姜 燕，任 榮，曹 博

(寶雞市婦幼保健院新生兒科，陜西 寶雞 721000)

新生兒敗血癥主要指新生兒受到病原菌(細菌或真菌)感染，侵入人體血液循環(huán)系統(tǒng)，同時大量生長繁殖，形成毒素后造成的全身性感染。有調(diào)查發(fā)現(xiàn)，美國敗血癥患者死亡率高達30%～50%，并且每年新發(fā)病例達75萬人[1]。亦有報道稱，敗血癥發(fā)病率呈現(xiàn)升高趨勢，升高速率約為每年1.5%～8.0%[2]。因為新生兒免疫功能低下，容易受細菌感染且造成全身擴散，具有病情進展快的特點，因此，早期診斷、予以及時治療是決定患兒預(yù)后的關(guān)鍵。

新生兒敗血癥通常發(fā)病隱匿，盡管血培養(yǎng)能夠確診，但比較耗時且陽性率低；而核酸擴增等技術(shù)，又較難普及應(yīng)用于基層醫(yī)院，故探尋可靠的早期診斷細菌感染相關(guān)標(biāo)記物，對指導(dǎo)早期診治具有重要意義?，F(xiàn)階段，國內(nèi)一般采取血常規(guī)、降鈣素原(procalcitonin，PCT)以及C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)等作為感染檢測指標(biāo)，然而這些指標(biāo)診斷敏感度與特異度普遍不高[3]。分化群抗原64(cluster of differentiation antigen 64，CD64)屬于近年來發(fā)現(xiàn)的新細胞因子，并于細菌感染疾病與敗血癥診斷上顯示出較高應(yīng)用價值[4]。當(dāng)前，關(guān)于PCT、CRP與CD64聯(lián)合應(yīng)用于新生兒敗血癥臨床診斷的研究較少，尤其是在患兒療效評估中的應(yīng)用尚無相關(guān)報道。本文旨在探究血清PCT、CRP、CD6檢測對細菌性新生兒敗血癥的診斷及療效評估價值，為臨床提供一定參考依據(jù)。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2017年6月至2020年7月寶雞市婦幼保健院95例細菌性新生兒敗血癥患者為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合細菌性新生兒敗血癥有關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，且于后期經(jīng)血培養(yǎng)結(jié)果確診；所有入組對象家屬均對研究知情，簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：排除合并先天性畸形、自身免疫疾病者、具有抗感染治療史、合并血液疾病等。并選取同期50例局部感染新生兒(局部感染組，包括腸炎18例、細菌性肺炎26例、上呼吸道感染4例、其他2例)及50例健康新生兒(對照組)。三組新生兒性別、胎齡及體重等一般資料比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。研究符合本院倫理委員會審核要求。

表1 三組新生兒一般資料比較Table 1 Comparison of the general data among the three

1.2研究方法

觀察組入院后均接受常規(guī)抗生素治療，治療時間10d左右。采集觀察組治療前后、局部感染組與對照組入院時清晨空腹?fàn)顟B(tài)靜脈血5mL，分為兩份：①一份使用3 000r/min的速率離心10min，然后取血清樣本，放在-70℃環(huán)境中保存待測。采取酶聯(lián)免疫吸附法進行PCT水平測定，試劑盒來自德國羅氏公司；采取免疫散射比濁法進行CRP水平的檢測，試劑盒來自上?？道噬锟萍加邢薰?。②另一份用于CD64檢測，選擇Coulter FC500型的流式細胞儀(購自貝克曼庫爾特公司)，試劑使用鼠抗人CD64-異硫氰酸熒光素標(biāo)記以及陰性對照抗體，均由貝克曼庫爾特公司提供。上機檢測均選定600mV電壓值，采取Cellquest軟件分析，根據(jù)前向散射光/側(cè)向散射光點圖呈現(xiàn)出的形態(tài)學(xué)特征進行中性粒細胞群的選取。其中，每個樣本計數(shù)包括10 000個細胞，獲得CD64平均熒光強度(mean fluorescent intensity，MFI)值。

觀察組治療前后，采用兩種評分方式進行病情評估：①全身性感染相關(guān)性功能衰竭(sepsis-related organ failure assessment，SOFA)評分[6]：總分24分，分值越高患兒病情越差；②小兒危重評分(pediatric critical illness score，PCIS)[7]：>80分即非危重，71～80分即危重；<71分即極危重。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

2結(jié)果

2.1三組PCT、CRP、CD64水平比較

三組PCT、CRP、CD64水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，且觀察組PCT、CRP、CD64水平高于其余兩組，局部感染組PCT、CRP水平高于對照組(F值分別為1499.688、935.497、617.575，P<0.05)，見表2。

表2 三組PCT、CRP、CD64水平比較Table 2 Comparison of PCT,CRP and CD64 levels among the three

2.2觀察組治療前后PCT、CRP、CD64、SOFA評分、PCIS評分比較

治療后PCT、CRP、CD64及SOFA評分較治療前均降低，PCIS評分較治療前升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t值分別為89.124、61.643、26.828、54.887、-17.742，P<0.05)，見表3。

表3 觀察組治療前后PCT、CRP、CD64、SOFA評分、PCIS評分比較Table 3 Comparison of PCT,CRP,CD64,SOFA scores and PCIS scores of

2.3相關(guān)性分析

PCT、CRP、CD64與SOFA評分呈正相關(guān)(r值分別為0.884、0.836、0.795，P<0.05)，與PCIS評分呈負相關(guān)(r值分別為-0.892、-0.917、-0.863，P<0.05)，見表4。

表4 PCT、CRP、CD64與SOFA評分、PCIS評分相關(guān)性分析Table 4 Correlation analysis of PCT,CRP and CD64 with SOFA scores and PCIS scores

2.4 ROC曲線分析

PCT診斷細菌性新生兒敗血癥的敏感度為75.6%，特異度為82.4%；CRP診斷敏感度為60.53%，特異度為85.7%；CD64診斷敏感度為81.3%，特異度為87.9%；三者聯(lián)合診斷敏感度為89.8%，特異度為90.2%，曲線下面積為0.918，見表5及圖1。

表5 PCT、CRP、CD64聯(lián)合診斷細菌性新生兒敗血癥ROC曲線分析Table 5 ROC curve analysis of PCT,CRP and CD64 in combination to diagnose bacterial neonatal sepsis

3討論

3.1 PCT、CRP、CD64在細菌性新生兒敗血癥中的變化

PCT屬于降鈣素前體，一般由甲狀腺C細胞合成與分泌，含量非常少。近年來有研究表明，PCT水平變化和細菌感染存在密切聯(lián)系[8]，細菌感染患者血清PCT水平呈急劇升高變化[9-10]。本研究中，觀察組血清PCT水平明顯高于其余兩組，且局部感染組明顯高于對照組，與上述研究觀點一致。原因為當(dāng)出現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)或者敗血癥時，除甲狀腺外，肺與腸道神經(jīng)內(nèi)分泌細胞、淋巴組織與肝臟組織巨噬細胞及單核細胞等也會合成大量PCT，導(dǎo)致PCT水平顯著升高。細菌感染后大約2～4h內(nèi)，人體內(nèi)PCT成千上萬倍增加，于6～8h內(nèi)增至峰值，且能維持24h左右，故臨床認(rèn)為其為判定細菌感染早期的敏感指標(biāo)[11-12]。CRP屬于急性時相蛋白，通常由肝臟合成，當(dāng)產(chǎn)生炎癥反應(yīng)或者組織損傷時，CRP水平明顯升高[13]。本研究中，觀察組CRP水平高于局部感染組，局部感染組高于對照組，組間差異顯著，提示新生兒感染具有CRP表達升高趨勢，其中細菌性敗血癥升高程度更大。人體一旦受到感染，CRP表達水平會在4～6h內(nèi)急劇升高，36～50h升至高峰，能夠達到正常范圍100～1 000倍[14]。CD64為免疫球蛋白G(immunoglobulin G，IgG)Fc段受體Ⅰ，是免疫球蛋白超家族之中的成員。正常狀態(tài)下CD64主要集中在樹突狀細胞、單核細胞與巨噬細胞表面，中性粒細胞表面水平較低[15]。以往研究表明，非感染性炎癥以及病毒感染不會導(dǎo)致中性粒細胞CD64水平升高，該指標(biāo)在新生兒細菌感染疾病中具有較高診斷特異性[16]。亦有報道稱，新生兒細菌感染發(fā)生后，CD64水平升高，特別是發(fā)生全身細菌感染時，其水平升高更加顯著[17]。本研究中，觀察組CD64水平明顯高于其余兩組，其余兩組CD64比較無明顯差異，表明細菌性新生兒敗血癥存在CD64水平異常升高趨勢。分析原因，細菌感染發(fā)生后4～6h，由于粒細胞集落刺激因子以及細菌細胞表面脂多糖等刺激，導(dǎo)致中性粒細胞CD64水平升高[18]。關(guān)于局部感染新生兒并無該變化，可能與患兒病情存在差異、炎癥階段不同有關(guān)。此外，本研究樣本較少，為單中心研究，具有一定局限性，有待后續(xù)大樣本及多中心研究予以進一步補充、完善。

3.2 PCT、CRP、CD64的診斷與療效評估價值

本研究經(jīng)ROC分析發(fā)現(xiàn)，PCT、CRP、CD64及三者聯(lián)合診斷細菌性新生兒敗血癥敏感度分別為75.6%、60.53%、81.3%、89.8%，特異度分別為82.4%、85.7%、87.9%、90.2%，表明這三項指標(biāo)聯(lián)合檢測可提高診斷效能。CRP單獨診斷效能較低，主要因為新生兒自身免疫系統(tǒng)與肝臟沒有發(fā)育完善，于其出生早期，各種因素均有可能影響CRP表達水平，故其對細菌性新生兒敗血癥早期診斷價值有限。另外，本研究顯示，觀察組治療后PCT、CRP、CD64水平明顯降低，且與SOFA評分、PCIS評分顯著相關(guān)，表明PCT、CRP、CD64變化與患兒病情嚴(yán)重程度緊密相關(guān)，可用于細菌性新生兒敗血癥臨床療效評估。

綜上，細菌性新生兒敗血癥呈現(xiàn)血清PCT、CRP、CD64異常升高變化，三者聯(lián)合可提高該病診斷效能，有利于疾病早期診斷，同時亦可為療效評估提供可靠指導(dǎo)，具有重要檢測價值。