賴騰強謝娜吳伯文張平李曄金凌云

(1.福建農(nóng)業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，福建 福州 350007；2.福建仙芝樓生物科技有限公司，福建 福州 350002)

靈芝是我國傳統(tǒng)的名貴中藥，富含三萜類、多糖類、核苷類等多種藥理活性物質(zhì)，具有防癌、抗癌和保肝的作用。靈芝的傳統(tǒng)栽培方法為闊葉椴木栽培，對保護森林資源極為不利，我國實施“天然林保護工程”后，靈芝栽培方法轉(zhuǎn)為采用代料栽培。研究表明，硬質(zhì)闊葉樹木屑代料栽培靈芝較為理想[1,2]，而枇杷樹是常綠闊葉喬木，適合代料栽培靈芝。筆者于2012年以來開展枇杷枝屑代料栽培靈芝研究[3,4]，研究表明，枇杷枝屑可作為靈芝的栽培原料。用枇杷枝屑代替原木栽培靈芝，不僅變廢為寶，具有提高枇杷產(chǎn)業(yè)整體經(jīng)濟效益的作用，還具有保護森林資源的重大意義。本研究通過添加不同比例枇杷枝屑代料栽培靈芝，對靈芝的栽培特性、品質(zhì)等進(jìn)行比較分析，以期為枇杷枝屑代料栽培靈芝提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供試菌株為筆者試驗篩選出的適于枇杷枝屑代料栽培的“圓芝8號”[3]。

1.2 供試培養(yǎng)基

栽培袋培養(yǎng)基設(shè)6組配方，見表1，枇杷枝屑培養(yǎng)基為試驗組(用SY表示)，雜木屑培養(yǎng)基為對照組(用CK表示)。栽培袋培養(yǎng)基均添加輔料：麩皮10%，紅糖、過磷酸鈣各0.5%，石灰1%，料水比為1∶1.5，pH值自然。枇杷樹品種為“解放鐘”，選用修枝廢棄的新鮮枇杷枝，用粉碎機粉碎備用。

表1 供試培養(yǎng)基配方

1.3 試驗方法

采用機械拌料、裝袋，用17cm×33cm×0.005cm聚丙烯袋裝料，料高約14cm，干料重約385g。采用高壓滅菌，壓力達(dá)到0.11MPa時保持2h，自然冷卻。待料溫降至25℃以下，在接種箱接種，用氣霧消毒粉消毒30min，之后按無菌操作規(guī)范接種，每種培養(yǎng)基接種60袋。接種完畢后統(tǒng)一移入培養(yǎng)室走菌，溫度、濕度分別保持在20～25℃、60%～70%，避光培養(yǎng)。

按賴騰強等的方法進(jìn)行走菌與出芝管理，當(dāng)菌絲長滿料袋后統(tǒng)一移入栽培室出芝，栽培室保持適宜的溫度、濕度、光照和通風(fēng)量，以利于原基的形成與分化、子實體生長。出芝期只給水，不使用任何添加劑，不使用農(nóng)藥，病蟲害完全采取綜合防治，以環(huán)境的預(yù)處理和衛(wèi)生維護為主[5]。當(dāng)靈芝菌蓋邊緣的白邊變?yōu)楹稚珪r即可采收，采收后及時烘干(溫度不超過60℃)至恒重。

走菌與出芝期間，觀察各培養(yǎng)基靈芝的栽培特性，記錄菌絲生長、生長周期、商品性狀等情況。采收2潮靈芝，統(tǒng)計產(chǎn)量，計算生物學(xué)效率。以第1潮靈芝子實體進(jìn)行商品性狀、品質(zhì)的比較分析，多糖、三萜含量分析按照中國藥典[6]的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，重金屬、農(nóng)殘含量分析按照STP(I)-QY-006的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 靈芝菌絲生長與生長周期比較

從表2可知，各培養(yǎng)基的靈芝菌絲均生長正常，菌絲潔白、濃密。在生長速度方面，枇杷枝屑較雜木屑的快，且隨著枇杷枝屑量的增加，菌絲生長速度隨之加快，蓋面時間快0.5～1.5d，滿袋時間快1.5～8.5d；枇杷枝屑較雜木屑的長速快0.15～1.22mm·d-1。在生長周期方面，枇杷枝屑較雜木屑的短，但隨著枇杷枝屑量的增加，生長周期隨之延長；枇杷枝屑較雜木屑的原基發(fā)生時間短0～2d，原基分化時間短1～3d，孢子彈射時間短2～7d，第1潮采收時間短2～8d。

表2 各配方靈芝菌絲生長與生長周期情況

2.2 靈芝商品性狀與生物學(xué)效率比較

從表3可知，各培養(yǎng)基的靈芝子實體形態(tài)均生長正常，均能正常產(chǎn)生和釋放孢子，多為近圓形，色澤均勻一致。在商品性狀方面，枇杷枝屑較雜木屑的商品性狀好，菌柄較雜木屑的長0.88～1.73cm、菌蓋較雜木屑的小0.16～0.80cm、菌蓋較雜木屑的厚0.03～0.26cm。在生物學(xué)效率方面，枇杷枝屑較雜木屑的產(chǎn)量高，但隨著枇杷枝屑量的增加，產(chǎn)量、生物學(xué)效率隨之降低；枇杷枝屑較雜木屑的產(chǎn)量高3.94～7.31g，生物學(xué)效率高1.02%～1.89%。

表3 各配方靈芝商品性狀與生物學(xué)效率情況

2.3 靈芝多糖、三萜含量與重金屬、農(nóng)殘含量比較

從表4可知，在靈芝多糖方面，隨著枇杷枝屑量的增加，多糖含量隨之增多，當(dāng)枇杷枝屑添加量為85%時多糖含量最高為8.89mg·g-1；當(dāng)枇杷枝屑添加量為45%、55%時，多糖含量低于雜木屑的，當(dāng)枇杷枝屑添加量65%、75%、85%時，多糖含量高于雜木屑的。在靈芝三萜方面，隨著枇杷枝屑量的增加，三萜含量隨之增多，當(dāng)枇杷枝屑添加量75%時，三萜含量最高為8.91mg·g-1；當(dāng)枇杷枝屑添加量85%時，三萜含量有所下降；當(dāng)枇杷枝屑添加量為45%時，三萜含量較雜木屑低；當(dāng)枇杷枝屑添加量55%、65%、75%、85%時，三萜含量比雜木屑高。

表4 各配方靈芝品質(zhì)情況

隨機抽取枇杷枝屑代料栽培的靈芝進(jìn)行重金屬指標(biāo)、農(nóng)殘含量檢測，結(jié)果表明，重金屬、農(nóng)殘含量均符合檢測標(biāo)準(zhǔn)，均符合NY/T 749-2018 《綠色食品 食用菌》中規(guī)定的食用菌重金屬、農(nóng)殘含量要求，由此說明，試驗靈芝材料均是安全、無毒的，符合試驗材料要求[7]。

3 結(jié)論與討論

研究表明，利用枇杷枝屑代料栽培靈芝，菌絲生長正常，子實體形態(tài)正常，能正常產(chǎn)生和釋放孢子，與雜木屑代料栽培的基本一致，這與張平等研究結(jié)果相一致[3]；隨著枇杷枝屑量的增加，菌絲生長速度加快，多糖和三萜含量也有所增加，但生長周期有所延長，產(chǎn)量和生物學(xué)效率有所降低；菌絲生長速度快0.15～1.22mm·d-1，產(chǎn)量高3.94～7.31g，生物學(xué)效率高1.02%～1.89%，多糖含量有的高0.19～2.40mg·g-1，三萜含量有的高0.14～1.60mg·g-1。

靈芝的主要活性成分是多糖和三萜類化合物，《中華人民共和國藥典》(2010年版)主要是以靈芝子實體多糖和三萜含量高低評價靈芝品質(zhì)[8]，綜合比較各培養(yǎng)基靈芝菌絲生長狀況、子實體產(chǎn)量、生物學(xué)效率以及品質(zhì)等指標(biāo)[9]，評價結(jié)果，枇杷枝屑代料栽培靈芝枇杷枝屑用量應(yīng)控制在65%～75%為宜。枇杷枝屑用量為65%～75%時，靈芝菌絲生長速度快，產(chǎn)量、生物學(xué)效率高，多糖、三萜含量高。因此，枇杷枝屑代料可以栽培出品質(zhì)更好的靈芝，能有效地提高靈芝的藥用價值，這與張平等研究結(jié)果相一致[10]。

研究表明，枇杷枝屑代料栽培的靈芝重金屬、農(nóng)殘含量均符合檢測標(biāo)準(zhǔn)，均符合NY/T 749-2018《綠色食品 食用菌》中規(guī)定的食用菌重金屬指標(biāo)、農(nóng)殘含量要求，由此說明，枇杷枝屑代料栽培出的靈芝是安全、無毒的，枇杷枝屑作為靈芝的栽培原料是安全的。因此，枇杷枝屑是代料栽培靈芝的一種很好的原料，枇杷枝屑代料栽培靈芝不但生物學(xué)效率高而且品質(zhì)好，保護了森林資源，具有推廣價值[10]。