樊瑩潤(rùn)，鄭婷婷，劉琨毅，沈曉靜，李澤林，谷大海，王雪峰，肖智超，范江平*

（1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明 650201；2.滇西應(yīng)用技術(shù)大學(xué)普洱茶學(xué)院，云南 普洱 665000；3.宜賓職業(yè)技術(shù)學(xué)院五糧液技術(shù)與食品學(xué)院，四川 宜賓 644003）

近年來(lái)隨著人們生活水平的提高，膳食中高蛋白、高脂肪類(lèi)物質(zhì)攝入量的加大，導(dǎo)致腸道發(fā)生功能紊亂，尤其是便秘現(xiàn)象，在中老年人中尤為突出。造成便秘的原因很多，包括膳食纖維攝入不足、飲食結(jié)構(gòu)不合理、水分?jǐn)z入不足、缺乏鍛煉等[1]。便秘容易導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)各種問(wèn)題，如心腦血管疾病、腸胃功能紊亂、癌癥等[2]，有研究表明結(jié)腸癌、直腸癌的發(fā)生與致癌物質(zhì)在腸道內(nèi)停留時(shí)間和腸壁接觸時(shí)間有很大關(guān)系[3]。目前關(guān)于便秘的治療主要有瀉藥、滲透劑和潤(rùn)滑劑、中草藥等，這些藥物可能對(duì)腸道有一定的刺激性、或是容易破壞腸道菌群平衡[4-5]。目前科研人員發(fā)現(xiàn)通過(guò)調(diào)節(jié)飲食結(jié)構(gòu)、加大對(duì)膳食纖維和多糖類(lèi)物質(zhì)的攝入量，可以較好地干預(yù)便秘。多糖進(jìn)入機(jī)體后雖然很難被消化道所消化，但可被大腸中腸道菌群利用。在大腸中，多糖類(lèi)物質(zhì)具有黏度高、膨脹性強(qiáng)等特點(diǎn)，可以促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，加快腸道中代謝物質(zhì)運(yùn)輸，減少食物在腸道中停留時(shí)間。另一方面多糖在腸道中被微生物利用，產(chǎn)生水分，可以增加糞便的持水性，軟化糞便，起到通便的作用；還可產(chǎn)生短鏈脂肪酸，使腸道內(nèi)環(huán)境pH值降低，為有益菌群生長(zhǎng)提供良好的環(huán)境[6]。同時(shí)，多糖還能起到清潔腸道的作用，防止有毒物質(zhì)在腸道內(nèi)堆積[7]。Niu等[8]對(duì)垂絲海棠花多糖改善功能性便秘進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)該多糖能顯著增高6 h便粒重、結(jié)腸含水率，可以有效改善功能性便秘。Xin等[9]對(duì)金針菇多糖改善便秘進(jìn)行研究，結(jié)果表明該多糖可以改善胃腸功能，促進(jìn)便秘患者胃腸蠕動(dòng)。另外有研究表明，多糖（如平菇多糖[10]、紅樹(shù)霉多糖[11]、木耳多糖[12]等）可以對(duì)小鼠血清中一些指標(biāo)產(chǎn)生影響，尤其是脂類(lèi)指標(biāo)甘油三酯（triglyceride，TG）、總膽固醇（total cholesterol，CHOL）、低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C），血清脂類(lèi)的降低可能是菌群平衡被調(diào)節(jié)導(dǎo)致，攝入多糖有利于預(yù)防心血管疾病。

牛肝菌是牛肝菌科（Boletaceae）和松塔牛肝菌科（Strobilomycetaceae）真菌的統(tǒng)稱(chēng)，中國(guó)已發(fā)現(xiàn)具菌管或菌褶的牛肝菌目種類(lèi)有390種以上，其中199種可食用，因其含有豐富的多糖，而被廣泛研究[13]。目前牛肝菌科中研究較多菌類(lèi)主要有小美牛肝菌、白牛肝菌、皺蓋疣柄牛肝菌、美味牛肝菌等。研究方向主要包括結(jié)構(gòu)表征、抗氧化、抗腫瘤、肝損傷等方面。黃皮疣柄牛肝菌又稱(chēng)黃癩頭[Leccinellum crocipodium（Letellier.）Watiog]，屬真菌界（Fungi），擔(dān)子菌門(mén)（Basidiomycota），傘菌綱（Agaricomycetes），牛肝菌目（Boletales），牛肝菌科（Boletaceae），疣柄牛肝菌屬（Leccinellum），菌肉細(xì)嫩、味道鮮美[14]，廣泛分布于河北、吉林、黑龍江、江蘇、安徽、浙江、陜西、青海、四川、云南等省區(qū)[15]。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)黃皮疣柄牛肝菌活性成分的研究主要集中在體外試驗(yàn)，包括多糖[16]和多酚[17]的提取及抗腫瘤[14]、抗氧化活性[18-19]、免疫活性[20]等，研究結(jié)果表明黃皮疣柄牛肝菌多酚能抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，黃皮疣柄牛肝菌多糖具有較好的抗氧化活性和免疫活性。而關(guān)于黃皮疣柄牛肝菌多糖對(duì)通便作用及血清指標(biāo)影響的研究鮮見(jiàn)報(bào)道，因此本研究對(duì)黃皮疣柄牛肝菌多糖進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，研究其對(duì)健康小鼠的通便作用及對(duì)小鼠血清中的蛋白類(lèi)、脂質(zhì)類(lèi)和葡萄糖等物質(zhì)代謝的影響，為其在食品及醫(yī)藥領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

新鮮黃皮疣柄牛肝菌：云南易門(mén)康源菌業(yè)有限公司（產(chǎn)自楚雄彝族自治州南華縣），經(jīng)昆明食用菌研究所吳素蕊研究員鑒定為黃皮疣柄牛肝菌。

AB-8大孔樹(shù)脂：河北美凱化工有限公司；鹽酸、濃硫酸、氯仿：成都市科隆化學(xué)品有限公司；氫氧化鈉、葡萄糖、磷酸、正丁醇、苯酚：天津風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司；無(wú)水乙醇：四川西隴科學(xué)有限公司；牛血清蛋白、透析袋MD34（7000D）：上海源葉生物科技有限公司；考馬斯亮藍(lán)G-250：昆明杰輝生物有限公司；四硼酸鈉、咔唑、D-半乳糖醛酸：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。以上試劑均為分析純。

1.2 儀器設(shè)備

HWS28型電熱恒溫水浴鍋、DHG-9140A型電熱鼓風(fēng)干燥箱：上海一恒科技有限公司；RE-2000A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海亞榮生化儀器廠(chǎng)；H2-16KR型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)：湖南可成儀器設(shè)備有限公司；SCIENTZ-18N型冷凍干燥機(jī)：寧波新芝生物科技股份有限公司；TU-1810型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；PHS-3C型pH計(jì)：上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 黃皮疣柄牛肝菌多糖（polysaccharides of Leccinellum crocipodium（Letellier.）Watliag，LCP）提取

黃皮疣柄牛肝菌洗凈、切片、凍干、打粉過(guò)80目篩后，采用熱水法提取黃皮疣柄牛肝菌多糖，按料液比34∶1（mL/g）混勻，51 ℃水浴 3.1 h，離心 4 000 r/min 得到提取液，在50℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/5，加入4倍體積的無(wú)水乙醇（需要緩慢邊攪拌邊加入），置于4℃冰箱中靜置過(guò)夜，離心4 000 r/min，取沉淀用適量的去離子水溶解，得到多糖溶液，冷凍干燥后，得到粗多糖。配制2 mg/mL的粗多糖溶液100 mL，添加7 g大孔樹(shù)脂后，放入53.3℃、130 r/min的恒溫振蕩箱中振蕩5.3 h，以達(dá)到脫色的效果。過(guò)濾得到濾液，50℃進(jìn)行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至原體積的1/2，按sevage溶液（氯仿∶正丁醇=4∶1）與多糖溶液的體積比為1∶4，與多糖溶液混合，劇烈振蕩20 min，4 000 r/min離心，取上層水層，重復(fù)此步操作，直至沒(méi)有白色蛋白沉淀層產(chǎn)出為止，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮去除有機(jī)溶劑，透析48 h，冷凍干燥得到精多糖LCP[18-19]。

1.3.2 黃皮疣柄牛肝菌多糖理化性質(zhì)測(cè)定

多糖含量測(cè)定[21]采用苯酚-硫酸法繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，回歸方程為y=0.007 1x-0.001 5，R2=0.998 9，其中y為490 nm下的吸光值A(chǔ)，x為葡萄糖濃度（mg/mL）。

糖醛酸測(cè)定[22-23]采用咔唑-硫酸比色法繪制糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，回歸方程為y=4.611 2x-0.004 4，R2=0.995 0，其中y為523 nm下的吸光值A(chǔ)，x為糖醛酸濃度（mg/mL）。

蛋白含量測(cè)定[24]采用考馬斯亮藍(lán)法繪制蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，回歸方程為y=0.002 2x-0.001，R2=0.998 4，其中y為595 nm下的吸光值A(chǔ)，x為蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（g/mL）。

1.3.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

1.3.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

實(shí)驗(yàn)小鼠（4周齡健康雄性BALB/C小鼠）∶昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，許可證編號(hào)為SCXK（滇）K2020-0004。體重 16 g～18 g，適應(yīng)性飼養(yǎng) 7 d，隨機(jī)分為6組，每組12只。

1.3.3.2 藥劑量及實(shí)驗(yàn)方案

實(shí)驗(yàn)分為空白組、陽(yáng)性對(duì)照低聚果糖組、LCP低、中、高劑量組?？瞻捉M每天按10 mL/kg灌胃去離子水，共30 d；低聚果糖組：按80 mg/kg灌胃，共30 d；LCP 低、中、高劑量組，每天按 40、80、160 mg/kg灌胃，共30 d。灌胃結(jié)束后，采集小鼠糞便進(jìn)行含水量、pH值測(cè)定，同時(shí)對(duì)小鼠排便時(shí)間、小腸蠕動(dòng)功能、血清生理指標(biāo)、結(jié)腸指數(shù)、結(jié)腸長(zhǎng)度進(jìn)行測(cè)定。

1.3.3.3 小鼠體重的測(cè)定

每天灌胃前對(duì)小鼠進(jìn)行稱(chēng)重并記錄，確保小鼠的灌胃劑量正確。

1.3.3.4 小鼠糞便水分含量測(cè)定

灌胃30 d后，對(duì)小鼠進(jìn)行采便，將小鼠糞便稱(chēng)重后放進(jìn)（105±2）℃的烘箱中，每隔1 h稱(chēng)重1次，記錄放入烘箱前后的質(zhì)量差。操作重復(fù)幾次，直到糞便質(zhì)量差小于0.001 g。

式中：m1為糞便濕重，g；m2為糞便干重，g。

1.3.3.5 小鼠糞便pH值測(cè)定

灌胃30 d后，對(duì)小鼠進(jìn)行采便，將小鼠糞便稱(chēng)重后用1∶10（質(zhì)量比）的去離子水稀釋?zhuān)缓笫褂胮H計(jì)測(cè)量pH值。

1.3.3.6 小鼠排便時(shí)間測(cè)定

小鼠灌胃30 d后，斷食6 h，形成空腹?fàn)顟B(tài)，分別給5組小鼠灌胃黑色墨汁，同時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)。觀(guān)察小鼠的排便情況，當(dāng)?shù)谝涣Ｓ猩S便出現(xiàn)時(shí)記錄此刻經(jīng)歷的時(shí)間，即為小鼠的排便時(shí)間。

1.3.3.7 小鼠小腸蠕動(dòng)功能的測(cè)定

小鼠斷食6 h，形成空腹?fàn)顟B(tài)，灌胃黑色墨汁后計(jì)時(shí)，第15 min時(shí)斷脊椎處死小鼠。解剖小鼠后，取出小腸。觀(guān)察黑色墨汁在小腸中的推進(jìn)距離，墨汁推進(jìn)率反映了小腸的蠕動(dòng)功能。測(cè)量小腸的總長(zhǎng)度和墨汁的推進(jìn)距離，公式如下。

式中：L1為墨汁的推進(jìn)距離，cm；L2為小腸的總長(zhǎng)度，cm。

1.3.3.8 小鼠結(jié)腸器官指數(shù)和長(zhǎng)度變化測(cè)定

取出結(jié)腸后用卷尺測(cè)量結(jié)腸長(zhǎng)度，刮取出結(jié)腸內(nèi)容物，后對(duì)結(jié)腸組織進(jìn)行稱(chēng)重，結(jié)腸指數(shù)計(jì)算公式如下。

式中：m3是結(jié)腸組織質(zhì)量，g；m4是小鼠的體重，g。

1.3.3.9 小鼠血清生化指標(biāo)測(cè)定

小鼠灌胃黑色墨汁后計(jì)時(shí)，第15 min時(shí)用眼球摘除取血法收集小鼠的血液到EP管中，室溫（25℃）放置0.5 h～2 h后置于離心機(jī)中，4 000 r/min，4℃，離心15 min，離心結(jié)束后取出血清，待送醫(yī)院檢測(cè)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與討論

2.1 LCP理化指標(biāo)測(cè)定

LCP多糖含量達(dá)到（89.11±0.95）%，蛋白含量（6.21±0.94）%，糖醛酸含量（0.93±0.03）%。由于黃皮疣柄牛肝菌的蛋白含量較高，可達(dá)到30%以上，所以經(jīng)過(guò)脫色、sevage法脫蛋白后還是含有少量蛋白質(zhì)。為獲得高純度的多糖，后期可結(jié)合其他方法進(jìn)一步脫蛋白。

2.2 LCP對(duì)小鼠體重的影響

LCP對(duì)正常小鼠體重的影響結(jié)果如表1所示。

表1 LCP對(duì)正常小鼠體重的影響Table 1 Effect of LCP on body weight of normal mice

在同一時(shí)間段各組小鼠的體重變化均不顯著（P＞0.05），說(shuō)明黃皮疣柄牛肝菌多糖以及低聚果糖都不會(huì)對(duì)正常小鼠的體重產(chǎn)生影響。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，各組小鼠均正常飲食飲水，皮毛光滑、健康狀況良好、未出現(xiàn)腹瀉等不良反應(yīng)。

2.3 LCP對(duì)小鼠糞便含水率的影響

LCP對(duì)小鼠糞便含水率的影響如表2所示。

表2 LCP對(duì)小鼠糞便含水率的影響Table 2 Effect of LCP on water content of mice fecal

水作為生命必不可少的物質(zhì)，在腸道食糜運(yùn)輸中起到了潤(rùn)滑劑的作用。水也是人體新陳代謝的必要參與者，有助于營(yíng)養(yǎng)物的溶解和轉(zhuǎn)運(yùn)，同時(shí)可以促進(jìn)糞便轉(zhuǎn)運(yùn)量增加，降低有毒物質(zhì)的累積，減少患腸道疾病的風(fēng)險(xiǎn)[6]。無(wú)論是動(dòng)物糞便還是人體糞便，其大部分組成成分都是水，高含水率的糞便有利于減少有害物質(zhì)（如游離氨、酌類(lèi)物質(zhì)等）與腸道上皮細(xì)胞的互作時(shí)間，使糞便在腸道中的停滯時(shí)間大大縮短，及時(shí)排出代謝產(chǎn)物及有毒物質(zhì)，保持腸道清潔，維持腸道生理健康[25]。對(duì)收集的小鼠糞便含水率進(jìn)行測(cè)定。由表2可知，LCP高、中、低劑量組和低聚果糖組均能增加小鼠糞便含水率，且LCP與小鼠糞便含水率呈劑量依賴(lài)性增長(zhǎng)。與空白組相比，LCP高、中、低劑量組含水率分別提高了16.22%、15.03%、4.47%，這可能是因?yàn)長(zhǎng)CP自身持水能力較強(qiáng)，LCP的攝入能增加小鼠糞便的含水率，對(duì)促排便有一定作用，具有一定預(yù)防便秘的功能。騫宇[25]發(fā)現(xiàn)不同種類(lèi)和含量的抗消化淀粉對(duì)大鼠盲腸內(nèi)容物和糞便的濕度和含水量的影響不同，但是均能增加大鼠盲腸內(nèi)容物和糞便水分的濕重和含水量，使大鼠糞便的體積增加，并變得濕潤(rùn)。劉孟洋[26]研究繡球菌多糖時(shí)發(fā)現(xiàn)繡球菌多糖能提高小鼠的糞便含水量。

2.4 LCP對(duì)小鼠糞便pH值的影響

LCP對(duì)小鼠體外糞便pH值的影響結(jié)果如表3所示。

腸道微環(huán)境是一個(gè)復(fù)雜的生態(tài)體系和反應(yīng)體系，pH值可以調(diào)節(jié)微生物的生長(zhǎng)和代謝活動(dòng)中的酶活力[6]，是衡量腸道健康的重要參數(shù)[27]。有些腐生菌在結(jié)腸中較高的pH值環(huán)境下代謝很活躍，會(huì)產(chǎn)生一些致癌物質(zhì)，而降低結(jié)腸環(huán)境的pH值有利于抑制這些腐生菌的生長(zhǎng)增殖，能預(yù)防、治療腸炎、結(jié)腸癌等腸道疾病[28]。所以保持小鼠腸道內(nèi)低pH值環(huán)境能抑制有害菌的生長(zhǎng)，為腸道內(nèi)的益生菌提供一個(gè)有益的生長(zhǎng)環(huán)境。由表3可知，對(duì)比空白組，其余各組糞便的pH值呈下降的趨勢(shì)，其中LCP高、中、低劑量組的糞便pH值與空白組相比降低了0.39、0.3、0.26；并且都具有顯著性差異，高劑量組的效果最好，低聚果糖組和低劑量組效果相似。pH值降低的原因可能是，小鼠腸道中的微生物將LCP酵解，產(chǎn)生大量短鏈脂肪酸所導(dǎo)致的。張冠亞[6]對(duì)小鼠灌胃石斛多糖30 d后，發(fā)現(xiàn)小鼠盲腸內(nèi)容物、結(jié)腸內(nèi)容物和體外糞便pH值均降低，與本研究結(jié)果相似。

表3 LCP對(duì)小鼠體外糞便pH值的影響Table 3 Effect of LCP on vitro fecal pH of mice

2.5 LCP對(duì)小鼠排便時(shí)間的影響

LCP對(duì)小鼠排便時(shí)間的影響結(jié)果如表4所示。

表4 LCP對(duì)小鼠排便時(shí)間的影響Table 4 Effect of LCP on defecation time of mice

多糖、纖維素是極好的膳食補(bǔ)充劑，可以促進(jìn)大腸蠕動(dòng)，對(duì)胃腸排空以及對(duì)便秘具有調(diào)節(jié)作用。從小鼠排便時(shí)間以及墨汁推進(jìn)率可以進(jìn)一步評(píng)估LCP對(duì)小鼠腸道健康的作用。如表4所示，與空白組相比，其余各組排便時(shí)間呈逐漸下降的趨勢(shì)，LCP高、中、低劑量組差異顯著，其排便時(shí)間與空白組相比分別降低了30.50、20.66、13.83 min，呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性，高劑量效果最好。與其他實(shí)驗(yàn)中的小鼠相比，該實(shí)驗(yàn)中小鼠的排便時(shí)間相對(duì)較短，這可能與小鼠的種類(lèi)和飼養(yǎng)環(huán)境以及個(gè)體有關(guān)系。由結(jié)果也可得出LCP對(duì)小鼠腸道排便功能有所改善，能顯著加快食物在小鼠腸道中的通過(guò)速度，促進(jìn)糞便排出體外，使小鼠體內(nèi)的有害物質(zhì)快速排出。

2.6 LCP對(duì)小腸蠕動(dòng)功能的影響

LCP對(duì)小鼠墨汁推進(jìn)率的影響結(jié)果如表5所示。

表5 LCP對(duì)小鼠小腸墨汁推進(jìn)率的影響Table 5 Effect of LCP on intestinal propulsion rate of mice

食糜由胃進(jìn)入小腸，由化學(xué)性消化以及機(jī)械性消化完成在小腸內(nèi)的消化，經(jīng)過(guò)消化的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)大部分在小腸被吸收，因此小腸是消化吸收的最重要部位。機(jī)械性消化即小腸的蠕動(dòng)，因此小腸蠕動(dòng)功能是評(píng)價(jià)小腸健康程度的一個(gè)重要的指標(biāo)[29]。當(dāng)空腹的小鼠被灌胃墨汁，墨汁在小腸中的推進(jìn)率則直觀(guān)地體現(xiàn)了小腸的蠕動(dòng)能力。由表5可知，與空白組相比，其余各組小腸蠕動(dòng)能力均有增強(qiáng)的趨勢(shì)，低劑量組和低聚果糖組無(wú)顯著區(qū)別，LCP高、中、低劑量組呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性，高劑量LCP對(duì)小鼠墨汁推進(jìn)率影響最大，與空白組相比，墨汁推進(jìn)率增加了14.45%，這說(shuō)明了LCP能夠加快小鼠腸道的蠕動(dòng)。大粒車(chē)前子多糖[30]、鐵皮石斛多糖[6]、黃秋葵多糖[31]與LCP的作用相似，也會(huì)對(duì)小鼠的排便時(shí)間或墨汁推進(jìn)率產(chǎn)生影響。

2.7 LCP對(duì)結(jié)腸的影響

LCP對(duì)小鼠結(jié)腸器官指數(shù)和結(jié)腸長(zhǎng)度的影響結(jié)果如表6所示。

表6 LCP對(duì)小鼠結(jié)腸器官指數(shù)和結(jié)腸長(zhǎng)度的影響Table 6 Effect of LCP on colon index and length of mice

結(jié)腸長(zhǎng)度、質(zhì)量和指數(shù)能夠直觀(guān)地反映腸道的發(fā)育狀況和消化吸收功能。由表6可知，與空白組相比，小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度和結(jié)腸指數(shù)發(fā)生顯著增長(zhǎng)，也呈現(xiàn)出劑量依賴(lài)性上升，但是低聚果糖組和LCP高、中、低組4組的結(jié)腸長(zhǎng)度并沒(méi)有顯著差異，結(jié)腸指數(shù)低聚果糖組和低劑量組無(wú)顯著差異，高劑量組和中劑量組無(wú)顯著差異。高劑量LCP表現(xiàn)出更好的效果，結(jié)腸長(zhǎng)度與結(jié)腸指數(shù)與空白組相比，分別增加了1.67 cm和0.2%。從結(jié)腸指數(shù)和結(jié)腸長(zhǎng)度來(lái)看，高劑量LCP對(duì)結(jié)腸指數(shù)和結(jié)腸長(zhǎng)度影響較大，且具有正向促進(jìn)作用。

2.8 血清生化指標(biāo)

2.8.1 LCP對(duì)小鼠血清中蛋白質(zhì)組分的影響

LCP對(duì)小鼠血清中蛋白質(zhì)組分的影響結(jié)果如圖1所示。

圖1 LCP對(duì)小鼠血清中蛋白質(zhì)組分的影響Fig.1 Effects of LCP on serum protein components of mice

血清中蛋白質(zhì)含量的變化是判斷腎功能以及肝功能的主要指標(biāo)之一，肝臟是合成蛋白質(zhì)的唯一場(chǎng)所，肝功能?chē)?yán)重?fù)p害時(shí)，蛋白質(zhì)的合成減少，以白蛋白的下降最為顯著；當(dāng)出現(xiàn)腎病綜合征時(shí)，尿液中長(zhǎng)期丟失蛋白質(zhì)，也會(huì)使血清中蛋白質(zhì)含量降低。如圖1所示，與空白對(duì)照組相比，低聚果糖組和多糖組的總蛋白（total protein，TP）、球蛋白（globulin，GLB）、白蛋白（albumin，ALB）、UREA均沒(méi)有顯著性變化，說(shuō)明LCP對(duì)血清中的蛋白質(zhì)組分不會(huì)產(chǎn)生影響。

2.8.2 LCP對(duì)小鼠血清中脂質(zhì)組分的影響

LCP對(duì)小鼠血清中脂質(zhì)組分的影響結(jié)果如圖2所示。

CHOL、TG、HDL-C及LDL-C含量是反映機(jī)體脂類(lèi)代謝水平的重要指標(biāo)[32]。TG和CHOL二者與冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等關(guān)系密切[33]。HDL-C主要生理功能是轉(zhuǎn)運(yùn)磷脂和膽固醇，LDL-C是在血漿中由極低密度脂蛋白轉(zhuǎn)變而來(lái)，其主要在血管內(nèi)合成，在肝臟中降解[34]。HDL-C水平與冠心病的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)，它主要通過(guò)促進(jìn)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)、抗氧化、抗炎等機(jī)制來(lái)實(shí)現(xiàn)抗動(dòng)脈粥樣硬化；LDL-C水平與冠心病的發(fā)病率有明顯正相關(guān)，通過(guò)把肝臟內(nèi)合成的內(nèi)源性膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)到肝外細(xì)胞，使發(fā)生血脂升高。由圖2可知，LCP能顯著影響小鼠血清中TG的含量，LCP組的效果比低聚果糖組更顯著；對(duì)于CHOL和LDL-C的含量，只有高劑量組發(fā)生了顯著變化；對(duì)于HDL-C 5組間都沒(méi)有顯著差異。結(jié)果表明：高劑量LCP能顯著降低小鼠血清中的CHOL、TG、LDL-C的含量，可用于促進(jìn)脂質(zhì)代謝。與崔敬愛(ài)等[35]研究樺褐孔菌多糖能使高脂血癥大鼠血清中的TG、TC、LDL顯著下降的結(jié)果有相似的趨勢(shì)。這可能與腸道菌群平衡有關(guān)系，攝入功能性低聚糖會(huì)使腸道菌群改變，導(dǎo)致血清膽固醇水平較低，血清中LDL-C降低，HDL-C升高，有利于防止心腦血管疾病。

圖2 LCP對(duì)小鼠血清中脂質(zhì)組分的影響Fig.2 Effects of LCP on serum lipid components content of mice

2.8.3 LCP對(duì)小鼠血清中葡萄糖（glucose，GLU）組分的影響

LCP對(duì)小鼠血清中葡萄糖的影響結(jié)果如圖3所示。

圖3 LCP對(duì)小鼠血清中GLU的影響Fig.3 Effects of LCP on glucose content of mice

GLU是生物體內(nèi)新陳代謝不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是生物的主要供能物質(zhì)[36]。由圖3可知，5組小鼠血清的GLU含量均沒(méi)有發(fā)生顯著變化，說(shuō)明LCP不會(huì)影響糖類(lèi)代謝。

3 結(jié)論

正常小鼠經(jīng)黃皮疣柄牛肝菌多糖干預(yù)后，糞便含水率升高、排便時(shí)間縮短、墨汁推進(jìn)率增強(qiáng)，表明黃皮疣柄牛肝菌多糖可以起到潤(rùn)腸通便的作用，具有加快有害物質(zhì)在體內(nèi)的代謝，增加腸道蠕動(dòng)的潛在能力；另外，正常小鼠糞便pH值降低、結(jié)腸指數(shù)和長(zhǎng)度增加，說(shuō)明黃皮疣柄牛肝菌多糖能降低小鼠糞便pH值，促進(jìn)腸道的發(fā)育。通過(guò)對(duì)小鼠血清中蛋白指標(biāo)、脂質(zhì)指標(biāo)、葡萄糖指標(biāo)測(cè)定發(fā)現(xiàn)，黃皮疣柄牛肝菌多糖低、中、高劑量組均可使小鼠血清脂質(zhì)組分中的甘油三酯（TG）水平顯著降低，當(dāng)攝入量達(dá)到160 mg/kg時(shí)，小鼠血清脂質(zhì)組分中的膽固醇（CHOL）、低密度脂蛋白（LDL-C）水平顯著降低。表明黃皮疣柄牛肝菌多糖不會(huì)對(duì)血清蛋白及血清葡萄糖產(chǎn)生影響，可以促進(jìn)小鼠血脂的代謝，在未來(lái)可以作為功能因子應(yīng)用到調(diào)節(jié)血脂類(lèi)代謝中。