吳建霞

（甘肅省靖遠(yuǎn)縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心，甘肅 白銀 730600）

近年來(lái)，隨著我國(guó)蛋雞養(yǎng)殖集約化和規(guī)模化進(jìn)程不斷加快，蛋雞疫病的發(fā)生也呈現(xiàn)出了不斷攀升的趨勢(shì)。雞傳染性鼻炎是由雞副嗜血桿菌引起的一種急性或亞急性上呼吸道疾病，臨床表現(xiàn)能夠引起結(jié)膜炎、臉部浮腫以及流膿鼻涕等，并能導(dǎo)致蛋雞產(chǎn)蛋率、產(chǎn)蛋質(zhì)量下降。如果沒(méi)有及時(shí)隔離病雞，該病極易在群體間擴(kuò)散傳播，導(dǎo)致雞群病死率上升，養(yǎng)殖場(chǎng)損失巨大。本文根據(jù)2020年靖遠(yuǎn)縣某養(yǎng)殖場(chǎng)蛋雞突然出現(xiàn)了咳嗽氣喘、食欲不振的實(shí)例，通過(guò)其臨床癥狀、剖解病變，結(jié)合涂片鏡檢、細(xì)菌分離和V因子試驗(yàn)等多種實(shí)驗(yàn)室方法進(jìn)行診斷，并對(duì)蛋雞傳染性鼻炎防治技術(shù)進(jìn)行分析和探究，以引起從業(yè)者的重視。

1 雞傳染性鼻炎的概述

雞傳染性鼻炎病原為多形性的雞副嗜血桿菌，該菌屬于兼性厭氧菌，可在5%~10%的二氧化碳、37 ℃的環(huán)境中生長(zhǎng)，但對(duì)環(huán)境的抵抗力極差，對(duì)熱敏感，45 ℃存活6 min，在陽(yáng)光照射、干燥環(huán)境下幾小時(shí)就死亡，一般的消毒劑可殺滅它。雞副嗜血桿菌在病雞的眼分泌物、黏膜中分布較多，一般使用巧克力營(yíng)養(yǎng)瓊脂、血液瓊脂等培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。雞嗜血桿菌生長(zhǎng)的必需物質(zhì)為“V因子”，而葡萄球菌能分泌該因子，因此，將雞嗜血桿菌和葡萄球菌接種同一血液培養(yǎng)皿中，可發(fā)現(xiàn)雞副嗜血桿菌在葡萄球菌菌落周?chē)L(zhǎng)旺盛，形似“衛(wèi)星”狀，可作為簡(jiǎn)單的初步診斷。

雞傳染性鼻炎發(fā)病急，傳播快，可感染各年齡階段的雞，其中初產(chǎn)蛋雞更易感染，需要重點(diǎn)進(jìn)行關(guān)注；4周以上雞群的發(fā)病率普遍呈上升趨勢(shì)，老齡雞感染較為嚴(yán)重，且潛伏期短，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)。該疾病主要通過(guò)空氣傳播，養(yǎng)殖人員的衣物、飼養(yǎng)用具、飼料等也可作為傳播媒介。該病一年四季均可發(fā)生，但冬春發(fā)病普遍，尤其是雞舍溫差較大、通風(fēng)條件不良、飼養(yǎng)密度較大等不良應(yīng)激會(huì)誘發(fā)雞群發(fā)病。

舍飼的蛋雞發(fā)病率高，13周齡以上蛋雞的發(fā)病率為100%，幼年雞的死亡率一般在5%~20%之間不等，成年雞死亡率要比幼年雞低得多，但感染后會(huì)使產(chǎn)蛋量明顯下降。經(jīng)過(guò)治療后的康復(fù)帶菌雞、隱性感染雞是傳染性鼻炎發(fā)生的主要傳染源，如果養(yǎng)殖場(chǎng)管理不到位，飼養(yǎng)條件差則會(huì)導(dǎo)致傳染性鼻炎病重復(fù)發(fā)生。

2 臨床癥狀

雞群感染傳染性鼻炎后有一定的潛伏期，一般為1~3 d，潛伏期過(guò)后才會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀，根據(jù)雞體質(zhì)差異、不同日齡、發(fā)病進(jìn)程，臨床癥狀會(huì)表現(xiàn)出明顯的差異。發(fā)病初期，病雞會(huì)表現(xiàn)出較為明顯的食欲下降、流鼻涕、打噴嚏等癥狀，可看到病雞眼眶周?chē)[脹，眼屎多，部分病情嚴(yán)重的雞會(huì)有失明現(xiàn)象，還發(fā)現(xiàn)在病雞鼻腔內(nèi)存在大量黏膿性鼻液以及肉髯、雞冠等部位腫脹。發(fā)病后期，病雞出現(xiàn)呼吸道癥狀，并隨著病情的持續(xù)發(fā)展，多數(shù)病雞出現(xiàn)呼吸困難、啰音，產(chǎn)蛋雞產(chǎn)蛋量大幅度下降，蛋品質(zhì)量也大不如前。

3 病理變化

養(yǎng)殖場(chǎng)將病死雞送至獸醫(yī)站進(jìn)行了剖檢，發(fā)現(xiàn)病雞眼瞼腫脹，呼吸道內(nèi)存在大量黏液，鼻腔內(nèi)也有干奶酪樣物質(zhì)，氣管內(nèi)部也存在大量黏液[1]；咽喉部出血明顯，部分病死雞的肺臟有淤血現(xiàn)象，同時(shí)發(fā)現(xiàn)，病雞腹部也出現(xiàn)了卵巢變形、氣囊囊壁增厚的問(wèn)題[2]。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 病料染色鏡檢

將病雞眶下竇內(nèi)的分泌物制成涂片，經(jīng)革蘭氏染色、鏡檢，在視野范圍內(nèi)可見(jiàn)革蘭氏陰性短小桿菌，呈現(xiàn)出兩極濃染，菌體為成對(duì)排列或單個(gè)排列，有時(shí)也能夠觀察到病原體呈短鏈狀排列。

4.2 病原分離培養(yǎng)

無(wú)菌條件下取眶下竇內(nèi)的分泌物，接種于綿羊血瓊脂平板上，在37 ℃ 10%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，發(fā)現(xiàn)血瓊脂培養(yǎng)基有半透明的菌落生長(zhǎng)，僅有針尖大小，且邊緣十分整齊，顏色呈灰白色，特征性虹光顯著[3]。

4.3 V因子試驗(yàn)

從4.2分離的菌落中挑取單個(gè)菌落，劃線接種于綿羊血平板瓊脂上，培養(yǎng)基正中間粘貼NAD（輔酶Ⅰ）紙片，經(jīng)37 ℃培養(yǎng)24 h，可觀察到在NAD紙片附近有密集菌落生成，且菌落很大。

4.4 平板凝集試驗(yàn)與血凝試驗(yàn)

平板凝集試驗(yàn)：室溫下，將傳染性鼻炎標(biāo)準(zhǔn)血清、分離菌制成的待檢抗原各1滴滴于玻璃板上，輕輕搖動(dòng)，使二者均勻混合，2~5 min后觀察是否有凝集現(xiàn)象，同時(shí)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)抗原、陽(yáng)性血清和陰性血清對(duì)照。如果有凝集現(xiàn)象，可判斷陽(yáng)性。

血凝試驗(yàn)：將純培養(yǎng)的分離菌接種于雞血清肉湯中培養(yǎng)18~24 h，將收獲的均勻混濁的培養(yǎng)物離心棄去上清液，加入PBS清洗，在清洗3次后將其制成10%的懸浮液，然后將1%的紅細(xì)胞和懸浮液混合試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)凝集程度在50%以上可以判斷為陽(yáng)性。

4.5 其它診斷技術(shù)

其它鑒定雞傳染性鼻炎的方法很多，1995年建立的Hpg-2 PCR技術(shù)被國(guó)際禽病界認(rèn)定為診斷雞傳染性鼻炎金標(biāo)，敏感性極高，特異性為100%。此外，還有間接ELISA方法和阻斷ELISA方法，其中間接ELISA診斷種特異性達(dá)100%，敏感性、重復(fù)性均好于HI試驗(yàn)，適合于流行病學(xué)調(diào)查，但不能區(qū)分血清型；而阻斷ELISA可區(qū)分A、C血清型。

5 防治技術(shù)

5.1 免疫接種

疫苗免疫接種是預(yù)防雞傳染性鼻炎最直接、最有效的預(yù)防方式，可以降低鼻炎的發(fā)病率。因此，需要及時(shí)制定本場(chǎng)自己的免疫計(jì)劃，并保證計(jì)劃得到有效落實(shí)。在免疫計(jì)劃中，其中一個(gè)重要方面就是選擇適宜的接種疫苗[4]，要結(jié)合血清型來(lái)進(jìn)行選擇，確保疫苗能夠發(fā)揮有效的預(yù)防作用，試驗(yàn)顯示全價(jià)且免疫原性較好的菌株疫苗，保護(hù)效果更好。針對(duì)當(dāng)前雞傳染性鼻炎的流行動(dòng)態(tài)，有專(zhuān)家建議養(yǎng)殖場(chǎng)使用由國(guó)內(nèi)分離菌株研制出的雞傳染性鼻炎三價(jià)（A型+B型+C型）滅活疫苗，有較好效果。未受到污染的雞舍，推薦：蛋雞在開(kāi)產(chǎn)前需要注射2次三價(jià)苗，40~45日齡首免0.3 mL/羽，105~120日齡二免0.5 mL/羽，這樣保證雞群在整個(gè)產(chǎn)蛋周期都能得到有效保護(hù)；不建議產(chǎn)蛋高峰期進(jìn)行免疫，這樣會(huì)影響產(chǎn)蛋。對(duì)已經(jīng)產(chǎn)生病雞且感染較為嚴(yán)重的雞舍，需要進(jìn)行至少3次的疫苗免疫接種，第一針約在雞群75日齡，第二針在種雞、蛋雞開(kāi)產(chǎn)后接種，第三針則需要與第二針接種時(shí)間相距3~4個(gè)月[5]。如果出現(xiàn)變異菌株，還需要采用更具針對(duì)性的多價(jià)疫苗[6]。

5.2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

提倡養(yǎng)殖場(chǎng)采取全進(jìn)全出的飼養(yǎng)模式。要注意不從疫區(qū)引種，從非疫區(qū)引種時(shí)要關(guān)注種雞場(chǎng)有無(wú)傳染性鼻炎發(fā)生史。種雞場(chǎng)要建立嚴(yán)格的血清學(xué)檢測(cè)制度，及時(shí)淘汰陽(yáng)性雞群，選育并建立陰性種雞群，同時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行各項(xiàng)生物安全措施，凈化商品雞群，淘汰感染雞或康復(fù)雞，對(duì)老雞群進(jìn)行隔離飼養(yǎng)。消除氣溫突變、高溫高濕、雞群擁擠、通風(fēng)不良、飼養(yǎng)環(huán)境衛(wèi)生差、外來(lái)人員出入頻繁及消毒不及時(shí)等不良誘因，同時(shí)加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)，提供全價(jià)營(yíng)養(yǎng)日糧，給予添加多維和免疫保健劑的飲用水，減少不良應(yīng)激，提高雞群抗病力。夏季要注意防暑降溫，每天定時(shí)通風(fēng)；冬季要防寒保暖，及時(shí)檢查下水道、門(mén)窗與糞溝等處是否漏風(fēng)，并進(jìn)行封堵。嚴(yán)格落實(shí)殺菌消毒工作，及時(shí)對(duì)雞舍內(nèi)部定期進(jìn)行消殺、清掃，保證雞舍內(nèi)的環(huán)境衛(wèi)生干凈；對(duì)飲水裝置、喂料用具等也要及時(shí)進(jìn)行清洗、消毒。在蛋雞進(jìn)欄前、出欄后，對(duì)雞舍甲醛熏蒸消殺，起到良好的防病效果。甲醛具有一定毒性，使用時(shí)工作人員要注意加強(qiáng)自身防護(hù)?；歼^(guò)傳染性鼻炎的雞場(chǎng)，建議對(duì)雞舍和設(shè)備清洗和消毒之后，空舍1~2周再飼養(yǎng)下一批雞。

5.3 藥物治療

目前比較流行的是采用中西醫(yī)結(jié)合的方法進(jìn)行治療，主要是在飼料、飲用水中添加藥物，以達(dá)到控制雞傳染性鼻炎的目的[7]。

5.3.1 中草藥治療 辛夷15 g，北沙參、酒黃柏、酒知母、郁金各9 g、明礬、甘草、木香各6 g，白芷、薄荷、蒼耳子7 g，混合加水煎煮，過(guò)濾除渣，藥液供病雞直接飲用，藥渣磨碎與飼料混和喂雞；每天1次，3 d一療程。同時(shí)，給雞群飲用復(fù)方新諾明水，用量50~100 mg/L水，第一次使用時(shí)量加倍。

5.3.2 抗生素治療 二甲基嘧啶和磺胺噻唑聯(lián)合使用治療效果較好，可將這兩種藥物混合添加于雞群的飼料和飲用水中，飼料中兩種藥物的混合濃度控制在0.5%為好，飼喂5~7 d；而飲用水中濃度最好控制在0.05%，使用6 d左右，使用這兩種藥物注意休藥期，也要避免與其它磺胺類(lèi)藥物同用，以減少藥物對(duì)蛋雞的產(chǎn)蛋量與產(chǎn)蛋質(zhì)量的影響。