王宏迪，竇 露，王柏輝，劉 婷，段 艷，孫立娜，張琳璐，烏蘭花，靳 燁

(1. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，呼和浩特 010018; 2. 烏拉特中旗農(nóng)牧和科技局，內(nèi)蒙古 烏拉特中旗 015300)

【研究意義】長期在草場自由采食天然牧草的蘇尼特羊，有著抗逆性強、發(fā)育迅速、羊肉膻味輕、脂肪含量低及氨基酸含量高、種類齊全等優(yōu)點[1]。但隨著國家退牧還草政策的實施，大部分牧區(qū)逐漸由放牧飼養(yǎng)向集約化和規(guī)模化養(yǎng)殖轉(zhuǎn)變，這種轉(zhuǎn)變雖然縮短了羊的出欄時間，但卻對羊肉品質(zhì)產(chǎn)生了不利影響，因此如何改善舍飼羊肉品質(zhì)成為研究熱點?！厩叭搜芯窟M展】腸道菌群的組成往往會受遺傳背景、環(huán)境、年齡、性別、食物和藥物等多種因素的影響[2]。研究發(fā)現(xiàn)，飼糧是影響腸道菌群內(nèi)生物多樣性或改變特定細菌種類水平的主要因素，并且隨著動物的生長發(fā)育，腸道微生物菌群的結(jié)構(gòu)也會發(fā)生動態(tài)變化，從而影響機體對食物和養(yǎng)分的消化吸收等多種生理功能[3-4]。益生菌作為抗生素的天然替代品，在我國已有乳酸桿菌等16種農(nóng)業(yè)部準許使用的微生物飼料添加劑，其不僅可以避免動物產(chǎn)生抗藥性的潛在風(fēng)險以及動物產(chǎn)品(如肉、蛋和奶)中的抗生素殘留，還能通過限制病原體的侵入來增強腸道健康，從而有助于提高飼料轉(zhuǎn)化率，改善動物的身體生長和營養(yǎng)性能等功效[5-6]。有研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加菊粉會通過促進乳酸菌的生長，增加腸道對礦物質(zhì)的吸收(通過體外研究可以提高鐵、鋅、鎂和鈣離子的吸收)，提高宿主的免疫系統(tǒng)進而提高了豬的生長性能[7]。白艷蘋等[8]研究發(fā)現(xiàn)植物乳桿菌可有效提高蘇尼特羊肌肉的抗氧化能力和肌纖維特性，改善肉品質(zhì)。Jia等[9]用乳酸菌復(fù)合生物制劑喂養(yǎng)育肥羔羊，發(fā)現(xiàn)其生長性能、機體抗氧化能力及免疫功能均有明顯改善，且瘤胃微生物多樣性也顯著增加?！颈狙芯壳腥朦c】關(guān)于乳酸菌對蘇尼特羊生長性能、屠宰性能、肉品質(zhì)的影響和飼喂周期內(nèi)腸道微生物的變化研究較少。腸道作為機體的第二大腦，其中棲息著的大量微生物形成了繁雜的腸道微生態(tài)系統(tǒng)[10]，這些微生物對機體生長發(fā)育起著重要的作用[11]?！緮M解決的關(guān)鍵問題】本研究首次通過研究乳酸菌對蘇尼特羊飼喂周期內(nèi)生長性能、屠宰性能、腸道微生物及肉品質(zhì)的影響，以期為乳酸菌飼料開發(fā)和改善舍飼羊生產(chǎn)性能提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與試驗設(shè)計

在內(nèi)蒙古巴彥淖爾市烏拉特中旗哈拉圖嘎查順遂農(nóng)牧農(nóng)業(yè)合作社(41°35′16.8″N，108°30′50.4″E)挑選12只健康無病的3月齡純種蘇尼特羊[平均體重為(18.83±2.44)kg]，公母各6只，分別按體重大小進行編號，采用配對隨機單位組試驗設(shè)計，分為對照組和試驗組，每組6只(公母各3只)。采用半封閉式飼養(yǎng)模式，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧(精料和粗飼料)，不含任何抗生素，試驗組在對照組的基礎(chǔ)上添加乳酸菌，其添加量為基礎(chǔ)日糧中精料的2%，參考NY/T 816—2004中國肉羊飼養(yǎng)標準來配制日糧，精粗比為60∶40，精料組成及營養(yǎng)水平見表1，粗料為玉米秸稈和干草。

每日飼喂2次飼糧，早晚各1次，自由采食和飲水，隨著個體日齡的增加，其飼喂的精料重量有所增加，0～30 d每日飼喂200 g精料，30 ～60 d每日飼喂400 g精料，60 ～90 d每日飼喂600 g精料。乳酸菌在每天20:00左右灌喂，以200 g精料為例計算每日乳酸菌添加量：200 g×2%×6只=28 g，以105 mL水混勻，用20 mL注射器吸取15 mL注射到羊口中，所有個體的飼養(yǎng)環(huán)境和管理條件均一致，預(yù)飼期為7 d，正式試驗飼喂時間持續(xù)90 d。

乳酸菌為內(nèi)蒙古和美科盛生物技術(shù)有限公司提供的乳安邦復(fù)合微生態(tài)制劑，成分為干酪乳桿菌HM-09、植物乳桿菌HM-10及乳酸菌代謝產(chǎn)物，總活菌數(shù)達1.5×109CFU/g。

1.2 生長性能測定

本研究測定的生長性能包含活體重(測定時個體的重量)、增重和平均日增重，具體測定時間為開始試驗時以及試驗后的30、60和90 d，測定前空腹24 h，自由飲水。

表1 精料組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 屠宰性能測定

飼喂90 d后進行屠宰，屠宰前空腹靜養(yǎng)12 h、停水2 h，根據(jù)現(xiàn)行國家標準《鮮、凍胴體羊肉》(GB/T 9961—2008)對蘇尼特羊胴體進行分割，測量并計算屠宰性能等指標，具體指標包括骨重、凈肉重、屠宰率、產(chǎn)肉率、骨肉比、胴體重、背膘厚和眼肌面積。

1.4 肉品質(zhì)測定

(1)色澤測定：在屠宰后的1～2 h內(nèi)使用TC-P2A全自動測色色差儀測定背最長肌的亮度值(L*)、紅度值(a*)和黃度值(b*)。

(2)pH測定：使用pH-STAR型胴體pH直測儀測定背最長肌的pH0(宰后45 min羊肉的pH)和pH24(4 ℃靜置排酸24 h羊肉的pH)。

(3)蒸煮損失率測定：屠宰后2 h內(nèi)取50 g左右背最長肌整塊肉樣，去除表面的筋、腱、膜及脂肪后稱重(m1)，放入75 ℃水浴鍋中煮45 min，取出冷卻至室溫并擦干后稱重(m2)。

(4)嫩度測定：將沿肌纖維方向切好的肉條(3 cm×1 cm×1 cm)用自封袋密封后，放入85 ℃水浴鍋中煮40 min，取出冷卻至室溫并擦干后用C-LM3B型數(shù)顯式肌肉嫩度儀測定剪切力值。

1.5 腸道微生物的測定

在試驗開始(第0天)以及試驗后的第30、60和90天分別采集新鮮糞便樣品按個體編號于凍存管-80 ℃保存，進行如下試驗步驟。

總DNA提取：根據(jù)DNA提取試劑盒操作步驟對樣本進行總DNA提取，用NanoDrop2000檢測總DNA濃度和純度，并用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA的完整性和質(zhì)量，于-20 ℃保存待測。

PCR擴增：使用515F和926R細菌通用引物對16 sRNA基因的V4～V5區(qū)間進行PCR擴增。

菌群高通量測序：使用2%瓊脂糖凝膠回收PCR產(chǎn)物，并進行純化洗脫和電泳檢測，利用QuantiFluorTM-ST檢測定量，根據(jù)Illumina Miseq平臺標準操作規(guī)程將純化后的擴增片段構(gòu)建完整文庫并利用Illumina Miseq平臺測序。

1.6 數(shù)據(jù)分析

利用SPSS 18.0軟件對第0、30、60和90天測定的生長性能、屠宰性能、肉品質(zhì)指標和腸道微生物菌群多樣性以及OUT值數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(One-way ANOVA)和多重比較分析(Duncan’s)。對于測序獲得的腸道微生物菌群數(shù)據(jù)，使用FastTree軟件分析群落Alpha多樣性，進一步對菌群構(gòu)成的豐度和多樣性進行評價，各組樣本的豐度值(OTU)基于加權(quán)遺傳距離矩陣(Weighted unifrac distance)進行PCoA分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 乳酸菌對蘇尼特羊生長性能的影響

為探究乳酸菌對蘇尼特羊生長性能的影響，對第30、60和90天試驗羊的活體重、增重和平均日增重進行方差分析。由表2可知，與對照組相比，試驗組第30和第90天的總增重和平均日增重顯著提高(P<0.05)，第60天時兩組的總增重和平均日增重表現(xiàn)為試驗組高于對照組(P>0.05)。

表2 乳酸菌對生長性能的影響

2.2 乳酸菌對蘇尼特羊屠宰性能的影響

為探究乳酸菌對蘇尼特羊屠宰性能的影響，對個體飼喂90天屠宰后測定的屠宰性能進行方差分析。由表3可知，試驗組的骨肉比和眼肌面積顯著高于對照組(P<0.05)，除此之外，乳酸菌對其他屠宰性能均無顯著影響(P>0.05)。

表3 乳酸菌對屠宰性能的影響

2.3 乳酸菌對蘇尼特羊肉品質(zhì)的影響

為探究乳酸菌對蘇尼特羊肉品質(zhì)的影響，對背最長肌的肉品質(zhì)指標進行測定和方差分析。由表4可知，試驗組的pH24顯著高于對照組(P<0.05)，蒸煮損失極顯著低于對照組(P<0.01)，除此之外乳酸菌對其他肉品質(zhì)指標均無顯著影響(P>0.05)。

表4 乳酸菌對肉品質(zhì)的影響

2.4 乳酸菌對蘇尼特羊腸道微生物多樣性的影響

2.4.1 α多樣性分析 由表5所示，在飼喂周期內(nèi)試驗組的Chao1和Ace指數(shù)均顯著高于對照組(P<0.05)，在飼喂第30和第90天，Shannon指數(shù)均顯著高于對照組(P<0.05)，而Simpson指數(shù)與之相反。所有樣本Coverage指數(shù)都高于99%，說明本次測序數(shù)據(jù)量足以覆蓋樣本中的絕大多數(shù)物種。

表5 腸道微生物α多樣性分析

2.4.2 β多樣性分析 為探究試驗組與對照組腸道微生物群落組成的差異性，在OTU水平，基于加權(quán)遺傳距離矩陣(Weighted Unifrac distance)進行PCoA分析。結(jié)果(圖1-A)表明，試驗組與對照組的微生物群落各聚為一類，且能夠明顯分開，表明組內(nèi)相似程度要高于組間。對試驗組的第0、30、60和90天樣品基于 OTU 水平，進行加權(quán)遺傳距離矩陣(Weighted Unifrac distance)計算和PCoA分析。由圖1-B可知，第0、30、60和90天樣品也能夠完全區(qū)分，表明飼喂乳酸菌對蘇尼特羊腸道微生物有顯著影響，并且在飼喂過程中隨著時間的變化腸道微生物也存在動態(tài)變化。

C(R)0：對照組(試驗組)第0天；C(R)1：對照組(試驗組)第30天；C(R)2：對照組(試驗組)第60天；C(R)3：對照組(試驗組)第90天C(R)0:The 0th day of the control group (test group)；C(R)1:The 30th day of the control group (test group)；C(R)2:The 60th day of the control group (test group)；C(R)3:The 90th day of the control group (test group) 圖1 基于加權(quán)遺傳矩進行PCoA分析Fig.1 PCoA analysis based on matrix calculation by Weighted UniFrac distance

2.5 乳酸菌對蘇尼特羊腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響

2.5.1 門水平上的腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)分析 在門水平上共檢測出23種微生物，主要以厚壁菌門(Firmicute)和擬桿菌門(Bacteroidetes)為主，占總菌的75%以上，其次為螺旋體門(Spirochaetes)、變形菌門(Proteobacteria)等。對相對豐度值較高的厚壁菌門、擬桿菌門、螺旋體門和變形菌門進行統(tǒng)計分析，結(jié)果如表6所示。試驗組第30和第90天厚壁菌門的豐度值顯著高于對照組(P<0.05)，而第30天擬桿菌門的豐度值和第30和第90天變形菌門豐度值顯著低于對照組(P<0.05)。

表6 門水平上的腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)分析

2.5.2 屬水平上的腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)分析 在屬水平上共檢測出375種細菌微生物，相對豐度值較高的細菌主要是瘤胃菌科_UCG_005(Ruminococcaceae_UCG_005)、瘤胃菌科_UCG_010(Ruminococcaceae_UCG_010)、擬桿菌屬(Bacteroides)、未分類毛螺菌屬(Unclassified_f__Lachnospiraceae)等。

對屬水平相對豐度值前12的物種進行統(tǒng)計分析，結(jié)果如表7所示。試驗組飼喂第30天，瘤胃菌科_UCG-010、克里斯滕森菌科_R-7群(Christensenellaceae_R-7_group)、未分類毛螺菌屬、另枝菌屬(Alistipes)、理研菌科RC9腸群(Rikenellaceae_RC9_gut_group)的豐度值均顯著高于對照組，而琥珀酸弧菌屬(Succinivibrio)的豐度值顯著低于對照組(P<0.05)。試驗組第60天，瘤胃菌科_UCG-010、未分類毛螺菌屬、普雷沃氏菌屬_1(Prevotella_1)的豐度值顯著高于對照組(P<0.05)。試驗組第90天，擬桿菌屬、另枝菌屬、普雷沃氏菌屬_1、密螺旋體屬_2(Treponema_2)的豐度值顯著高于對照組，而琥珀酸弧菌屬豐度值顯著低于對照組(P<0.05)。

表7 屬水平上的腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)分析

3 討 論

3.1 乳酸菌對蘇尼特羊生長性能的影響

飼料添加劑會塑造動物胃腸道內(nèi)的微生物菌群，影響動物的健康，并提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用。Casper等[12]給新生犢牛飼喂植物乳桿菌，提高了42 d和56 d的日增重，改善了其腸道健康和生長性能。董改香等[13]用益生菌發(fā)酵香草配合飼料飼喂育肥羊150 d，發(fā)現(xiàn)其可以顯著提高育肥羊平均日增重。王珍珊等[14]用嗜酸乳桿菌微膠囊制劑飼喂杜寒肉羊60 d，發(fā)現(xiàn)其平均日增重顯著提高。張君勝等[15]用復(fù)合芽孢桿菌制劑飼喂豬35 d后，極顯著提高了仔豬日增重。本研究發(fā)現(xiàn)，乳酸菌顯著提高了蘇尼特羊30和90 d的總增重和平均日增重。乳酸菌會通過發(fā)酵碳水化合物形成乳酸，在厭氧環(huán)境中激發(fā)胃蛋白酶并分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等活性物質(zhì)[16]以及產(chǎn)生必需氨基酸和維生素等多種有機物質(zhì)[17]，從而調(diào)節(jié)動物腸道的pH使腸道區(qū)系處于動態(tài)平衡，影響蘇尼特羊腸道微生物群落結(jié)構(gòu)，促進對不同食物的消化和吸收，提高了蘇尼特羊生長性能[18]。動物一般的生長規(guī)律是隨著年齡的增長，體重等各身體要素都會不斷增加，直到達到一定程度，在本研究的飼喂周期中，隨著月齡的增加，蘇尼特羊體重、增重和平均日增重也不斷增加，直到達到一定階段后保持一個相對穩(wěn)定的水平。

3.2 乳酸菌對蘇尼特羊屠宰性能的影響

動物的日常飼養(yǎng)管理水平、日齡、環(huán)境和飼糧添加劑等可直接影響畜禽的屠宰性能，進而影響到養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益。張?zhí)礻朳19]研究發(fā)現(xiàn)，乳酸菌能提升生長育肥豬的眼肌面積。侯改鳳等[20]通過研究也發(fā)現(xiàn)，飼喂乳酸菌有提高眼肌面積的趨勢，眼肌面積的大小與肉用羊胴體品質(zhì)的優(yōu)劣呈正相關(guān)。本試驗結(jié)果亦表明，乳酸菌可顯著提高蘇尼特羊的骨肉比和眼肌面積。這可能由于乳酸菌在厭氧環(huán)境下會利用碳水化合物產(chǎn)生乳酸等多種活性物質(zhì)促進了脂肪分解，抑制了糖類物質(zhì)的氧化，從而提高了屠宰性能。

3.3 乳酸菌對蘇尼特羊肉品質(zhì)的影響

肌肉pH可以反映宰后肌肉糖酵解的程度，其與肉的色澤、嫩度、適口性和持水能力等特性密切相關(guān)[21]。正常宰后肌肉的pH0在6～7，pH24為5.7左右。本試驗中蘇尼特羊肌肉的pH0和pH24均在正常范圍內(nèi)，且試驗組的pH24顯著高于對照組，這可能是因為添加乳酸菌后提高了肌肉中抗氧化活性以及減弱了肌肉細胞的無氧酵解，能夠有效避免產(chǎn)生PSE或酸性肉[22]。蒸煮損失率通常能間接反映肌肉的持水能力，剪切力則是評估肉類嫩度的最常用指標。本研究中試驗組的蒸煮損失極顯著低于對照組，這與Dowarah等[23]和羅鵬等[24]研究發(fā)現(xiàn)日糧補充乳酸菌后提高動物肌肉的持水能力和改善肉的嫩度結(jié)果相一致。乳酸菌會影響腸道中微生物多樣性和菌群結(jié)構(gòu)，提高畜禽對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，并促進了肌纖維類型的轉(zhuǎn)化，進而改善肉品質(zhì)。

3.4 乳酸菌對蘇尼特羊腸道微生物多樣性的影響

在哺乳動物的生命過程中，腸道微生物菌群始終處于動態(tài)變化中，并隨著外界環(huán)境、飲食或年齡的改變，腸道的平衡區(qū)系也隨之改變。已有研究表明生長性能與腸道菌群的多樣性呈顯著正相關(guān)，并表明通常高豐富度的微生物群落能夠使宿主更好的發(fā)揮腸道功能，更高效地消化分解攝入的食物[25]。本研究發(fā)現(xiàn)飼喂乳酸菌顯著提高了腸道微生物的均勻度和豐富度，說明添加乳酸菌可通過改善腸道微生物進而提高生長性能和屠宰性能。飼喂周期內(nèi)第30天時多樣性最高，這可能是由于外界環(huán)境的變化和飼料變更導(dǎo)致腸道菌群體系發(fā)生變化，30 d后腸道微生物多樣性趨于平衡和穩(wěn)定。陳寶劍等[26]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，仔豬斷奶后隨著日齡的不斷增加，腸道微生物多樣性趨于穩(wěn)定。并且飼喂過程中腸道微生物存在動態(tài)變化，這與王磊等[27]和劉韶娜等[28]的研究結(jié)果一致。通過PCoA分析發(fā)現(xiàn)，兩組間樣品明顯成分組聚類，在飼喂周期內(nèi)各階段的樣品也能夠完全區(qū)分，說明這兩組的菌群分別具有較高的穩(wěn)定性且在微生物結(jié)構(gòu)上具有較大差異，而且隨著日齡和飲食的變更，蘇尼特羊腸道微生物區(qū)系也在不斷的建立與完善。

3.5 乳酸菌對蘇尼特羊腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)的影響

厚壁菌門和擬桿菌門是動物腸道中重要微生物。在門水平上，蘇尼特羊胃腸道中厚壁菌門和擬桿菌門為優(yōu)勢菌門，占75%以上，且厚壁菌門的豐度值高于擬桿菌門，這與Wang等[29]和曾燕等[30]的研究結(jié)果相同。飼喂乳酸菌后厚壁菌門的豐度值升高，有利于幫助腸道降解纖維，分解代謝蛋白質(zhì)和脂肪，產(chǎn)生更多的短鏈脂肪酸和脂質(zhì)產(chǎn)物，促進機體脂質(zhì)的沉積[31]。Turnbaugh等[32]研究發(fā)現(xiàn)體格較小的小鼠腸道中擬桿菌門豐度值較高，而強壯的小鼠腸道中則富含厚壁菌門，這與本研究的結(jié)果一致，即試驗組的增重量高于對照組。因此，通過調(diào)控腸道微生物中厚壁菌門和擬桿菌門的比例可有利于增加動物的生長性能。變形菌門是腸道的主要病原菌，可引起動物腹瀉等腸道疾病，也是鑒定哺乳動物腸道健康的關(guān)鍵標志，其數(shù)量與腸道健康狀態(tài)成反比[33]。本研究中飼喂乳酸菌后變形菌門的相對豐度逐漸降低，進一步表明添加乳酸菌可能會抑制腸道致病菌，改善腸道環(huán)境，降低蘇尼特羊腸道患病的風(fēng)險，這與Li等[34]的研究結(jié)果一致，其表明飼喂小鼠枯草芽孢桿菌，變形菌門的豐富度下降，厚壁菌門的豐富度升高。

在屬水平上，試驗組中的瘤胃菌科_UCG-010顯著高于對照組。反芻動物能夠高效利用纖維性飼料作為其主要能量來源，其主要的原因是通過瘤胃微生物對纖維性飼料進行降解與轉(zhuǎn)化，其中最主要的纖維分解菌之一就是瘤胃菌科。瘤胃菌科幫助宿主降解飲食中的半纖維素和纖維素等難消化碳水化合物，產(chǎn)生機體和上皮組織的重要營養(yǎng)物質(zhì)短鏈脂肪酸，比如丁酸[35]。丁酸已被證明對哺乳動物的腸道發(fā)育和維持腸道健康有益，并具有免疫防御功能，產(chǎn)生丁酸的主要細菌是厭氧菌，而腸道中較低的氧氣濃度為厭氧菌創(chuàng)造了有利環(huán)境，同時，被上皮吸收和代謝的丁酸可以消耗腸道中氧氣，從而穩(wěn)定缺氧誘導(dǎo)因子(HIF，一種協(xié)調(diào)屏障保護的轉(zhuǎn)錄因子)，保護上皮的屏障功能[36]。試驗組中瘤胃菌科的豐度顯著提高，表明蘇尼特羊?qū)χ参锒嗵堑姆纸庑侍岣?，產(chǎn)生較多的丁酸，維持腸道健康。

另枝菌屬屬于理研菌科，本研究中試驗組的豐度顯著高于對照組(P<0.05)。目前，另枝菌屬作為生物腸道微生物的優(yōu)勢菌，研究證實三葉鬼針草作為益生元，可提高該菌的相對豐度，改善了雞群健康；飼料添加殼寡糖可提高該菌相對豐度，改善了抗生素處理導(dǎo)致的雞腸道微生物區(qū)系紊亂。理研菌科RC9腸群也是理研菌科重要的種屬，其在脂肪沉積中起到重要作用。王柏輝等[37]研究表明理研菌科RC9腸群與肌肉中亞麻酸代謝有密切聯(lián)系。趙彥光等[38]證實了乳酸菌的添加顯著提高了豬腸道中抗病菌理研菌科RC9腸群的相對豐度，提高腸道菌群對纖維的消化作用，與本研究結(jié)果一致。

普雷沃氏菌屬_1屬于革蘭陰性桿菌，專性厭氧菌，具有獨特的粘蛋白糖蛋白降解能力，可降解半纖維素和木聚糖等多類營養(yǎng)物質(zhì)[39]。有研究表明普雷沃氏菌屬在人體腸道中是條件致病菌，與牙周炎和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等多種炎癥性疾病有關(guān)[40-41]，這可能是動物體的差異和遺傳背景不同而發(fā)揮不同的生理作用。本試驗飼喂后期，試驗組普雷沃氏菌屬_1的豐度顯著高于對照組，這與劉穎等[42]的研究結(jié)果一致。隨著日齡的增加，豬飼料中粗纖維含量與腸道中普雷沃氏菌屬豐度呈正相關(guān)。因此，在動物腸道內(nèi)普雷沃氏菌屬的增加可能會更好的消化分解纖維，促進機體吸收營養(yǎng)物質(zhì)。

變形菌門中的兩個典型致病菌彎曲菌屬和脫硫弧菌屬，本研究中兩組間雖無顯著性差異，但試驗組整體低于對照組，說明乳酸菌的添加可以抑制腸道致病菌的生長。謝明欣等[43]研究也發(fā)現(xiàn)，在綿羊日糧中添加乳酸菌，可提高胃腸道中有益菌數(shù)量，降低致病菌數(shù)量，這與本試驗結(jié)果一致。

綜上，乳酸菌的添加顯著提高了蘇尼特羊腸道微生物的多樣性和均勻度，以及厚壁菌門、瘤胃菌科_UCG-010、理研菌科RC9腸群和普雷沃氏菌屬_1的豐度，從胃腸道菌群角度驗證了乳酸菌改善蘇尼特羊增重的結(jié)果。

4 結(jié) 論

飼喂乳酸菌后，蘇尼特羊在生長性能方面增重量顯著增加；在屠宰性能方面提高了骨肉比和眼肌面積；在肉品質(zhì)方面，提高了pH24，極顯著降低了蒸煮損失；在腸道微生物方面，乳酸菌明顯改善了蘇尼特羊腸道微生物的結(jié)構(gòu)和多樣性，在門水平上，增加了腸道中厚壁菌門的數(shù)量，降低了變形菌門的數(shù)量，在屬水平上，提高了腸道中瘤胃菌科_UCG-010、理研菌科RC9腸群和普雷沃氏菌屬_1的豐度。綜上所述，日糧添加乳酸菌對提升蘇尼特羊生長性能、屠宰性能、改善腸道微生物組成和肉品質(zhì)具有積極影響，在乳酸菌飼料開發(fā)和改善舍飼羊生產(chǎn)性能上具有重要意義。