陳曉彤，梁 靜，劉相富，顧玉榮，張巖巖，鄔喆斌，何秀婷，鄭玉寶

（1.中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院感染科，廣東廣州 510630；2.中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院輸血科，廣東廣州 510630；3.廣東輕工職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣東廣州 510300）

慢性乙型肝炎（chronic Hepatitis B，CHB）是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）引起的一種廣泛的傳染?。?］。持久性HBV 感染引起的慢性炎癥可導(dǎo)致肝纖維化，肝硬化，甚至肝細(xì)胞癌［2］。因此，及時給予CHB 患者抗病毒治療對阻斷CHB 疾病進(jìn)程尤為重要，而HBsAg、HBeAg 和HBV DNA 是評價抗病毒治療療效的重要指標(biāo)［3-4］。目前，最新慢乙肝防治指南推薦一線核苷（酸）類似物（nucleos（t）ide analogue，NAs）抗HBV 治療藥物為恩替卡韋（entecavir，ETV）和替諾福韋（tenofovirdisoproxil fumarate，TDF）［5-6］。多項研究比較了ETV 和TDF 在慢性乙型肝炎抗病毒治療中的療效和安全性［7］，但是這兩種藥物在慢性乙型肝炎中的免疫細(xì)胞功能的變化的差別尚不清楚。巨噬細(xì)胞在CHB 病程中促發(fā)或調(diào)節(jié)肝臟炎癥方面發(fā)揮重要作用，可被分為M1 型和M2 型［8-10］，其中M1 型巨噬細(xì)胞表達(dá)HLADR，CD80 和CD86 分子，產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子，如IL-1β，IL-6，TNF-α；M2 型 巨噬細(xì)胞表達(dá)CD206，CD163 分子［8-9］。分泌炎和免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞因子，如IL-10 和TGF-β［10］。有研究表明，HBV 感染可能觸發(fā)肝臟的庫普弗細(xì)胞活化，產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子，誘導(dǎo)外周單核細(xì)胞浸潤進(jìn)入肝臟并分化為巨噬細(xì)胞，但這種外周單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞（monocytederived macrophages，MDMs）［11-12］在慢性乙型肝炎抗病毒治療過程中動態(tài)變化尚不清楚。因此，本研究旨在探明CHB 患者M(jìn)DMs 的極化狀態(tài)在抗病毒治療過程中的動態(tài)變化及其與HBV DNA、HBeAg和HBsAg的關(guān)聯(lián)性。

1 材料與方法

1.1 病例資料

本研究研究對象為慢性乙型肝炎患者，參照《慢性乙型肝炎防治指南（2015 年更新版）》［13］，使用以下納入標(biāo)準(zhǔn)：成人、HBsAg 陽性的慢性乙型肝炎患者。排除標(biāo)準(zhǔn)包括：同時感染其他病毒性肝炎病毒或HIV、肝硬化和肝細(xì)胞癌。本研究共收集了101 例慢性乙型肝炎患者（流式細(xì)胞技術(shù)納入86例，qPCR 納入15例）和20例健康對照（流式細(xì)胞技術(shù)納入12 例，qPCR 納入8 例）的外周血標(biāo)本，所有CHB 患者血標(biāo)本均于2018 年1 月至2019 年6 月采集于中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院感染科門診及住院部，健康人血標(biāo)本采集于中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院獻(xiàn)血站。所有患者均已簽署知情同意書。本研究經(jīng)中山大學(xué)倫理委員會第三附屬醫(yī)院批準(zhǔn)（［2018］02-432-01）。

1.2 實驗方法

1.2.1 獲取外周血單個核細(xì)胞 從供者獲得外周血，去除血漿后，將血細(xì)胞用適量PBS（BOSTER，AR0030）稀釋成血細(xì)胞混懸液。將血混懸液：分離液比例為2：1 的離心管進(jìn)行離心（20 ℃，2 000 r/min，r=15cm，20 min，升5，降0）；離心后收集白膜層（單個核細(xì)胞），洗滌單個核細(xì)胞并重懸于含有10% 熱滅活胎牛血清（Gibco，100991410）和1% 含青霉素和鏈霉素的溶液（Gibco，15070065%）的RPMI-1640 安全培養(yǎng)基（Gibco，C11875500BT）中，轉(zhuǎn)移至T25 培養(yǎng)瓶中，放入37 ℃，體積分?jǐn)?shù)5%CO2的培養(yǎng)箱孵育。

1.2.2 獲取外周單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞 PBMC實驗孵育24 h 后，光學(xué)顯微鏡下，觀察貼壁細(xì)胞和未貼壁細(xì)胞形態(tài)。去除培養(yǎng)液中的未貼壁細(xì)胞。加入5 mL完全培養(yǎng)基，放入37 ℃，體積分?jǐn)?shù)5%CO2的培養(yǎng)箱孵育5 d，即可獲得單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞（MDMs）。

1.2.3 流式細(xì)胞技術(shù) 使用含有0.25%EDTA和胰蛋白酶（Gibco，25200056）的PBS 液從培養(yǎng)瓶中收獲MDMs，洗滌并重懸在1mL PBS中。加入PE偶聯(lián)的抗CD80 抗體（BDPharmingen，美國）、FITC 偶聯(lián)的抗CD14抗體（BDPharmingen，美國）、APC 偶聯(lián)的抗HLA-DR 抗體（BDPharmingen，美 國）和PECF594 偶聯(lián)的抗CD163 抗體（BD Horizon，美國）進(jìn)行胞外染色，在4 ℃下避光孵育45 min。分別添加40 g/L 多聚甲醛（JETWAY，JTW003-500）和0.1% Triton X-100（KeyGEN，KGF011）進(jìn)行固定和透化后，使用BV421 偶聯(lián)的抗CD206 抗體（BD Horizon，美國）進(jìn)行胞內(nèi)染色。在Beckman Gallios十色流式細(xì)胞分析儀上機檢測（Beckman Gallios，美國）。

1.2.4 實時熒光定量PCR 使用RNA 快速提取盒（上海奕衫生物，中國）從MDMs 中提取RNA。并通過NanoDrop2000 光譜儀（Thermo，德國）評估RNA 的濃度。加入1 000 ng RNA 所需要的樣本量，參照Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit（Roche，德國）的說明書加入所需試劑，設(shè)定PCR擴增儀（GeneAmp PCR ABS-2720，美國）的程序參數(shù)，將RNA 逆轉(zhuǎn)錄成cDNA（20 μL 體系）。每個樣本做3個復(fù)孔，每個復(fù)孔為10 μL體系混合物，包括DEPC 水（KeyGEN BioTECH，中國）4 μL，LightCycler 480 SYBR Green I Master（Roche，德國）5 μL，cDNA 樣本0.5 μL 和正向及反向引物各0.25 μL（引物均已在NCBI 驗證過），充分混合后放入LightCycler480Ⅱ（Roche，美國）中進(jìn)行實時熒光定量qPCR檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 流式結(jié)果觀察指標(biāo) 首先圈出CD14表達(dá)陽性的細(xì)胞（即MDMs）［14］，并通過M1 巨噬細(xì)胞的特異性表型分子（CD80 和HLA-DR）和M2 巨噬細(xì)胞的特異性表型分子（CD163 和CD206）的表達(dá)分析MDMs 的極化狀態(tài)。觀察CD80+HLA-DR+MDMs 和CD163+CD206+MDMs在CD14+MDMs所占的比例。

1.3.2 入組病例臨床基線資料 每個病例觀察其病毒學(xué)指標(biāo)（如HBsAg、HBeAg、HBV DNA）和對應(yīng)的生化資料（如AST和ALT）。

1.3.3 抗病毒過程中MDMs 的重復(fù)測量檢測 本研究共隨訪觀察了18 例慢性乙型肝炎患者，每例患者在開始抗病毒治療后的6個月內(nèi)依次抽取3次外周血標(biāo)本，分別是第0～59 天、第60～119 天和第120～180 天各抽取1 次。觀察CD80+HLA-DR+MDMs 和CD163+CD206+MDMs 在CD14+MDMs 所占的比例的動態(tài)變化，并觀察其病毒學(xué)指標(biāo)（如HBsAg、HBeAg、HBV DNA）和對應(yīng)的生化資料（如AST 和ALT）。

1.3.4 實時熒光定量PCR 的觀察指標(biāo) 目標(biāo)基因數(shù)據(jù)均與內(nèi)參數(shù)據(jù)對比進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理，從而獲得目標(biāo)基因的相對表達(dá)量，計算公式為2－ΔCt，其中ΔCt=Ct（目標(biāo)基因）－Ct（內(nèi)參基因），Ct 值（cycle threshold，Ct）為每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定的閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)的統(tǒng)計描述表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，中位數(shù)（四分位數(shù)范圍）或數(shù)字（百分比）。Shapiro-Wilk 檢驗用于正態(tài)檢驗，Levene 檢驗用于方差齊性檢驗。對于兩個獨立樣本之間的差異，正態(tài)分布變量的差異使用t檢驗，非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)使用Mann-WhitneyU檢驗。通過Spearman 相關(guān)性分析評估了MDMs 的分化狀態(tài)與HBeAg，HBV DNA，AST，ALT 之間的相關(guān)性。使用ROC 曲線評估CD163+CD206+MDMs 識別HBeAg 血清轉(zhuǎn)化和無法檢測到的HBV DNA 水平的能力，并使用ROC 曲線下面積（area under ROC，AUROC）來量化診斷和預(yù)測價值。利用尤登指數(shù)確定最佳閾值（cut-off），此外，還使用敏感性（sensitivity），特異性（specificity），陽性預(yù)測值（positive predictive value，PPV）和陰性預(yù)測值（negative predictive value，NPV）進(jìn)行輔助評估。Mauchly 檢驗用于球形檢驗，而重復(fù)測量方差分析（analysis of variance，ANOVA）則用于分析核苷（酸）類似物抗病毒治療過程中MDMs 的動態(tài)變化。檢驗水準(zhǔn)α=0.05，雙側(cè)P＜0.05 被認(rèn)為具有統(tǒng)計學(xué)意義。流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)果使用Flowjo Vx.0.7 軟件進(jìn)行分析，統(tǒng)計學(xué)分析均通過BMI SPSS軟件版本23.0和GraphPad Prism軟件版本8.0進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 臨床基線資料

研究納入101 例慢性乙型肝炎患者（流式細(xì)胞技術(shù)納入86 例，qPCR 納入15 例）和20 例健康對照（流式細(xì)胞技術(shù)納入12例，qPCR 納入8例），臨床基線資料如表2，慢性乙型肝炎組（CHB）組和健康對照組（HC）的男女比例兩組間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.40）。同樣，HC組和CHB組的年齡亦無明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.69）。入組CHB 患者的肝功能、HBV病毒學(xué)檢查結(jié)果如下表1所示。

表1 臨床基線資料Table 1 Baseline characteristics of patients

2.2 慢性乙型肝炎組中CD163+CD206+MDMs 的比例較健康對照組降低

研究顯示慢性乙型肝炎患者中CD163+CD20 6+MDMs 的比例低于健康對照組（P=0.004；圖1B），兩組間CD80+HLA-DR+MDMs 的比例沒有統(tǒng)計學(xué)差異（P=0.082；圖1C）。為了進(jìn)一步探討慢性乙型肝炎巨噬細(xì)胞極化與HBV 血清病毒學(xué)狀態(tài)的關(guān)系，我們比較研究了HBeAg 陽性（HBeAg ＞1 COI/mL），HBeAg 陰性（HBeAg ＜1 COI/mL），HBV DNA ＞100 U/mL，HBV DNA ＜100 U/mL 各個亞組中的MDMs 的極化狀態(tài)。研究顯示HBeAg 陽性組CD163+CD206+MDMs 的比例低于HBeAg 陰性組（P=0.030；圖1D）。同樣，HBV DNA ＞100 U/L 組的CD163+CD206+MDMs 的比例減少（P=0.042；圖1E）。這些結(jié)果表明，慢性乙型肝炎MDMs 的分化狀態(tài)與HBV血清病毒學(xué)密切相關(guān)（圖1）。

圖1 慢性乙型肝炎患者不同疾病階段中MDMs的分化差異Fig.1 Polarization of MDMs in CHB patients with different virological states

2.3 CD163+CD206+MDMs 與AST、ALT、HBeAg及HBV DNA水平均呈負(fù)相關(guān)

我們研究顯示CD163+CD206+MDMs 與HBV DNA（r95%CI 為-0.357（-0.544，-0.137））、HBeAg（r95%CI 為-0.270（-0.473，-0.038））均呈負(fù)相關(guān)（圖2A、B）。此外，研究顯示CD163+CD206+MDMs與AST（r=-0.228；95%CI（-0.437，0.004；圖2C）、ALT（r=-0.251；95%CI（-0.458，-0.019；圖2D）均呈負(fù)相關(guān)。然而，CD80+HLA-DR+MDMs 與HBeAg、HBV DNA、AST、ALT 的相關(guān)性均無統(tǒng)計學(xué)意義。值得注意的是，HBsAg 與MDMs 的分化狀態(tài)的相關(guān)性均無統(tǒng)計學(xué)意義。

圖2 CD163+CD206+MDMs與HBeAg、HBV DNA、AST、ALT之間的相關(guān)性Fig.2 Correlation between CD163+CD206+MDMs and HBeAg，HBV DNA，AST，ALT

2.4 CD163+CD206+MDMs 對慢性乙型肝炎HBV DNA檢測不到率和HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)換率的預(yù)測

研究顯示ROC 曲線評估CD163+CD206+MDMs比例對HBeAg 血清轉(zhuǎn)化、HBV DNA 檢測不到的診斷價值，分別為ROC95%CI 為0.740（0.634，0.847）（圖3A）和0.705（0.594，0.815）。設(shè)尤登指數(shù)為最佳診斷臨界值，CD163+CD206+MDMs診斷HBeAg 血清轉(zhuǎn)化、HBV DNA 水平檢測不到率的閾值分別為56%和49%。基于診斷臨界值的敏感性、特異性、陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值如表2 所示。ROC 曲線分析顯示，CD163+CD206+MDMs 對慢性乙型肝炎HBV DNA 水平檢測不到和HBeAg血清轉(zhuǎn)化率具有一定預(yù)測價值。

表2 CD163+CD206+MDMs對HBeAg 血清轉(zhuǎn)化率、HBV DNA 檢測不到率的預(yù)測統(tǒng)計結(jié)果Table 2 The predicting value of CD163+CD206+MDMsCD163+CD206+MDMs in HBeAg seroconversion and undetectable HBV DNA

圖3 CD163+CD206+MDMs對HBeAg 血清轉(zhuǎn)化率、HBV DNA 檢測不到率的預(yù)測Fig.3 ROC curve for CD163+CD206+MDMs in predicting HBeAg seroconversion and undetectable HBV DNA

2.5 慢性乙型肝炎患者核苷（酸）類似物抗病毒治療過程中MDMs極化狀態(tài)的動態(tài)變化

我們研究顯示，在CHB 核苷（酸）類似物抗病毒治療前6 個月中，隨著抗病毒治療的進(jìn)行，CD163+CD206+MDMs 比例在逐漸增加（F（2，34）=16.756，P＜0.001）。相反，CD80+HLA-DR+MDMs比例逐漸降低（F（2，34）=6.141，P=0.005；圖4A）。與此對應(yīng)，血清HBsAg（F（2，34）=3.283，P=0.0496）和HBV DNA 也逐漸下降（F（2，34）=16.416，P＜0.001；圖4B）。這些結(jié)果提示CHB 抗病毒治療過程中，M1 型與M2 型巨噬細(xì)胞比例隨著HBV DNA的降低呈現(xiàn)動態(tài)的變化。

圖4 抗病毒治療過程中MDMs和乙肝病毒血清學(xué)的動態(tài)變化Fig.4 Dynamic changes of antiviral treatments on MDMs and virology over time

2.6 ETV 和TDF 抗HBV 治療過程中對MDMs 極化狀態(tài)的動態(tài)變化

研究顯示隨著抗病毒治療的進(jìn)行，HBsAg 和HBV DNA 水平均逐漸下降，ETV 組和TDF 組間HBsAg（F（1，16）=1.074，P=0.315；圖5A）和HBV DNA（F（1，16）=0.924，P=0.351；圖5B）的下降幅度的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。此外，我們研究發(fā)現(xiàn)，在慢性乙型肝炎的抗病毒治療前6 個月，ETV 組和TDF 組間MDMs 分化狀態(tài)的動態(tài)變化無統(tǒng)計學(xué)意義（F（1，16）=0.020，P=0.890 和（F（1，16）=0.165，P=0.690；圖5C-D）。研究結(jié)果提示ETV 和TDF 在慢性乙型肝炎的早期抗病毒治療中對MDMs 的影響和抗HBV效果的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。

圖5 ETV和TDF抗病毒治療CHB前6個月的對MDMs的極化狀態(tài)的動態(tài)變化的比較Fig.5 Comparison of the dynamic processes of polarization of MDMs of CHB in the treatment by ETV and TDF

2.7 慢性乙型肝炎患者M(jìn)DMs 中的炎性因子的表達(dá)

為了研究慢性乙型肝炎患者M(jìn)DMs 中的炎癥因子的表達(dá)情況，采用qPCR 分析了從15 例慢性乙型肝炎患者和7 名健康供體中獲得的MDMs。與流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果一致的是，慢性乙型肝炎患者M(jìn)DMs 的抑炎因子IL-10 的mRNA 水平低于正常對照組（P=0.040；圖6D）。然而，兩組間促炎因子TNF-α，IL-1β，IL-6 和抑炎因子TGF-β 的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。這些發(fā)現(xiàn)使我們了解了慢性乙型肝炎患者M(jìn)DMs 中炎癥因子的多種表達(dá)。

圖6 慢性乙型肝炎中單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞炎性細(xì)胞因子的RNA水平表達(dá)Fig.6 mRNA expression of inflammatory cytokines of MDMs in CHB

3 討論

3.1 主要發(fā)現(xiàn)

我們的結(jié)果表明，慢性乙型肝炎患者中CD163+CD206+MDMs 的比例下降，并與HBeAg、HBV DNA、AST 和ALT 均呈負(fù)相關(guān)。與之對應(yīng)的是，我們發(fā)現(xiàn)抑炎細(xì)胞因子IL-10 在慢性乙型肝炎患者的MDMs 中的mRNA 水平表達(dá)減少。在核苷（酸）似物抗病毒治療的早期，CD163+CD206+MDMs的減少得到明顯改善，而CD80+HLA-DR+MDMs 的比例卻對應(yīng)地下降。但不同抗病毒藥物（ETV 和TDF）間的抗HBV 療效和對MDMs 的影響的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。另外，ROC 曲線分析提示CD163+CD206+MDMs 可以預(yù)測HBeAg 血清學(xué)轉(zhuǎn)化率和HBV DNA檢測不到率。

3.2 創(chuàng)新點與意義

Yi等［15］報道，乙型肝炎核心抗原可以選擇性抑制M2 表型巨噬細(xì)胞。Zhang 等［16］指出，HCV 感染抑制了單核細(xì)胞向M1型和M2型巨噬細(xì)胞極化，從而導(dǎo)致了炎性細(xì)胞因子（比如IL-10）的表達(dá)降低?？偟膩碚f，在慢性病毒性肝炎中，CD163+CD20 6+MDMs 的極化功能和分泌功能均是受損，這種受損可通過抗病毒治療修復(fù)免疫功能障礙來獲得部分恢復(fù)［16-17］。這個結(jié)果和我們的研究發(fā)現(xiàn)慢性乙型肝炎患者中CD163+CD206+MDMs 的比例下降的結(jié)果一致，也可以解釋CD163+CD206+MDMs在抗病毒治療中的動態(tài)變化。

然而，我們研究的部分結(jié)果與既往的研究也有不同之處。比如，Laursen 等［18］報道，慢性乙型肝炎患者的血清sCD163（soluble CD163，sCD163），sMR（soluble mannose receptor，sMR）和肝臟巨噬細(xì)胞表達(dá)的CD163顯著升高，經(jīng)過抗病毒治療后上述指標(biāo)均降低，。造成我們研究與他人研究的差異可能有兩個方面原因。一方面是使用不同方法檢測巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的特異性標(biāo)志物，Laursen 等［18］使用免疫組化技術(shù)檢測肝臟CD163的表達(dá)，并使用酶聯(lián)免疫吸附測定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）測定血清sCD163 和sMR。與此不同的是，我們直接檢測了MDMs 中的生物標(biāo)志物。另一方面可能是統(tǒng)計方法的不同，我們實驗將CD163+CD2 06+巨噬細(xì)胞定義為抑炎巨噬細(xì)胞，將CD80+HLADR+巨噬細(xì)胞定義為促炎巨噬細(xì)胞，并將雙陽性極化巨噬細(xì)胞占總成熟巨噬細(xì)胞的百分比用于統(tǒng)計（圖1）。但是，Laursen 等［18］直接使用血清濃度和肝臟表達(dá)量用于統(tǒng)計分析。

我們研究也有一些局限性。首先，上述的二分類（M1型/M2型）過于單一，可能無法完全說明巨噬細(xì)胞的可塑性和異質(zhì)性［19-20］，不同分化的巨噬細(xì)胞的表型仍需要進(jìn)一步研究。第二，我們發(fā)現(xiàn)CD80+HLA-DR+MDMs 在慢性乙型肝炎患者中有明顯下降的趨勢（P=0.082），但無統(tǒng)計學(xué)意義，可能需要更大的樣本量來探索。最后，盡管我們發(fā)現(xiàn)感染患者的IL-10 降低的證據(jù)，但對于其他炎性細(xì)胞因子，qPCR 的樣本量可能不足以產(chǎn)生如此小的P值，因此有必要進(jìn)行進(jìn)一步研究。

我們研究的主要優(yōu)勢是探索了慢性乙型肝炎不同疾病階段中MDMs 的極化狀態(tài)的差異與抗病毒治療期間MDMs 極化狀態(tài)的動態(tài)變化，從而闡明了MDMs 在慢性乙型肝炎的免疫炎癥反應(yīng)中的關(guān)鍵作用。為了研究不同核苷（酸）類似物抗病毒藥物對巨噬細(xì)胞極化狀態(tài)的影響，我們比較研究了ETV 和TDF 對MDMs 極化狀態(tài)的影響，研究提示不同核苷（酸）類似物抗病毒藥物（ETV 和TDF）在抗病毒治療早期對MDMs 極化狀態(tài)的影響的差異無統(tǒng)計學(xué)意義。同時我們研究提示MDMs 的極化狀態(tài)與CHB 的病毒血清學(xué)之間密切相關(guān)，檢測MDMs的極化可能可以預(yù)測慢性乙型肝炎在抗HBV 治療過程中的HBV DNA 檢測不到率和HBeAg 血清學(xué)轉(zhuǎn)化率。

3.3 結(jié)論

總而言之，我們研究發(fā)現(xiàn)慢性乙型肝炎患者中CD163+CD206+MDMs減少，這與慢性乙型肝炎的病毒學(xué)以及肝炎嚴(yán)重性呈負(fù)相關(guān)。在核苷（酸）類似物抗病毒治療過程中CD163+CD206+MDMs 的動態(tài)變化，可能預(yù)測慢性乙型肝炎在抗HBV治療過程中的HBV DNA檢測不到率和HBeAg血清學(xué)轉(zhuǎn)化率。

目前，巨噬細(xì)胞在慢性乙型肝炎中的重要作用越來越明顯，各種研究已經(jīng)研究了巨噬細(xì)胞活化與HBV 感染疾 病進(jìn)程之間的聯(lián)系［21-23］，例如，Kazankov 等［24］人闡述了血清sCD163 的升高與肝纖維化的組織學(xué)分級密切相關(guān)，此外，在肝硬化甚至急性肝損傷中，sCD163 和sMR 均顯著升高［22-23］。因此，我們推測巨噬細(xì)胞的極化狀態(tài)與慢性乙型肝炎相關(guān)的肝硬化和肝衰竭的預(yù)后相關(guān)，探索巨噬細(xì)胞極化在肝硬化以及急性肝衰竭中的作用仍需進(jìn)一步研究。