潘 輝 郭力剛 李正鵬 陸 歡*
(1貴州光明臨港九道菇生物科技有限公司,貴州遵義 563000;2上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所農(nóng)業(yè)農(nóng)村部應(yīng)用真菌資源與利用重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室/國家食用菌工程技術(shù)研究中心,上海奉賢 201403)
真姬菇Hypsizygus marmoreus又名玉蕈、斑玉蕈、假松茸等,屬擔(dān)子菌亞門,層菌綱,傘菌目,白玉科,玉蕈屬[1-2],主要分布于亞洲、北美洲和歐洲等北溫帶地區(qū)。真姬菇具有菇體肥厚,口感細(xì)膩,脆嫩鮮滑等特點(diǎn),含有多種氨基酸(含有人體所需的8 種必需氨基酸),其中賴氨酸和精氨酸含量高于大部分食用菌,還富含多糖等活性物質(zhì)。真姬菇還具有抗腫瘤、提高免疫力、抗衰老等藥用價(jià)值,從子實(shí)體中提取的葡聚糖具有很高的抗腫瘤功效[3-7]。
自1972 年日本寶酒造株式會(huì)社實(shí)現(xiàn)了首次人工栽培真姬菇后,經(jīng)過幾十年發(fā)展,目前,其工廠化生產(chǎn)量僅次于金針菇和杏鮑菇[8-10],2017 年,我國真姬菇總產(chǎn)量超過了39 萬t[11]。為篩選出不同真姬菇菌株適宜的栽培料配方和工廠化生產(chǎn)所用栽培料,筆者進(jìn)行了本試驗(yàn)。
試驗(yàn)菌株為真姬菇菌株101 和201,其中101 為蟹味菇,201 為白玉菇,均由上海光明森源生物科技有限公司提供。試驗(yàn)主要原材料為楊樹木、白楓、松樹木、檫樹木、株樹木和泡桐樹的木屑,輔料為米糠和麩皮。所有材料要求新鮮、無蟲害、無霉變。
(1)母種培養(yǎng)基。1000 mL 培養(yǎng)基中含馬鈴薯200 g,瓊脂20 g,葡萄糖20 g,用15 mm×150 mm 的試管進(jìn)行分裝,滅菌后備用。(2)栽培種培養(yǎng)基。根據(jù)真姬菇生長特性和營養(yǎng)需求,共設(shè)6 個(gè)培養(yǎng)料配方,配方1為楊木屑60%;配方2為白楓木屑60%;配方3 為松木屑60%;配方4 為檫木屑60%;配方5 為株木屑60%;配方6 為泡桐木屑60%。以上配方均添加米糠30%,麩皮10%。料含水量為62%。
按1.2 配方配制栽培種培養(yǎng)基,攪拌均勻后裝入大試管內(nèi)(30 mm×200 mm),裝滿試管后壓料至試管中部,料重約90 g,再滅菌、接種。接種后將大試管置溫度22~25 ℃,空氣相對濕度75% 左右的培養(yǎng)房內(nèi),避光培養(yǎng)。試驗(yàn)重復(fù)3 次,每次20 支。pH 能影響食用菌菌絲生長,過高過低都不利于菌絲生長,因此試驗(yàn)測定不同真姬菇配方料滅菌前后pH。
按1.2 配方稱料,將培養(yǎng)料攪均勻,采用850 mL的塑料瓶裝料550 g(濕重),高溫高壓滅菌2 h。在無菌條件下接入等量真姬菇栽培種,置溫度22~25 ℃下培養(yǎng),待菌絲長滿搔菌后移入菇房,進(jìn)行控溫控濕的常規(guī)出菇管理。出菇期間溫度為14~16 ℃,空氣相對濕度為95%~100%,現(xiàn)蕾后輔助強(qiáng)光刺激。試驗(yàn)重復(fù)3次,每次50瓶。
菌絲平均生長速度測定:當(dāng)菌絲鋪滿大試管料面,并開始向下延伸生長時(shí),開始觀察記錄菌絲長勢、色澤;培養(yǎng)第8 天第一次劃線,培養(yǎng)第15 天第二次劃線,培養(yǎng)第22 天第三次劃線,取平均值。記錄菌絲長勢、色澤,栽培瓶內(nèi)生育周期和平均瓶產(chǎn)量等。采用SPSS 21.0軟件對數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。
由表1 可知,6 個(gè)配方料滅菌后pH 均比滅菌前下降,其中配方1、配方2、配方4 和配方6 下降較明顯,配方3 和配方5 下降幅度較小。原因可能是配方1、配方2、配方4和配方6所用木屑在高溫高壓滅菌時(shí)木質(zhì)纖維素、纖維素和蛋白質(zhì)等大分子降解為有機(jī)物,以及微生物作用,料酸敗嚴(yán)重。
表1 供試配方料滅菌前后pH
由表2可知,真姬菇101和201菌株在不同配方料中菌絲生長速度和菌絲長勢有差異,色澤差異不明顯。其中,101菌株在配方1和配方5的菌絲平均長速最快,其次為配方2,配方1和配方2菌絲較濃白健壯,配方5菌絲顏色偏淡;配方3和配方6的菌絲生長稍慢,兩者差異不顯著;配方4菌絲平均長速最慢,與其他配方差異較顯著,但菌絲濃白,整齊。配方1(楊木屑)101菌株菌絲生長濃白整齊,且生長快,可能是101菌株較容易分解利用楊木屑中的纖維。
表2 供試配方真姬菇菌絲生長情況
圖1 培養(yǎng)22 d后的真姬菇菌絲體生長情況
真姬菇201 菌株在配方2 和配方5 料中菌絲平均長速最快,但配方5菌絲色澤要稍淡;配方3、配方6、配方1 的菌絲平均長速次之;配方4 菌絲平均長速最慢。由此可知,配方2(白楓木屑)適合201菌株菌絲生長,與101菌株有差異。
真姬菇101和201菌株在配方4(檫木屑)上菌絲生長最差,可能與檫木屑含黃樟油素等物質(zhì)有關(guān)。
由表3可知,供試配方栽培真姬菇101和201菌株,平均瓶產(chǎn)量、生育周期和菇品質(zhì)有差異。其中,101 菌株配方1 的平均產(chǎn)量最高,其次為配方2;配方1—配方5的生育周期都在22~24 d,菇品質(zhì)較好;而配方6 與其他5 個(gè)配方相比,平均產(chǎn)量最低,生育周期達(dá)26 d,菇品質(zhì)較差。
表3 供試配方真姬菇產(chǎn)量及品質(zhì)
真姬菇201 菌株配方2 的平均瓶產(chǎn)量最高,其次為配方1,配方3、配方4、配方5 的平均產(chǎn)量無顯著差異,且生育周期都為23 d,菇品質(zhì)好;而配方6的平均產(chǎn)量最低,生育周期為27 d,菇品質(zhì)較差。表明楓木屑和白楊木屑是最適合用于栽培真姬菇101和201 菌株,而泡桐木屑栽培真姬菇對其產(chǎn)量和品質(zhì)都有較大影響,不適合作為栽培真姬菇原料。
真姬菇栽培的主要原材料是木屑,近年來食用菌工廠化生產(chǎn)迅速發(fā)展,嚴(yán)格森林保護(hù)政策,導(dǎo)致真姬菇栽培中常用的楊木木屑和楓木木屑等原材料采購成本越來越高。因此,找尋成本低、易采購、可替代的原材料,對整個(gè)真姬菇產(chǎn)業(yè)發(fā)展具有重要意義。
試驗(yàn)結(jié)果表明,在相同培養(yǎng)環(huán)境下,供試配方的真姬菇菌絲生長和菌絲形態(tài)不同。在6 個(gè)配方中,配方1 更有利于真姬菇101 菌株菌絲生長,配方2更有利于201菌株菌絲生長;高壓滅菌后pH降低,大分子物質(zhì)易降解為有機(jī)物,有利于菌絲吸收。配方1 和配方2 栽培真姬菇101 和201 菌株,生長周期短,產(chǎn)量高,菇品質(zhì)較好。筆者還對不同封口方式進(jìn)行了比較,發(fā)現(xiàn)用棉塞封口的試管,料面菌絲易干,相較于橡膠塞更容易被污染,因此,不建議使用棉塞封口。