袁路路，趙曉丹

（河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院新區(qū)醫(yī)院 產(chǎn)科，河南 洛陽 471000）

未足月胎膜早破（preterm premature rupture of membranes，PPROM）指孕齡小于37周胎膜自發(fā)性破裂，目前尚無確切病因，可能與胎膜受力不均、創(chuàng)傷、感染等因素有關(guān)［1］。PPROM患者常并發(fā)絨毛膜羊膜炎，通常早期無明顯臨床癥狀，容易誘發(fā)宮腔感染、新生兒敗血癥等多種并發(fā)癥，威脅母嬰生命安全。因此，積極探尋可早期檢測PPROM患者并發(fā)絨毛膜羊膜炎的相關(guān)指標(biāo)至關(guān)重要。相關(guān)研究證明，絨毛膜羊膜炎的發(fā)生與炎癥和蛋白水解相關(guān)，氧化應(yīng)激和細(xì)胞衰老的過早激活可促進(jìn)炎癥和蛋白水解進(jìn)展［2］?；|(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）是一族蛋白水解酶，可參與細(xì)胞外基質(zhì)的代謝，其活性可被特異性抑制因子所抑制，其中基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibitor ofmetalloproteinase-1，TIMP-1）分布最廣泛［3］。半乳糖凝集素（galectin，Gal）是一種多功能蛋白，在細(xì)胞氧化應(yīng)激過程中發(fā)揮作用，Gal-3主要位于子宮內(nèi)膜間質(zhì)、胎膜和滋養(yǎng)細(xì)胞中，在氧化還原反應(yīng)、細(xì)胞衰老和免疫調(diào)節(jié)方面具有一定作用［4］。因此，推測血清TIMP-1、Gal-3水平可能對PPROM患者絨毛膜羊膜炎的發(fā)生存在一定影響。鑒于此，本研究重點(diǎn)觀察血清TIMP-1、Gal-3在PPROM患者中的表達(dá)，并分析二者水平對PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究經(jīng)河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院新區(qū)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)［2019審（101）號］，選取2019年9月至2021年5月河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院新區(qū)醫(yī)院接收的92例PPROM患者作為研究對象，患者已簽署知情同意書。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①PPROM符合第9版《婦產(chǎn)科學(xué)》［5］中診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)體征、影像學(xué)檢查確診；②單胎孕婦，且在河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院新區(qū)醫(yī)院建卡產(chǎn)檢，并完成分娩；③孕周在28～36周；④近期內(nèi)未使用過抗生素或保胎藥物治療。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①入院時已發(fā)生絨毛膜羊膜炎；②胎膜破裂時間大于12 h；③合并精神障礙，依從性較差；④伴有嚴(yán)重感染；⑤合并高血壓、糖尿病等其他產(chǎn)科合并癥；⑥先天性子宮發(fā)育畸形。92例PPROM患者年齡21～36（28.21±2.28）歲；破膜孕周28～36（33.12±1.23）周；初產(chǎn)婦57例，經(jīng)產(chǎn)婦35例。

1.2 研究方法

1.2.1 絨毛膜羊膜炎判定標(biāo)準(zhǔn)及分組方法 PPROM患者在分娩完成胎盤娩出后30 min內(nèi)，采集胎膜破口距離2 cm以內(nèi)的兩塊胎膜組織，大小約為2 cm×2 cm，采用9 g·L-1氯化鈉液將羊水黏液和血跡沖洗干凈，以體積分?jǐn)?shù)為10%的甲醛快速固定，石蠟包埋，蘇木精-伊紅染色，送至病理科檢查。由病理科2名工作5 a以上的主任醫(yī)生進(jìn)行雙盲法閱片，依據(jù)《婦產(chǎn)科診斷病理學(xué)》［6］診斷標(biāo)準(zhǔn)判定：（1）無羊膜與絨毛模板上白細(xì)胞可見彌散性聚集；（2）白細(xì)胞浸潤呈極性分布，各高倍鏡視野中有5～10個中性粒細(xì)胞。滿足上述情況則為絨毛膜羊膜炎，將其納入發(fā)生組，反之納入未發(fā)生組。

1.2.2 血清TIMP-1、Gal-3水平測定方法 患者確診時，采集清晨空腹外周肘靜脈血5 mL，以3 000 r·min-1速率離心10 min，離心半徑10 cm，取血清待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測血清TIMP-1、Gal-3水平，試劑盒分別選自北京四正柏酶聯(lián)生物科技有限公司和武漢貝茵萊生物科技有限公司。所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行。

1.2.3 基線資料采集分析方法 設(shè)計患者基線資料填寫表，詢問并記錄研究所需資料，內(nèi)容主要包括年齡、破膜孕周、分娩前體質(zhì)量指數(shù)、受教育程度（初中及以下，高中及以上）、是否初產(chǎn)婦（是、否）、是否剖宮產(chǎn)（是、否）以及確診時血清TIMP-1、Gal-3水平等。1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。全部計量資料均經(jīng)Shapiro-Wilk正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以頻數(shù)和百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用logistic回歸分析檢驗(yàn)血清TIMP-1、Gal-3水平對PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生的影響。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α＝0.05。

2 結(jié)果

2.1 PPROM 患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生情況 92例PPROM患者分娩后經(jīng)病理檢查，發(fā)生絨毛膜羊膜炎48例，占52.17%（48/92）；未發(fā)生毛膜羊膜炎44例，占47.83%（44/92）。

2.2 發(fā)生組與未發(fā)生組患者基線資料及血清TIMP-1、Gal-3水平 發(fā)生組確診時血清TIMP-1水平低于未發(fā)生組，確診時血清Gal-3水平高于未發(fā)生組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；組間年齡、破膜孕周、分娩前體質(zhì)量指數(shù)、受教育程度、是否初產(chǎn)婦、是否剖宮產(chǎn)等其他資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 發(fā)生組與未發(fā)生組患者基線資料比較

2.3 血清TIMP-1、Gal-3水平對PPROM 患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生影響的logistic回歸分析 將表1中經(jīng)初步比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義的變量（確診時血清TIMP-1、Gal-3水平）作為自變量（均為連續(xù)變量），將PPROM 患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生情況當(dāng)作因變量（發(fā)生＝1，未發(fā)生＝0）。經(jīng)logistic回歸分析，結(jié)果顯示，血清TIMP-1水平過表達(dá)是PPROM患者并發(fā)絨毛膜羊膜炎的保護(hù)因素（OR＜1，P＜0.05），血清Gal-3水平過表達(dá)是PPROM患者并發(fā)絨毛膜羊膜炎的危險因素（OR＞1，P＜0.05）。見表2。

表2 血清TIMP-1、Gal-3水平對PPROM患者并發(fā)絨毛膜羊膜炎影響的logistic回歸分析

3 討論

PPROM是婦產(chǎn)科常見的并發(fā)癥，不僅可增加早產(chǎn)的發(fā)生風(fēng)險，還提高了宮內(nèi)感染、產(chǎn)褥感染發(fā)生率，嚴(yán)重影響母嬰健康［7］。目前PPROM發(fā)生的感染通常是亞臨床感染，主要是中性粒細(xì)胞浸潤進(jìn)入胎兒組織或胎兒-母體界面，屬于子宮內(nèi)炎癥疾病。PPROM合并絨毛膜羊膜炎早期常無明顯癥狀，不易被發(fā)現(xiàn)，隨著病情發(fā)展，易出現(xiàn)胎心過快、體溫升高等癥狀，需及時終止妊娠［8］。相關(guān)研究表明，絨毛膜羊膜炎在PPROM患者中發(fā)生率達(dá)50%以上［9］。本研究結(jié)果顯示，92例PPROM患者分娩后經(jīng)病理檢查，絨毛膜羊膜炎發(fā)生率為52.17%，符合上述研究結(jié)果［9］，說明PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生率較高。因此，積極尋找早期診斷PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生的有效檢測指標(biāo)，對選擇有效的方式終止妊娠至關(guān)重要。

血清TIMP-1是機(jī)體中重要的酶，可在細(xì)胞外基質(zhì)的逆轉(zhuǎn)和重塑以及疾病損害中發(fā)揮重要作用，主要通過與MMP-9的結(jié)合，抑制細(xì)胞外基質(zhì)降解。在機(jī)體出現(xiàn)某些炎癥病理情況時，血清TIMP-1和MMP-9的系統(tǒng)平衡失調(diào)，導(dǎo)致血清TIMP-1水平異常降低［10］。血清Gal-3是一種嵌合型Gal，可參與細(xì)胞中其他蛋白質(zhì)的相互作用調(diào)控多種信號途徑，從而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、炎癥因子分泌［11］。絨毛膜羊膜炎多由細(xì)菌感染引起，與炎癥反應(yīng)和蛋白水解密切相關(guān)。因此，推測血清TIMP-1、Gal-3水平可能對PPROM患者發(fā)生絨毛膜羊膜炎有一定影響。

本研究結(jié)果顯示，發(fā)生組確診時血清TIMP-1水平低于未發(fā)生組，確診時血清Gal-3水平高于未發(fā)生組，且logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清TIMP-1低表達(dá)、Gal-3過表達(dá)是PPROM患者發(fā)生絨毛膜羊膜炎的風(fēng)險因素，說明血清TIMP-1、Gal-3水平對PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生具有一定影響，且血清TIMP-1低表達(dá)、Gal-3過表達(dá)可增加PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生風(fēng)險。原因在于，MMP-9是MMP家族中重要成員，主要由炎癥細(xì)胞、滋養(yǎng)層細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等生成并分泌，在細(xì)胞外基質(zhì)代謝中起到關(guān)鍵作用，而TIMP-1可以和MMP-9結(jié)合，從而抑制MMP-9的作用。當(dāng)產(chǎn)婦出現(xiàn)炎癥反應(yīng)時，炎癥細(xì)胞因子水平會異常升高，導(dǎo)致溶酶體酶大量的分泌，促使胎膜組織變性壞死，從而增加感染絨毛膜羊膜炎的發(fā)生風(fēng)險。同時宮頸組織細(xì)胞外基質(zhì)具有豐富的膠原，當(dāng)并發(fā)絨毛膜羊膜炎后，可活化中性粒細(xì)胞，破壞TIMP-1和MMP-9的動態(tài)平衡，促使MMP-9的異常升高，抑制TIMP-1的合成和分泌，從而降低血清TIMP-1水平［12］。血清Gal-3在多種炎癥細(xì)胞中有著廣泛表達(dá)，大部分情況下表現(xiàn)為促炎細(xì)胞因子，對免疫細(xì)胞浸潤、激活和清除起到重要調(diào)節(jié)作用。血清Gal-3水平能夠抑制細(xì)胞色素-C的釋放和線粒體損傷，以抑制炎癥部位的細(xì)胞凋亡，同時可刺激巨噬細(xì)胞活化并向M1型轉(zhuǎn)化，促進(jìn)腫瘤壞死因子α、C反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素-6等多種炎癥因子的表達(dá)，促進(jìn)炎癥因子分泌、炎癥細(xì)胞浸潤和氧化應(yīng)激。Gal還可與細(xì)菌表面的多糖相互作用，起到抑制病原體進(jìn)入的功效，說明Gal-3水平異常升高可能作為免疫調(diào)節(jié)分子參與絨毛膜羊膜炎的發(fā)生［13］。因此，血清TIMP-1、Gal-3水平可作為PPROM患者發(fā)生絨毛膜羊膜炎的標(biāo)志物，檢測二者水平可輔助評估絨毛膜羊膜炎發(fā)生風(fēng)險。但本研究仍存在不足之處，如納入的樣本量較小，血清TIMP-1、Gal-3水平可能受其他因素的影響，未來可進(jìn)一步研究，通過增加樣本量，聯(lián)合檢測腫瘤壞死因子-α、C反應(yīng)蛋白等炎癥因子水平，以提高診斷PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生的準(zhǔn)確性。

綜上所述，血清TIMP-1、Gal-3水平對PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生具有一定影響，且血清TIMP-1水平低表達(dá)、Gal-3水平過表達(dá)提示PPROM患者絨毛膜羊膜炎發(fā)生風(fēng)險較高。