張 芳 李 新 王海龍

甲狀腺結(jié)節(jié)較為常見，其中4%～8%的成年人是通過觸診發(fā)現(xiàn)的，而40%的成年人則是通過超聲檢查發(fā)現(xiàn)的，并在后期隨訪中有5%～6.5%的患者可出現(xiàn)惡變[1]。由此可見，對甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性及早進行鑒別，有利于為其治療方案的制定帶來幫助，從而改善患者預(yù)后[2]。而病理活檢依舊是臨床上用于甲狀腺結(jié)節(jié)病變診斷的“金標準”，然而該診斷手段的可重復(fù)性不高，同時不利于動態(tài)監(jiān)測甲狀腺結(jié)節(jié)的病情發(fā)展，因此在臨床應(yīng)用方面受到一定的限制[3]。隨著醫(yī)學(xué)影像技術(shù)的快速發(fā)展，超聲造影逐步成為影像科比較新穎的定量檢測手段，該技術(shù)能夠及時準確地分析靶器官中具體的血流分布情況，在腹腔等實質(zhì)性臟器的疾病診斷中得到廣泛使用，但其對于甲狀腺癌的鑒別診斷及病情評估價值方面的研究目前仍甚少[4]。因此，本研究通過將能反映甲狀腺癌細胞增殖、侵襲等相關(guān)指標與超聲造影參數(shù)共同分析，旨在為甲狀腺癌的鑒別診斷及其病情監(jiān)測提供一種有效的手段。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

將2017年5月至2019年8月我科收治的63例甲狀腺癌患者作為研究組，其中男性45例，女性18例；年齡范圍為42～77歲，平均年齡為(65.5±3.8)歲；病灶直徑為0.6～4.2 cm，平均直徑為(2.5±0.6)cm；病灶位置：左側(cè)20例、右側(cè)22例、峽部8例及雙側(cè)13例。將同期入院的40例甲狀腺腺瘤患者作為對照組，其中男性30例，女性10例；年齡范圍為45～73歲，平均年齡為(63.9±3.3)歲；病灶直徑范圍0.5～4.0 cm，平均直徑為(2.3±0.5)cm；病灶位置：左側(cè)13例、右側(cè)15例、峽部5例及雙側(cè)7例。以上2組患者的臨床資料可比(P>0.05)。

1.2 納入標準

①所有患者術(shù)后均經(jīng)病理學(xué)確診；②所有患者入院前均未治療且未行超聲造影檢查；③排除既往有頸部手術(shù)史者；④排除重要器官功能障礙者；⑤所有患者均簽署知情同意書。

1.3 甲狀腺結(jié)節(jié)超聲造影

首先用灰階超聲常規(guī)檢查病灶，而后用CPS 噪音模式，將其聚焦于病灶部位。這時候在肘靜脈位置建立靜脈通道，接下來將2.5 ml造影劑注入套管針中，再用0.9%濃度的5 ml氯化鈉溶液仔細清洗套管。最后選擇特征最顯著病灶內(nèi)強化區(qū)域定量分析峰值強度(PI)、達峰時間(TIP)及平均通過時間(MTT)。

1.4 PCR法檢測增殖、侵襲基因的表達情況

收集患者手術(shù)過程中的腫瘤標本，用Trizol 試劑將細胞裂解，隨后加入0.2 ml的氯仿高速離心，取上清液待檢。向其中加入等體積的異丙醇，再確定RNA 的濃度和純度，然后反轉(zhuǎn)錄為cDNA，最后利用熒光定量 PCR試劑盒進一步擴增相關(guān)基因，包括靶向Xklp2靶蛋白(TPX2)、程序性細胞死亡因子4(PDCD4)和蛋白磷酸酶4調(diào)節(jié)亞基(PP4R)1等增殖基因；趨化因子受體4(CXCR4)和解聚素金屬蛋白酶9(ADAM9)等侵襲基因。最后mRNA表達量。

1.5 評估指標

①比較2組超聲造影相關(guān)參數(shù)的差異情況；②比較2組增殖及侵襲相關(guān)基因的表達差異情況；③根據(jù)研究組患者術(shù)后病理檢查結(jié)果，比較甲狀腺癌患者(研究組)有/無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者超聲造影相關(guān)參數(shù)的差異情況；④分析甲狀腺癌超聲造影參數(shù)與增殖、侵襲基因及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS19.0軟件統(tǒng)計分析。計量資料用t檢驗，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。當P<0.05時，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 超聲造影相關(guān)參數(shù)對比

研究組 TTP、PI、MTT 水平低于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 超聲造影相關(guān)參數(shù)對比

2.2 增殖、侵襲相關(guān)基因的表達對比

研究組 PDCD4及PP4R1 基因表達水平低于對照組，而TPX2、ADAM9及CXCR4 基因表達水平高于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 增殖、侵襲相關(guān)基因的相對表達對比

2.3 研究組有/無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者超聲造影參數(shù)對比

有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺癌患者PI、MTT及TTP水平低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)，見表3。

表3 研究組有/無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者超聲造影參數(shù)對比

2.4 甲狀腺癌超聲造影參數(shù)和相關(guān)基因、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析

甲狀腺癌 PI、TTP、MTT 與 PDCD4、PP4R1均呈正相關(guān)，而與 TPX2、ADAM9、CXCR4 及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)(P<0.05)，見表4。

表4 甲狀腺癌超聲造影參數(shù)和相關(guān)基因、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析

3 討論

隨著近年來居民飲食和日常生活方式的改變，人群中出現(xiàn)甲狀腺癌的概率呈年輕化趨勢[5]。目前，臨床上診斷甲狀腺癌的手段主要為細針穿刺活檢，但其具有一定的創(chuàng)傷，且診斷結(jié)果容易受到穿刺位置的影響，存在一定程度的假陰性和假陽性[6]。隨著醫(yī)學(xué)影像學(xué)的快速發(fā)展，超聲造影逐漸被應(yīng)用于臨床，其主要利用分析組織血流的灌注情況來輔助性判定疾病性質(zhì)，且相關(guān)研究證明惡性腫瘤組織中具有豐富的血流，當向其中注入造影劑后，血管中顯示的造影參數(shù)值出現(xiàn)異常，這為甲狀腺癌的鑒別診斷提供數(shù)據(jù)支持[7]。

本研究結(jié)果顯示，研究組 PI、TTP、MTT 水平較對照組明顯降低(P<0.05)，此結(jié)果表明超聲造影參數(shù)能夠鑒別甲狀腺結(jié)節(jié)是否惡變，這可能是因為甲狀腺癌存在大量的新生血管，其本身無法滿足細胞的快速生長所需求的氧氣和營養(yǎng)成分等，從而導(dǎo)致其缺氧、缺血，最終使病灶呈低增強或無增強的造影特點，因此 PI 值降低，而TTP 與 MTT 縮短[8]。

研究報道，PDCD4 是抑制甲狀腺癌細胞增殖基因，可誘導(dǎo)癌細胞凋亡；PP4R1 則是抑癌基因，而TPX2 則參與了紡錘體形成過程[9]。另外作為甲狀腺癌侵襲相關(guān)基因，ADAM9 主要通過降解基質(zhì)、接觸細胞發(fā)揮促侵襲轉(zhuǎn)移的作用，而CXCR4 的表達升高可有效促進甲狀腺癌細胞的增殖、侵襲[10]。本研究通過比較2組增殖及侵襲相關(guān)基因的表達差異情況，發(fā)現(xiàn)研究組 PDCD4及PP4R1 基因表達水平低于對照組，而TPX2、ADAM9及CXCR4 基因表達水平高于對照組(P<0.05)。另外結(jié)果顯示有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的研究組患者PI、MTT及TTP水平低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.05)，進一步表明超聲造影相關(guān)參數(shù)可在一定程度上反映甲狀腺癌患者病情的進展情況。最后Pearson 相關(guān)性分析也再次證實了超聲造影參數(shù)水平能一定程度反映甲狀腺癌細胞增殖及侵襲情況，從而可有效評估甲狀腺癌的惡性程度。

綜上所述，甲狀腺超聲造影參數(shù)對甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的鑒別診斷存在一定的價值，同時超聲造影參數(shù)的異常程度與甲狀腺癌的增殖及侵襲相關(guān)，通過超聲造影檢查可量化反映甲狀腺癌的病情進展情況。