李偉偉 邢浩春 武曉博 丁岐峰 藺相達 李志輝
(1邯鄲市林業(yè)局 河北 邯鄲 056000;2邯鄲學院 河北 邯鄲 056000)
透骨草(Phryma leptostachyaL.)為透骨草科透骨草屬多年生草本植物,擁有透骨草素及透骨草醇,全草能殺滅蔬菜菜青蟲。美國白蛾(Hyphantria cuneaDrury)又名美國白燈蛾,屬于白蛾屬。透骨草提取物的研究為美國白蛾的防治提供了一種新型的無污染生物農藥,可減少農藥對環(huán)境的污染,為美國白蛾防治及生物農藥制劑的研發(fā)提供了參考依據(jù)。
1.1.1 供試原藥及試劑。供試原藥:透骨草;試劑:無水乙醇、蒸餾水、甲醇、石油醚、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮。
1.1.2 試驗儀器。MP120-2分析天平、HH6數(shù)顯恒溫水浴鍋、R2003KE旋轉蒸發(fā)儀、布氏漏斗、KQ-700E超聲波振蕩儀、GHG-9241電熱恒溫鼓風干燥箱、SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、膠頭滴管、毛刷、濾紙。
1.1.3 供試蟲源。邯鄲市磁縣采集美國白蛾卵塊,采集回來放置在養(yǎng)蟲裝置內,使其自然孵化,選用同一批次健康活潑的美國白蛾2~3齡幼蟲。
1.2.1 提取方法(冷浸法)。將透骨草干燥粉碎,過60目篩。透骨草粉末按質量體積比1∶5的比例向其中加入甲醇溶液,用甲醇溶液進行提取。在背光的地方冷浸1d后,利用超聲波提取器進行輔助提取30 min,每次重復3次,收集提取液。將提取液進行過濾,合并濾液,得到甲醇提取液。提取液要經過旋轉蒸發(fā)儀減壓濃縮,濃縮成濃膏后得到透骨草的甲醇提取物。將烘干后的透骨草甲醇提取物用水溶解,將甲醇提取物分別用正丁醇、乙酸乙酯、石油醚進行萃取,分別得到正丁醇、乙酸乙酯、石油醚的萃取物。然后分別將其配制成濃度為4 mg/ml的透骨草正丁醇提取物、透骨草乙酸乙酯提取物、透骨草石油醚提取物的丙酮溶液。
1.2.2 毒力試驗方法(葉片浸漬法)。采集足夠多的新鮮的未被污染的法國梧桐樹葉,用剪刀將葉片剪成4 cm×4 cm大小,然后葉片全部浸入藥液中10 s后立即取出,并放在濾紙上在通風處晾干。將晾干的帶有藥品的法國梧桐樹葉放入貼有標簽的培養(yǎng)皿中,每個培養(yǎng)皿內放10頭美國白蛾幼蟲,蓋上培養(yǎng)皿。每組處理重復3次,用清水作為對照。分別于12 h、24 h、48 h后調查各試驗組美國白蛾的死亡情況,記錄死亡蟲數(shù)。
2.1 各提取物的死亡率和校正死亡率。從表1可以看出,這3種藥劑中乙酸乙酯萃取的透骨草提取物殺蟲效果最好,在48 h內殺蟲率達到了100%。
表1 各殺蟲劑的殺蟲死亡率和校正死亡率
2.2 各提取物對美國白蛾的毒力分析。從表2可以看出3種萃取物在48h內對美國白蛾的毒力,其中乙酸乙酯毒力最強,LC50為0.995mg/ml。
表2 提取物單劑48 h對美國白蛾幼蟲的毒力
試驗結果表明,透骨草甲醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、石油醚萃取物對美國白蛾幼蟲均有殺蟲效果,但殺蟲能力是不一樣的,校正死亡率的大小順序為:乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物>石油醚萃取物。乙酸乙酯萃取物的殺蟲效果較好,為防治美國白蛾提供了一種新的無公害方法。