the ways to control measurement accuracy was discussed. The results show the residue of carbofuran could be expressed as （0.018±0.001） mg/kg （P=95%， k=2）， and the most important source of uncertainty is the preparation of standard solution.

Keywords： gas chromatography-tandem mass（GC-MS/MS）; celery; carbofuran; uncertainty

克百威，一種高毒性、低殘留、高效的氨基甲酸酯類農(nóng)藥，具有內(nèi)吸、觸殺作用，并有一定的殺卵作用，被禁止在蔬菜、果樹、茶葉和中草藥材上使用。然而，由于其殺菌效果好，在芹菜種植過程中仍使用較為普遍。近年來，芹菜中克百威超標(biāo)問題層出不窮?！妒称钒踩珖覙?biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）[1]中規(guī)定，克百威在芹菜中的最大殘留量為0.02 mg/kg。

在檢測過程中，為保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度和可信度，必須進(jìn)行不確定度的評定[2]，特別當(dāng)檢測數(shù)據(jù)在國家規(guī)定限量值附近時(shí)，其準(zhǔn)確性、可信度尤為重要，會直接影響樣品是否合格的判定。本文按照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》

（GB 23200.113—2018）[3]和《測量不確定度評定與表示》（JJF 1059.1—2012）[4]，建立數(shù)學(xué)模型，分析整個實(shí)驗(yàn)過程中的主要不確定度來源，對各個不確定度分量進(jìn)行評估，以獲得影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確度的因素，并在實(shí)驗(yàn)過程中得以控制與關(guān)注。

1 材料與方法

1.1 儀器與材料

GC MS-TQ 8050 NX氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀（日本島津公司）;AX622ZH電子天平（奧豪斯儀器有限公司）;水浴氮吹儀（美國Organomation公司）;CF16RN高速低溫離心機(jī)（日本日立公司）;乙腈（色譜純，德國Merck公司）、乙酸乙酯（色譜純，美國TEDIA公司）;克百威標(biāo)準(zhǔn)溶液1 000 μg/mL，購于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心（天津）;萃取試劑包含4 g硫酸鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉和15 mL凈化管（含885 mg硫酸鎂、150 mg PSA、15 mg GCB），購買于美國安捷倫公司;樣品均為市售芹菜。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程

①標(biāo)準(zhǔn)儲備液。用0.1 mL分度吸量管準(zhǔn)確吸取0.1 mL 1 000 μg/mL克百威標(biāo)液，置于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容至刻度線，得到10 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)儲備液。②標(biāo)準(zhǔn)溶液。用0.1 mL分度吸量管準(zhǔn)確吸取

0.1 mL上述標(biāo)準(zhǔn)儲備液，置于10 mL容量瓶中，乙酸乙酯定容得到0.1 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液。③基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液?？瞻浊鄄嘶|(zhì)溶液氮?dú)獯蹈桑尤? mL

0.1 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液復(fù)溶，渦旋混勻，過0.22 μm濾膜后上機(jī)（現(xiàn)用現(xiàn)配）。

1.3 供試品溶液制備

供試品溶液制備流程見圖1。

1.4 氣相色譜條件

色譜柱：島津SH-Rxi-5Sil MS，（30 m×0.25 mm，0.25 μm）;色譜柱溫度：50 ℃保持1 min，后以

25 ℃/min程序升溫至125 ℃，再以10 ℃/min升溫至

300 ℃，保持3 min;載氣：氦氣，線速度：47.2 cm/s;進(jìn)樣口溫度：250 ℃;進(jìn)樣量：1 μL;進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣。

1.5 質(zhì)譜條件

離子源：電子轟擊源（EI）;離子源溫度：200 ℃;接口溫度：250 ℃;掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）;定性/定量離子對：149.10-121.10（碰撞能量10）、164.10-149.10（碰撞能量8）。

2 結(jié)果與分析

2.1 數(shù)學(xué)模型的建立

（1）

式中：ω為樣品中克百威殘留量，mg/kg;ρ為基質(zhì)標(biāo)液中克百威的質(zhì)量濃度，mg/L;A、As分別為樣品中、基質(zhì)標(biāo)液中克百威的色譜峰面積;V1為提取體積，mL;V2為分取體積，mL;V3為定容體積，mL;m為試樣質(zhì)量，g。

2.2 不確定度來源分析

根據(jù)建立的數(shù)學(xué)模型及樣品的測定過程，分析影響不確定度的各個分量，其不確定度來源主要為標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程、樣品稱量過程、樣品前處理過程、樣品重復(fù)測量和樣品加標(biāo)回收率。

2.3 引入的不確定度各分量評定

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的相對合成不確定度urel（ρ）

urel（ρ）主要來源為標(biāo)準(zhǔn)溶液自身純度引入的相對合成不確定度urel（ρ純）和配制過程引入的相對合成不確定度urel（ρ配）。

從購買的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書中查得克百威

（1 000 μg/mL）的擴(kuò)展不確定度為7 μg/mL（k=2），計(jì)算出克百威自身純度引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度。

配制標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的相對不確定度urel（ρ配）主要有計(jì)量器具引入的相對不確定度urel（ρV）和溫度變化引入的相對不確定度urel（ρT）。從《常用玻璃儀器檢定規(guī)程》[5]中分別查詢得到0.1 mL、

1 mL分度吸量管和10 mL容量瓶的允許誤差am，按矩形分布考慮，采取B類評定，則;

溫度變化對溶劑體積的影響則服從均勻分布，包含因子，。

實(shí)驗(yàn)溫度在（20±5）℃變化，乙酸乙酯在20 ℃的熱膨脹系數(shù)為1.38×10-3/℃。標(biāo)準(zhǔn)溶液配制過程中引入的不確定度如表1所示，計(jì)算出克百威配制過程中引入的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

合成克百威標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的相對不確定度為：

2.3.2 來自樣品稱量的相對合成不確定度urel（m）

稱量10.00 g試樣使用的是中準(zhǔn)確度電子天平，其實(shí)際分度值為0.01 g。檢定證書中標(biāo)明，當(dāng)0≤m≤50 g時(shí)，天平的最大允許誤差是±0.005 g，按照均勻分布評定，則來自稱量過程帶入的相對合成不確定度為：

2.3.3 前處理過程中量器引入的相對合成不確定

度urel（V）

在該實(shí)驗(yàn)方法下，提取、凈化和復(fù)溶過程中分別使用10 000 μL、5 000 μL、1 000 μL移液器各1次。分析可知，urel（V）主要包含移液器允差引入的不確定度urel（移）和測量重復(fù)性引入的不確定度urel（測）。參照《移液器檢定規(guī)程》（JJG 646—2006）[6]，urel（移）和urel（測）服從均勻分布，移液器引入的不確定度見表2。

合成樣品前處理過程中量器引入的相對不確定度為：

2.3.4 樣品重復(fù)測定引入的相對合成不確定度urel（F）

按照同一實(shí)驗(yàn)方法平行測定6份試樣，得到芹菜中克百威的含量ω為0.018 mg/kg、0.017 mg/kg、0.018 mg/kg、0.019 mg/kg、0.019 mg/kg和0.018 mg/kg。按不確定度A類評定方法，計(jì)算出平均值的標(biāo)準(zhǔn)偏差，樣品平均含量ω=0.018 mg/kg，則重復(fù)測量引入的相對合成不確定度為。

2.3.5 樣品加標(biāo)回收率引入的相對合成不確定

度urel（R）

取6份空白芹菜樣品，添加克百威標(biāo)液水平為0.025 mg/kg，按照該實(shí)驗(yàn)方法測得加標(biāo)回收率為97.5%、101.2%、105.0%、102.5%、101.2%和98.8%，平均回收率R=101.0%，，計(jì)算得出

。

2.4 合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度u（ω）

上述各個不確定度分量互不相關(guān)，合成克百威的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度采用方和根方法求得：

當(dāng)測試樣品中克百威含量為0.018 mg/kg時(shí)，其合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

3 擴(kuò)展不確定度U及結(jié)果表示

參照《化學(xué)分析測量不確定度評定》（JJF 1135—

2005）[7]，在95%的置信水平下，取包含因子k=2，則擴(kuò)展不確定度U=2×0.000 53≈0.001 mg/kg。用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定芹菜中克百威的殘留量結(jié)果表示為（0.018±0.001）mg/kg（P=95%，k=2）。

4 結(jié)論

實(shí)驗(yàn)采用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定芹菜中的克百威含量，在標(biāo)液配制過程、前處理過程和儀器測定等多個方面均會帶入不確定度。從不確定度各分量評定過程來看，標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制和測量重復(fù)性對結(jié)果的影響較大，建議實(shí)驗(yàn)室購買有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、選用精密度高的計(jì)量器具、使用校準(zhǔn)的儀器設(shè)備等，以提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠度。

參考文獻(xiàn)

[1]國家衛(wèi)生健康委員會，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，國家市場監(jiān)督管理總局.食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量：GB 2763—2021[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2021.

[2]陽曦，陳慧斐，向世杰.QuEChERS-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定結(jié)球甘藍(lán)中甲基毒死蜱農(nóng)藥殘留不確定度評估[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報(bào)，2021，12（3）：1136-1141.

[3]國家衛(wèi)生健康委員會，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部，國家市場監(jiān)督管理總局.植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法：GB 23200.113—2018[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2018.

[4]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.測量不確定度評定與表示：JJF 1059.1—2012[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2012.

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[6]國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.移液器檢定規(guī)程：JJG 646—2006[S].北京：中國計(jì)量出版社，2006.

[7]中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.化學(xué)分析測量不確定度評定：JJF 1135—2005[S].北京：中國計(jì)量出版社，2005.

1762501186320