余秀峰

(佛山市第一人民醫(yī)院健康管理中心，廣東 佛山 528000)

突發(fā)性耳聾在全球范圍內(nèi)是一種常見的耳科疾病，每年每10萬人中有5～20例患病。最新的研究結(jié)果顯示，德國每年約有300/10萬人患有突發(fā)性耳聾，其特征是突發(fā)性的、通常是單側(cè)的感覺神經(jīng)性聽力損失，常伴有耳鳴、耳堵塞感、眩暈、惡心、嘔吐等臨床癥狀[1]。在過去的幾十年里，人們對該疾病進(jìn)行了大量的研究，關(guān)于其發(fā)病機(jī)制的研究主要集中在病毒感染學(xué)說、循環(huán)障礙學(xué)說、自身免疫學(xué)說以及膜迷路破裂學(xué)說等方面[2]。大多數(shù)患者的病因是特發(fā)性的，但是血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂已經(jīng)被認(rèn)為是該疾病的最終共同途徑。內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙最早期的特征是介導(dǎo)白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞黏附并促發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化過程的黏附分子表達(dá)增加。有研究表明，在突發(fā)性耳聾的患者中，可溶性黏附分子sICAM-1和sVCAM-1的表達(dá)水平顯著升高[3]。

在耳科領(lǐng)域，膽紅素一直被認(rèn)為是一種耳毒性的物質(zhì)，研究表明，高膽紅素血癥與聽力障礙(如聽神經(jīng)病)有關(guān)，但這些研究僅局限于新生兒高膽紅素血癥與感音神經(jīng)性耳聾的相關(guān)性[4]。在成年人突發(fā)性耳聾中，幾乎沒有提及血清膽紅素與聽力損傷程度的關(guān)系。近幾年的研究已經(jīng)明確膽紅素是一種重要的血管保護(hù)性分子，具有抗氧化、抗炎、擴(kuò)血管、抗突變、免疫調(diào)節(jié)、抗增殖和抗凋亡等多種特性[5]。但相關(guān)文獻(xiàn)中很少有研究提出膽紅素的耳保護(hù)作用。本研究通過檢測突發(fā)性耳聾患者和正常對照組血清中膽紅素和sVCAM-1的表達(dá)水平，分析其與突發(fā)性耳聾患者聽力損傷程度的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2019年8月～2020年8月我院耳鼻喉科收治的突發(fā)性耳聾患者48例為觀察組，在相同的時(shí)間內(nèi)選取在我院門診行健康體檢的正常人48例為對照組。本次研究經(jīng)過本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。對照組中男20例，女28例，年齡41～60歲，平均(49.13±5.86)歲；觀察組中男23例，女25例，年齡40～58歲，平均(48.97±6.12)歲。兩組受試者的年齡、性別、吸煙史、飲酒史、體重指數(shù)(BMI)臨床資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組患者均符合美國耳鼻喉頭頸外科協(xié)會(huì)(AAO-HNSF)發(fā)表的《臨床實(shí)踐指南：突發(fā)性聽力喪失(2019年更新)》[6]中對突發(fā)性耳聾的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②對照組人群目前沒有任何聽力障礙相關(guān)癥狀，既往無任何聽力障礙相關(guān)疾病史和家族史；③所有患者均為首次發(fā)病，尚未采用任何治療方式進(jìn)行規(guī)律治療；④所有受試者及家屬對本研究知情，并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期服用過耳毒性藥物者；②其他器質(zhì)性疾病引起的耳聾；③合并精神發(fā)育異常，不能配合完成研究者；④合并嚴(yán)重的心、肺、肝、腎功能障礙者；⑤合并聽神經(jīng)瘤或其他惡性腫瘤者；⑥合并或既往患有自身免疫性疾病者；⑦存在遺傳性聽力損失或聽力損失家族史者；⑧突發(fā)性耳聾復(fù)發(fā)者；⑨存在結(jié)構(gòu)性或耳蝸后病變者。

表1 兩組受試者基本臨床特征比較(n=48)

1.2方法：收集兩組一般臨床資料，包括年齡、性別、吸煙史、飲酒史、BMI等。受試者均在首次就診時(shí)采集外周靜脈的空腹血樣，采樣前均未服用任何激素類藥物。用含有檸檬酸鈉的采血管收集全血約5 ml，在4℃下3 000 r/min離心15 min，取上清液即為血清保存于-80℃冰箱，備用。使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中膽紅素和sVCAM-1的表達(dá)水平。

使用純音聽閾測定和耳鳴致殘量表(THI)評分檢測受試者聽力水平。采用純音聽閾測定時(shí)，測定頻率分別為500 Hz，受試者聽力≤25 dB為正常，聽力在26～40 dB為輕度聽力損失，41～60 dB為中度聽力損失，61～80 dB為重度聽力損失，≥81 dB為極重度聽力損失。采用THI評分進(jìn)行聽力測定時(shí)，測定項(xiàng)目共25項(xiàng)，根據(jù)嚴(yán)重程度評分分為3級(0分、2分和4分)，THI評分1～16分為1級(輕微)，18～36分為2級(輕度)，38～56分為3級(中度)，評分58～76分為4級(重度)，評分78～100分為5級(災(zāi)難性)。具體操作由2名受過專業(yè)培訓(xùn)的耳鼻喉醫(yī)師來完成。

2 結(jié)果

2.1兩組血清膽紅素和sVCAM-1水平比較：觀察組血清膽紅素明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.377，P=0.043)。sVCAM-1水平與血清膽紅素具有相反的趨勢，與對照組相比，觀察組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.962，P=0.012)。見表2。

表2 兩組受試者血清膽紅素和sVCAM-1水平比較

2.2兩組受試者聽力損傷程度比較：與對照組受試者平均聽閾比較，觀察組患者的聽力顯著下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=6.325，P=0.002)；另一方面，與對照組THI評分比較，觀察組THI評分明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.037，P=0.005)。見表3。

表3 兩組受試者平均聽閾比和THI評分比較

根據(jù)觀察組平均聽閾比值將患者的聽力損傷程度分為4個(gè)等級，其中聽力輕度損傷的患者有8例(16.67%)，平均聽閾比為(33.58±3.97)dB；中度損傷的患者有10例，平均聽閾比為(54.69±5.02)dB；重度損傷的患者有25例，平均聽閾比為(70.03±6.87)dB；極重度損傷的患者有5例，平均聽閾比為(85.24±8.36)dB。

2.3觀察組血清膽紅素和sVCAM-1水平與聽力損傷相關(guān)性分析：對于血清膽紅素而言，當(dāng)患者聽力達(dá)到重度及極重度的損傷時(shí)，膽紅素的水平與其損傷程度呈顯著負(fù)相關(guān)；而對于sVCAM-1而言，患者聽力損傷達(dá)中度及以上水平時(shí)，sVCAM-1的濃度與其損傷程度呈顯著正相關(guān)。見表4。

表4 血清膽紅素和sVCAM-1水平與觀察組聽力損傷程度的相關(guān)性

3 討論

本研究檢測了突發(fā)性耳聾患者和健康人群血清中膽紅素和內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物sVCAM-1的表達(dá)水平，并利用Pearson相關(guān)分析明確了膽紅素和sVCAM-1水平與突發(fā)性耳聾患者聽力損傷程度的相關(guān)性。研究結(jié)果表明，在突發(fā)性耳聾患者中，血清膽紅素的水平顯著降低，而sVCAM-1的濃度顯著升高，證實(shí)了這些患者存在內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙，而膽紅素在其中發(fā)揮著耳保護(hù)的作用。此外，突發(fā)性耳聾患者血清中膽紅素的水平與患者聽力損傷程度呈負(fù)相關(guān)，而sVCAM-1的濃度卻與患者聽力損傷程度呈明顯的正相關(guān)。

傳統(tǒng)上，膽紅素被認(rèn)為是血紅素代謝的有害產(chǎn)物。在耳科領(lǐng)域，高膽紅素血癥一直被認(rèn)為是聽力損害的危險(xiǎn)因素之一。然而，20年前，在一項(xiàng)關(guān)于Crigler-Najjar綜合征1型患者的研究中發(fā)現(xiàn)其中一組患者未合并感覺神經(jīng)性聽力損失，這些患者終生患有未結(jié)合的高膽紅素血癥[7]。眾所周知，高膽紅素血癥導(dǎo)致膽紅素腦病和死亡的風(fēng)險(xiǎn)巨大。這證明膽紅素可能并不像人們通常認(rèn)為的那樣具有耳毒性，其在人體內(nèi)的作用是復(fù)雜的。最近的研究表明，膽紅素是一種有效的抗氧化劑，在體內(nèi)和體外都具有抗炎特性。一些研究報(bào)道血清膽紅素濃度與心腦血管疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)呈顯著負(fù)相關(guān)。此外，輕度升高的血清膽紅素可能對糖尿病、代謝綜合征和成人的全因死亡率有保護(hù)作用[8]。許多研究已經(jīng)證明，心血管疾病的危險(xiǎn)因素與突發(fā)性耳聾之間存在重疊的關(guān)系，特別是全身性心血管疾病引起的耳蝸功能障礙在雙側(cè)比單側(cè)突發(fā)性耳聾更明顯[9]。最新的一項(xiàng)研究表明在雙側(cè)突發(fā)性耳聾的患者中，膽紅素水平在正?；蜉p度升高范圍內(nèi)與伴有重度和極重度聽力損失的患者的聽力改善呈獨(dú)立而顯著的相關(guān)性[10]。本研究的結(jié)果顯示膽紅素水平在突發(fā)性耳聾患者中顯著降低，并且當(dāng)患者聽力損傷程度加重達(dá)到重度和極重度水平時(shí)，膽紅素與其嚴(yán)重程度有明顯的負(fù)相關(guān)關(guān)系，這進(jìn)一步證實(shí)膽紅素可能具有重要的耳保護(hù)作用。目前臨床上已經(jīng)開展了膽紅素升高的治療方案，這可能是改善突發(fā)性耳聾患者預(yù)后的新策略。

內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙引起的微循環(huán)障礙可能是突發(fā)性耳聾發(fā)生的重要原因。促進(jìn)白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞相互作用的黏附分子的表達(dá)水平升高是內(nèi)皮細(xì)胞損傷的早期標(biāo)志物。之前的研究表明，突發(fā)性感覺神經(jīng)性耳聾患者低密度脂蛋白膽固醇、纖維蛋白原和循環(huán)中黏附分子(sE-選擇素、sICAM-1和sVCAM-1)的水平升高，并且通過單采血液成分法降低這些分子的濃度后，患者的聽力有明顯的好轉(zhuǎn)[3]。眾所周知，膽固醇水平升高與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，纖維蛋白原是心血管疾病的重要危險(xiǎn)因素，最近的薈萃分析證實(shí)了這一點(diǎn)。心血管危險(xiǎn)因素作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生炎性反應(yīng)進(jìn)而引起功能障礙的發(fā)生。人血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生炎性反應(yīng)的兩個(gè)重要特征是白細(xì)胞的募集和血管通透性的改變，而sVCAM-1通過調(diào)節(jié)多種信號通路在這一過程中起著至關(guān)重要的作用。sVCAM-1參與炎性細(xì)胞的運(yùn)輸、抗原呈遞過程中細(xì)胞間相互作用以及由外向內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，并且黏附分子在動(dòng)脈粥樣硬化和斑塊不穩(wěn)定性的發(fā)展中也起著關(guān)鍵的作用。越來越多的前瞻性研究表明，在健康人群中循環(huán)sVCAM-1的水平較低，而在高?；蛘哂忻黠@心血管疾病的患者中，sVCAM-1的水平升高是一個(gè)重要的風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測因子[11]。這種突然發(fā)作和內(nèi)耳血管化是由功能性終末動(dòng)脈提供的這一事實(shí)也進(jìn)一步證實(shí)突發(fā)性耳聾和心血管疾病之間存在類似的血管病理機(jī)制。此外，糖尿病患者的感覺神經(jīng)性聽力損失的發(fā)生率顯著高于普通人群，這一事實(shí)也支持了血管功能障礙在這種疾病中的作用。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證明了sVCAM-1在噪聲引起的聽力損失中的作用。研究表明，通過使用抗VCAM-1抗體可以阻斷活性氧產(chǎn)生的級聯(lián)反應(yīng)，對噪聲引起的聽力損失發(fā)揮保護(hù)作用[12]。本研究的結(jié)果與之前的研究保持一致，突發(fā)性耳聾患者血清sVCAM-1的水平明顯高于健康對照組，且當(dāng)患者聽力損傷程度達(dá)到中度及以上水平時(shí)，患者sVCAM-1濃度與其嚴(yán)重程度有明顯的正相關(guān)關(guān)系。這些結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙在突發(fā)性耳聾的發(fā)生發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的作用，抑制內(nèi)皮細(xì)胞炎性反應(yīng)、調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞的功能狀態(tài)可能是治療突發(fā)性耳聾的新靶點(diǎn)。

本研究首次證實(shí)血清膽紅素的表達(dá)水平在成人突發(fā)性耳聾患者中顯著降低，并且與這些患者聽力損傷的嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)；而血清sVCAM-1作為內(nèi)皮細(xì)胞損傷的重要標(biāo)志物，其在突發(fā)性耳聾患者體內(nèi)表達(dá)明顯升高，提示內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙與突發(fā)性耳聾的發(fā)生密切相關(guān)。但由于血清膽紅素和突發(fā)性耳聾之間的相關(guān)性研究很少，因此還需要更多的實(shí)驗(yàn)來證實(shí)這一現(xiàn)象。