洪麗帆 黃紅靜 劉永和 劉麗燕 鄭曉陽(yáng)

頭孢噻肟鈉是臨床上廣泛應(yīng)用的廣譜半合成第三代頭孢菌素，對(duì)革蘭陽(yáng)性和陰性菌有較強(qiáng)的抑制作用。舒巴坦鈉作為不可逆的β-內(nèi)酰胺酶抑制劑，可顯著增強(qiáng)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素對(duì)細(xì)菌的抗菌活性，并可有效地防止耐藥性的產(chǎn)生，常與頭孢菌素類(lèi)合用。我們選取的注射用頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉由2種藥物組成，已由湘北威爾曼制藥有限公司成功研發(fā)[1]，該藥品在本院臨床使用量大、藥品說(shuō)明書(shū)又沒(méi)有標(biāo)注穩(wěn)定性，采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉成品輸液的含量[2]。本院于2018年10月成立靜脈用藥集中調(diào)配中心（PIVAS），保證了高質(zhì)量靜脈輸液的提供[3]。成品輸液是PIVAS的最后一個(gè)環(huán)節(jié)，放置的時(shí)間和貯存條件會(huì)直接影響成品輸液的質(zhì)量。尤其是抗菌藥物配置后的成品輸液，更應(yīng)注重其的穩(wěn)定性[4]，以保證臨床用藥的安全性、有效性。通過(guò)PIVAS配置的頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉成品輸液含量測(cè)定試驗(yàn)，探討成品輸液穩(wěn)定性研究方法和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 色譜儀型號(hào)：戴安U-3000高效液相色譜儀；天平：AB204-N型電子天平，XPR10微量分析天平。

1.1.2 試藥 頭孢噻肟對(duì)照品（批號(hào)130483-200303，純度89.3%）和舒巴坦對(duì)照品（批號(hào)130430-200305，純度89.2%）購(gòu)于中國(guó)食品藥品檢定研究院；頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉樣品（湘北威爾曼制藥有限公司，批號(hào)200506，含頭孢噻肟為500 mg，舒巴坦為250 mg）；0.9%氯化鈉注射液（NS）（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)W220122201，100 ml/瓶）；5%葡萄糖注射液（GS）（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)C21010512，100ml/瓶）；10% GS（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)S20032703，100 ml/瓶）；5%葡萄糖氯化鈉注射液（GNS）（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)H20021202，100 ml/瓶）。

1.2 方法

1.2.1 系統(tǒng)適應(yīng)性條件 （Agilent Eclipse plus）C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱溫：30 ℃；流動(dòng)相：乙腈－2.5 mmol/L四丁基氫氧化銨（20∶80）；檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)30 min；波長(zhǎng)230 nm；流速1 ml/min；進(jìn)樣量10 μl。

1.2.2 溶液的配制

1.2.2.1 對(duì)照品溶液 精密稱(chēng)取頭孢噻肟對(duì)照品5.434 mg及舒巴坦5.156 mg置10 ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

1.2.2.2 供試品溶液 取供試品注射用頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉0.75 g分別溶于5%GNS、0.9%NS、5%GS、10%GS，并定容至100 ml容量瓶，精密量取1 ml置10 ml容量瓶，分別加各溶劑稀釋至刻度，作為供試品溶液。

1.2.3 陰性樣品的測(cè)試 取5%GNS、0.9%NS、5%GS、10%GS溶劑用HPLC進(jìn)行陰性樣品測(cè)定。

1.2.4 方法學(xué)驗(yàn)證

1.2.4.1 線(xiàn)性關(guān)系的考察 分別精密吸取同一對(duì)照品溶液（見(jiàn)對(duì)照品溶液的配置）0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 ml置10 ml的容量瓶，加流動(dòng)相稀釋至刻度。搖勻?yàn)V過(guò)，取10 μl注入液相色譜儀中，測(cè)定峰面積。以對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得回歸方程為Y頭孢噻肟鈉=0.201 1X，R=0.999 1（n=5），Y舒巴坦鈉=0.018 2X，R=0.999 1（n=5），結(jié)果表明線(xiàn)性關(guān)系良好。

1.2.4.2 精密度試驗(yàn) 取同一對(duì)照品溶液（見(jiàn)對(duì)照品溶液的配置），重復(fù)進(jìn)樣6次，10 μl/次，測(cè)定頭孢噻肟及舒巴坦峰面積，其中頭孢噻肟峰面積的RSD為0.2%，舒巴坦峰面積的RSD為0.5%，RSD均小于2.0%，表明本方法精密度良好。

1.2.4.3 重復(fù)性試驗(yàn) 取用0.9%NS溶解的供試品，按供試品溶液制備方法制備6份供試液。測(cè)定每份樣品含量，測(cè)得頭孢噻肟含量RSD為0.3%，舒巴坦含量RSD為0.3%，RSD均小于2.0%，表明重復(fù)性良好。

1.2.4.4 加樣回收率試驗(yàn) 取已知頭孢噻肟含量為500 mg，舒巴坦為250 mg的用0.9%NS配制的注射用頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉，共6份分別配置成頭孢噻5 mg/ml、舒巴坦2.5 mg/ml，精密量取1 ml再分別精密加入混合對(duì)照品溶液（溶劑為流動(dòng)相溶液，頭孢噻肟濃度為0.527 6 mg/ml，舒巴坦?jié)舛葹?.543 2 mg/ml）2 ml置10 ml的容量瓶，用0.9%NS稀釋至刻度，然后按供試品溶液制備項(xiàng)下的方法操作測(cè)定，記錄色譜圖，考察本方法的加樣回收率，得到的加樣回收率均較高，其中頭孢噻肟平均回收率為103.5%，RSD為0.8%；舒巴坦平均回收率為98.6%，RSD為1.3%，RSD不超過(guò)2.0%。

1.3 不同溫度下時(shí)間的變化對(duì)含量的影響

通過(guò)以上的方法學(xué)驗(yàn)證，采用HPLC測(cè)定頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉成品輸液的含量。取供試品注射用頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉分別溶于5%GNS、0.9%NS、5%GS、10%GS，并定容至100 ml容量瓶，精密量取1 ml置10 ml容量瓶，分別加各溶劑稀釋至刻度，作為供試品溶液，分別考察常溫和3 ℃條件下放置0、2、4、8、24 h含量的變化，測(cè)定峰面積，計(jì)算相對(duì)含量。其中大于10%的有效成分被分解[5]，則認(rèn)為該藥品與輸液不宜配伍。

2 結(jié)果

2.1 常溫下時(shí)間的變化對(duì)含量的影響結(jié)果

常溫下頭孢噻肟與舒巴坦在各溶媒中溶解峰面積均隨時(shí)間的推移而變小。見(jiàn)表1。

表1 頭孢噻肟與舒巴坦在常溫下不同時(shí)間的峰面積(%)

常溫下頭孢噻肟與舒巴坦在各溶媒中溶解含量均隨時(shí)間的推移而變少，且除了用5%GS配制的成品輸液放置24 h含量下降小于10%，5%GNS、0.9%NS、10%GS配制的放置24 h含量下降大于10%。見(jiàn)表2。

表2 頭孢噻肟與舒巴坦在常溫下不同時(shí)間的含量(%)

2.2 3 ℃下時(shí)間的變化對(duì)含量的影響結(jié)果

3 ℃下頭孢噻肟與舒巴坦在各溶媒中溶解峰面積均隨時(shí)間的推移而變小。見(jiàn)表3。

表3 頭孢噻肟與舒巴坦在3 ℃下不同時(shí)間的峰面積(%)

3 ℃下頭孢噻肟與舒巴坦在各溶媒中溶解含量均隨時(shí)間的推移而變少，且放置24 h含量下降均小于10%。見(jiàn)表4。

表4 頭孢噻肟與舒巴坦在3 ℃下不同時(shí)間的含量(%)

3 討論

在陰性樣品的測(cè)試中，在頭孢噻肟和舒巴坦相應(yīng)位置無(wú)峰出現(xiàn)，說(shuō)明陰性樣品的其他成分無(wú)干擾。故通過(guò)線(xiàn)性關(guān)系，精密度試驗(yàn)，重復(fù)性試驗(yàn)與加樣回收率試驗(yàn)的驗(yàn)證，表明用HPLC測(cè)定頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉的含量，方法良好，適合測(cè)量。

根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果可知，頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉成品輸液采用HPLC測(cè)定，在3 ℃下時(shí)間的變化對(duì)含量的影響較小，其中5%GS的穩(wěn)定性相對(duì)高；在常溫下時(shí)間的變化對(duì)含量的影響較大，除了用5%GS配制的成品輸液放置24 h含量下降小于10%，5%GNS、0.9%NS、10%GS配制的放置24 h含量下降均大于10%。故在常溫和2～8 ℃條件下放置不同時(shí)間，在4種注射液中，5%GS與頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉在PIVAS環(huán)境下配置更穩(wěn)定。

采用的HPLC可同時(shí)測(cè)定頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉兩種主要成分的含量，該方法專(zhuān)屬性強(qiáng)、精密度高、準(zhǔn)確性好。根據(jù)《藥品注射劑使用指南》2005版有關(guān)規(guī)定，在靜脈注射液中大于10%的有效成分被分解，則認(rèn)為該藥品與輸液不宜配伍。頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉在3 ℃下時(shí)間的變化對(duì)含量的影響較小，可放置至少24 h，其中5%GS的穩(wěn)定性相對(duì)高[6]；在常溫下時(shí)間的變化對(duì)含量的影響較大，只有5%GS可放置24 h，故配置后的成品輸液適宜保存于2～8 ℃下[7]。

本實(shí)驗(yàn)的成品輸液是在PIVAS環(huán)境下配置的，相比于普通環(huán)境下更潔凈、更安全，更具準(zhǔn)確性。HPLC檢測(cè)兩種主要成分含量的方法操作簡(jiǎn)便、專(zhuān)屬性強(qiáng)、精密度高、準(zhǔn)確性好，可作為頭孢噻肟鈉舒巴坦鈉的成品輸液的含量測(cè)定及有關(guān)物質(zhì)測(cè)定的方法，方法準(zhǔn)確可靠。