張利婷，王許平，石換麗，趙 麗，吳金芳，李歡歡

(1.河北省邯鄲市第一醫(yī)院手術(shù)室,河北 邯鄲 056002；2.河北省邯鄲市第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，河北 邯鄲 056002；3.河北省邯鄲市第一醫(yī)院老年病科，河北 邯鄲 056002；4.河北省邯鄲市第一醫(yī)院心內(nèi)一科，河北 邯鄲 056002)

宮頸癌是最為常見的婦科惡性腫瘤，發(fā)病率在女性生殖道惡性腫瘤的首位，最近幾年的數(shù)據(jù)顯示宮頸癌有年輕化趨勢[1]。有研究表示，高危型人乳頭瘤病毒與宮頸癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，還與個人因素、環(huán)境等因素具有密切聯(lián)系，可以通過體檢、定期篩查及時發(fā)現(xiàn)癌前期的病變情況[2]。由于宮頸癌的前期幾乎沒有任何癥狀，很難發(fā)現(xiàn)，但是在婦科檢查時，會隨著病情的發(fā)展，女性會出現(xiàn)在陰道分泌物增多以及陰道出血等表現(xiàn)出來[3]?，F(xiàn)有的治療方法有化療、放療、手術(shù)，定期的進(jìn)行檢查可有效的改善預(yù)后效果[4]。宮頸癌引起的因素主要是性傳播疾病、經(jīng)期延長、多產(chǎn)、早育、早婚、抽煙、長期口服避孕藥、免疫缺陷與抑制、其他病毒感染、衛(wèi)生習(xí)慣不良等。目前臨床常用的治療宮頸癌的手段包括放療、手術(shù)、化療等，烏苯美司具有提升機(jī)體免疫力的作用，常用于放療、化療的輔助治療，但是目前國內(nèi)外關(guān)于烏苯美司聯(lián)合放療治療宮頸癌的研究還鮮有報道。本研究使用烏苯美司膠囊聯(lián)合放療對宮頸癌患者進(jìn)行治療，觀察效果。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年6月—2018年6月在我院收治的宮頸癌病患60例作為研究對象，隨機(jī)法將所有宮頸癌患者隨機(jī)分為放療治療組和烏苯聯(lián)合組各30例，放療治療組：年齡25～36歲，平均(28.97±2.23)歲，TNM分期：Ⅲ期14例，Ⅳ期16例；烏苯聯(lián)合組年齡26～37歲，平均(29.92±5.23)歲，TNM分期：Ⅲ期16例，Ⅳ期14例；2組宮頸癌患者在以上所述等資料中比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)(批準(zhǔn)號：(2017)倫審第(58)號)，所有研究對象及家屬均簽署了知情同意書。

診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合《國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)2018癌癥報告:宮頸癌新分期及診治指南》[5]對宮頸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；患者均表現(xiàn)為不規(guī)則陰道流血及排液、下腹疼痛等癥狀。

排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重內(nèi)科疾病患者、膀胱障礙者、其他惡性腫瘤、癌癥晚期、盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、合并其他傳染性疾病、合并其他急性疾病、依從性差。

1.2治療方法 放療治療組在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上進(jìn)行放療治療：盆腔基本照射野采用6MVX線前后兩野對穿照射，下界位于閉孔下緣水平，上界位于第4、第5腰椎水平，兩側(cè)緣位于真骨盆最大徑旁開2 cm，放射位置包括：兩側(cè)盆壁、殘端、骼總、骶前淋巴結(jié)，放療的劑量是45 Gy。烏苯聯(lián)合組在放療治療組的基礎(chǔ)上采用烏苯美司膠囊治療：在放療治療的同時給予患者烏苯美司膠囊(浙江普洛康裕制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字：Z20040086，規(guī)格：10 mg×15粒/盒)治療，10 mg/次，3次/d，分早中晚進(jìn)行服用，2組患者均連續(xù)治療6周，觀察效果。

1.3觀察指標(biāo)

1.3.1黏液法檢測癌細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)水平 使用干凈的棉簽擦拭宮頸周圍以及宮頸周圍的黏液，使用取樣器入宮頸外口1～1.5 cm，然后以順時針的方向轉(zhuǎn)3圈，然后將已經(jīng)收集的取樣器和所采集的標(biāo)本放在試管中，檢測人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(human telomerase reverse transcriptase，hTERT)、人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)結(jié)果。

1.3.2RT-PCR法檢測癌細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá) 抽取兩組患者空腹靜脈血3 mL，離心半徑5 cm,平均30 s轉(zhuǎn)速3 000 r離心處理10 min，分離上層血清，在-60 ℃的環(huán)境下保存?zhèn)溆?。將血液放在不加抗凝劑的試管中，血液凝固將血清吸出。隨后將血液放在乙二胺四乙酸的試管中以后將血漿吸出。采集完成后馬上進(jìn)行檢測，將抽取血放在取血器后加緩沖液，混勻60 s后滴至試劑卡三滴，插入試劑卡等待50 s，就可以出來活化的蛋白激酶C受體1(Receptor for activated C kinase1,RACK1)、微小RNA-198(microrna-198，miR-198)、微小RNA-329-3p(microrna-329-3p，miR-329-3p)、Ⅱ類反式激活因子(class Ⅱ transactivators，CⅡTA)、溶酶體巰基還原酶(lysosomal thiol reductase，GILT)、天冬酰胺內(nèi)肽酶(legumain，LGMN)的檢測結(jié)果。反應(yīng)體系：8 μL cDNA模板、10 μL SYBRP Green mix、2 μL PCR Primer mix。反應(yīng)條件：95 ℃ 10 min；95 ℃ 10 s；60 ℃ 1 min；40個循環(huán)。以β-actin為內(nèi)參，采用2-△△Ct方法計算RACK1、miR-198、miR-329-3p、CⅡTA、GILT、LGMN表達(dá)。

1.3.3FACT-G評分、FACT-Cx評分檢測 癌癥患者生命質(zhì)量測定量表(functional assessmentof cancer therapy-gauge，F(xiàn)ACT-G)[6]評分內(nèi)容有：生理狀況、功能狀況、家庭、社會狀況、情感狀況，總分108分，得分越高說明患者生活質(zhì)量越好。根據(jù)宮頸癌量表(functional assessment of cancer therapy-cervix，F(xiàn)ACT-Cx)[7]評分內(nèi)容有：情感狀況、生理狀況、功能狀況、臨床分期、家庭社會狀況、婚姻狀況等，共計42條目，總分168分，得分越高說明患者病情改善效果越好。

1.3.4酶聯(lián)免疫吸附法腫瘤標(biāo)志物水平 1∶2稀釋標(biāo)準(zhǔn)品后加入反應(yīng)孔中，37 ℃恒溫孵育箱(北京福意電器有限公司，型號：FYL-YS-50-1028L)中濕育2 h；洗板后加入1∶100倍稀釋后的抗體工作液100 μL/孔，37 ℃恒溫孵育箱中濕育45 min；洗板后反應(yīng)孔內(nèi)添加TMB溶液，37 ℃恒溫孵育箱中濕育45 min添加終止液終止反應(yīng)，使用酶標(biāo)分析儀(上海酶聯(lián)生物科技有限公司，型號：ML-dr3518)檢測450 nm處的吸光度值，檢測糖鏈抗原724(carbohydrate antigen 724，CA724)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(squamous cell carcinoma associated antigen，SCC-Ag)水平。

1.3.5臨床療效評價 依據(jù)WHO標(biāo)準(zhǔn)[8]將臨床療效分為：完全緩解、部分緩解、穩(wěn)定、進(jìn)展。完全緩解：宮頸癌腫瘤完全消失；部分緩解：宮頸癌中腫瘤縮小一半以上；穩(wěn)定：宮頸癌中腫瘤縮小或者增大不超過腫瘤本身的25%，且沒有新病灶的出現(xiàn)；進(jìn)展：宮頸癌中的腫瘤縮小或者增大超過腫瘤本身的25%，且有新病灶的出現(xiàn)(有效為有效緩解+部分緩解)。

1.3.6不良反應(yīng)情況比較 比較2組在治療宮頸癌過程中患者出現(xiàn)反胃、掉發(fā)、出汗等不良反應(yīng)情況。

1.3.7生存周期比較 在患者治療結(jié)束后行為期2年的隨訪，比較2組中位生存期、生存率。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 26.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料比較采用配對t檢驗(yàn)和獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1癌細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)水平比較 2組治療前患者HPV、hTERT水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后2組HPV、hTERT水平低于治療前，且烏苯聯(lián)合組HPV、hTERT水平低于放療治療組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 癌細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)水平比較Table 1 Comparison of cancer cell-related indicators

2.2腫瘤細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)表達(dá)與宮頸癌緩解程度的關(guān)系 2組治療前RACK1、miR-198、miR-329-3p表達(dá)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后的miR-198、RACK1低于治療前，miR-329-3p評分高于治療前，且烏苯聯(lián)合組的miR-198、RACK1低于放療治療組，miR-329-3p高于放療治療組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 腫瘤細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)表達(dá)與宮頸癌緩解程度的關(guān)系Table 2 The relationship between expression of tumor cell-related indicators and the degree of cervical cancer remission

2.3癌變相關(guān)指標(biāo)水平比較 2組治療前CⅡTA、GILT、LGMN水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后的CⅡTA、GILT低于治療前，LGMN高于治療前，且烏苯聯(lián)合組的CⅡTA、GILT低于放療治療組，LGMN高于放療治療組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 癌變相關(guān)指標(biāo)水平比較Table 3 Comparison of cancer-related indicators

2.4FACT-G評分及FACT-Cx評分比較 2組治療前FACT-G、FACT-Cx評分比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后的FACT-G、FACT-Cx評分低于治療前，且烏苯聯(lián)合組的FACT-G、FACT-Cx評分低于放療治療組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 FACT-G評分及FACT-Cx評分比較Table 4 Comparison of FACT-G score and FACT-Cx score 分)

2.5腫瘤標(biāo)志物相關(guān)指標(biāo)水平比較 2組治療前CA724、CEA、SCC-Ag比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；治療后的CA724、CEA、SCC-Ag低于治療前，且烏苯聯(lián)合組的CA724、CEA、SCC-Ag低于放療治療組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表5。

表5 腫瘤標(biāo)志物相關(guān)指標(biāo)水平比較Table 5 Comparison of the levels of tumor markers

2.62組臨床療效比較 烏苯聯(lián)合組的治療總有效率高于放療治療組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表6。

表6 2組臨床療效比較Table 6 Comparison of clinical efficacy between two groups (n=30,例數(shù),%)

2.72組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較 2組不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表7。

表7 2組不良反應(yīng)發(fā)生情況比較Table 7 Comparison of adverse reactions between two groups (n=30,例數(shù),%)

2.82組患者生存周期比較與放療治療組比較 烏苯聯(lián)合組中位生存期、生存率均較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表8，圖1。

表8 2組生存周期比較Table 8 Comparison of life cycle between two groups (n=30)

圖1 2組患者生存周期

3 討 論

宮頸癌是最常見的婦科腫瘤，目前常通過手術(shù)、化療、放療等手段進(jìn)行治療，手術(shù)治療是比較常用的治療方法，對于比較年輕且還有生育要求的患者可以進(jìn)行保留子宮且宮頸切除的手術(shù)，但是手術(shù)治療不是所有患者都可以接受的。放療可以通過放射線進(jìn)行治療，化療可通過一些化學(xué)藥物做輔助[9-10]。

在邢海洋等[11]研究中發(fā)現(xiàn)，放療時大量的輻射產(chǎn)生的能量可以破壞掉細(xì)胞的染色體，可以使細(xì)胞停止生長，起到快速消滅生長以及分裂的癌細(xì)胞。在部分研究中發(fā)現(xiàn)，放療是一種最為常見的輔助治療以及直接治療癌癥的方法，不同的腫瘤組織以及組織器官在受到放療照射后會出現(xiàn)不同的變化，由于不同的腫瘤組織以及組織器官所以反應(yīng)程度也會不一樣。細(xì)胞分化程度越高放療的敏感度會越低，如果細(xì)胞分化程度越低放療的敏感度會越高。本研究發(fā)現(xiàn)，與單純應(yīng)用放療治療的宮頸癌患者相比，應(yīng)用放療聯(lián)合烏苯美司膠囊治療的宮頸癌患者治療效果更加理想?？赡苁且?yàn)?，烏苯美司膠囊可競爭性地抑制氨肽酶N及亮氨酸肽酶，增強(qiáng)T細(xì)胞的功能，使NK細(xì)胞的殺傷活力增強(qiáng)，可使集落刺激因子合成增加而刺激骨髓細(xì)胞的再生及分化[12]。除此之外，烏苯美司膠囊還可干擾腫瘤細(xì)胞的代謝，抑制腫瘤細(xì)胞增生，使腫瘤細(xì)胞凋亡，并激活人體細(xì)胞免疫功能，刺激細(xì)胞因子的生成和分泌，促進(jìn)抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞的產(chǎn)生和增殖，從而對宮頸癌患者發(fā)揮較理想的治療效果。

HPV是一種球形的DNA病毒，可以引起皮膚黏膜的鱗狀上皮增殖，HPV屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬，一般會變現(xiàn)在生殖器疣、尋常疣等病癥[13-14]。有研究表示，HPV是具有較高的傳染性的，主要傳播的途徑是通過間接接觸、母嬰傳播、性傳播、醫(yī)源性傳播、密切接觸等。發(fā)病的部位主要是皮膚黏膜，主要常見的癥狀也比較多，比如菜花狀、雞冠狀、顆粒狀、甲周疣等[15-16]。有研究表示，hTERT是一種在細(xì)胞內(nèi)與癌變密切相關(guān)的一種逆轉(zhuǎn)錄酶[17]。本研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者HPV、hTERT水平較高，使用放療聯(lián)合烏苯美司膠囊治療的宮頸癌患者HPV、hTERT水平明顯下降，說明該治療方案的應(yīng)用能夠抑制HPV、hTERT水平，出現(xiàn)這一研究結(jié)果的原因可能是放療時癌組織縮小，使用烏苯美司膠囊聯(lián)合治療，起到促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，提升患者免疫力的作用。

宮頸癌新的腫瘤標(biāo)志物，都是可以作為宮頸癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[18]。經(jīng)徐雪翔[19]研究發(fā)現(xiàn)，RACK1蛋白可以通過激活PKC來促進(jìn)腫瘤的多種細(xì)胞和侵襲轉(zhuǎn)移的功能。miR-198是一類癌癥抑制基因，宮頸癌中的細(xì)胞增殖的速度會出現(xiàn)明顯的變化，經(jīng)朱利紅等[20]研究中發(fā)現(xiàn)，miR-198可以抑制宮頸癌細(xì)胞的侵襲，并且誘導(dǎo)宮頸癌細(xì)胞的凋亡，可以為宮頸癌的治療提供新的靶向。miR-329-3p目前關(guān)于miR-329-3p在宮頸癌中的研究證明比較少，但是miR-329-3p與宮頸癌患者的預(yù)后還是有關(guān)系的，可以將miR-329-3p作為宮頸癌患者預(yù)后的一種指標(biāo)[21]。本研究顯示，使用放療聯(lián)合烏苯美司膠囊治療的宮頸癌患者RACK1、miR-198、miR-329-3p、CⅡTA、GILT、LGMN、CA724、CEA、SCC-Ag表達(dá)水平受到明顯調(diào)控，其原因可能是，使用放療聯(lián)合烏苯美司膠囊治療，能夠干擾腫瘤細(xì)胞的代謝，抑制癌組織的增生、發(fā)展，從而發(fā)揮治療效果。

本研究也存在一定的局限性，本研究選取病例數(shù)較少，且對患者隨訪時間較短，對遠(yuǎn)期療效研究的指導(dǎo)意義有所欠缺。下一步研究需增加樣本量，延長對患者隨訪時間，研究該治療方案對宮頸癌患者的治療效果。

綜上所述，烏苯美司膠囊聯(lián)合放療治療的效果可顯著改善宮頸癌患者體內(nèi)的RACK1、miR-198、miR-329-3p水平，并改善臨床癥狀，對宮頸癌有良好的療效。促進(jìn)臨床癥狀恢復(fù)，效果顯著。