◎ 陳衛(wèi)平，汪 昕，陳 夢，饒 琛，章小洪，王偉影,2

（1.麗水市質(zhì)量檢驗(yàn)檢測研究院，浙江 麗水 323000；2.浙江中醫(yī)藥大學(xué)，浙江 杭州 310053）

靈芝孢子粉屬多孔菌科赤芝或紫芝的干燥成熟孢子[1]。靈芝孢子粉是靈芝的生殖細(xì)胞，具有靈芝的全部遺傳活性，有研究表明，靈芝孢子粉中多糖、氨基酸等含量明顯高于靈芝子實(shí)體，在抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)血脂、降血糖和保肝解毒等方面都表現(xiàn)出了良好的活性[2-12]。隨著近年來靈芝孢子粉藥食兩用相關(guān)研究的增多，中藥飲片、保健產(chǎn)品等不斷被開發(fā)出來，靈芝孢子粉已成為最受歡迎的藥食兩用品種之一[13-16]。目前，靈芝以人工栽培為主，栽培方式、栽培環(huán)境和采收手段等諸多因素均可能對孢子粉的質(zhì)量產(chǎn)生影響，靈芝孢子粉作為中藥飲片、保健食品等均無國家標(biāo)準(zhǔn)。為了解市售靈芝孢子粉的質(zhì)量安全情況，本研究從市場上購買浙江省內(nèi)外生產(chǎn)的中藥飲片、保健食品、食品和農(nóng)產(chǎn)品等不同產(chǎn)品類型和規(guī)格的靈芝孢子粉，對風(fēng)險因素鉛（Pb）、鎘（Cd）、砷（As）、汞（Hg）、銅（Cu）、鉻（Cr）和鎳（Ni）7種重金屬元素進(jìn)行測定，并采用單元素污染指數(shù)和綜合污染指數(shù)對市售靈芝孢子粉重金屬污染情況進(jìn)行評價。

1 材料與方法

1.1 材料

35批次靈芝孢子粉，市場購入，其中31批次來自浙江企業(yè)、2批次來自江蘇、1批次來自山東企業(yè)、1批次來自福建企業(yè)；35批次靈芝孢子粉中28批為破壁產(chǎn)品、7批次為未破壁產(chǎn)品，詳見表1。

表1 靈芝孢子粉一覽表

1.2 儀器

安捷倫HP7900J E-2000型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，美國安捷倫公司；DM2500型正置顯微鏡，德國Leica；Milli-Q Advantage A10超純水儀。

1.3 試劑

鉛、鎘、砷、鉻和鎳元素為混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號為CDJS-GNM-M221630-2013，濃度為100 μg·mL-1）；Hg元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號為CFGG-060080-02-01，濃度為1 000 mg·L-1）；Cu元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（批號為GNM-M050060-2013，濃度為100 μg·mL-1）；內(nèi)標(biāo)溶液Sc（批號為GSB 04-1750-2004，濃度為1 000 mg·L-1）、Y（批號為GSB 04-1788-2004，濃度為1 000 mg·L-1），In（批號為GSB 04-1731-2004，濃度為1 000 mg·L-1）、Bi（批號為GSB 04-1719-2004，濃度為1 000 mg·L-1），臨用時配制，濃度25 μg·L-1；上述元素標(biāo)準(zhǔn)溶液均購自上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司；鹽酸為優(yōu)級純（Merck）；硝酸為優(yōu)級純（Merck）；水為自制純化水。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 風(fēng)險因素及標(biāo)準(zhǔn)限值的確定

破壁靈芝孢子粉作為食用農(nóng)產(chǎn)品、食品、保健食品和中藥飲片目前均無相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)，有相應(yīng)的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)、省級中藥炮制規(guī)范和保健食品原料技術(shù)要求等，其中有進(jìn)行風(fēng)險因素重金屬元素測定的標(biāo)準(zhǔn)限值見表2。Cd蓄積最常導(dǎo)致的是腎功能受損和骨質(zhì)疾病[17]；Cu是人體必需的微量元素，然而過量的銅又會影響健康。例如，較高濃度的銅具有溶血作用，能引起肝、腎良性壞死[18]；Cr過量可對人體呼吸道、胃腸道、皮膚等產(chǎn)生損傷[19]；Ni在人體內(nèi)蓄積會導(dǎo)致肝、腎、脾等重要臟器的損傷等[20]。項(xiàng)目組擬定Pb、Cd、As、Hg、Cu、Cr和Ni 7種重金屬元素為風(fēng)險因素，對其進(jìn)行風(fēng)險監(jiān)測，標(biāo)準(zhǔn)限值采用7個標(biāo)準(zhǔn)中要求最高的浙江制造團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn) T/ZZB 0474—2018的限度指標(biāo)。

表2 靈芝孢子粉標(biāo)準(zhǔn)一覽表

1.4.2 重金屬檢測方法

取各批次樣品0.5 g，平行取樣2份，按照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品多元素的測定》（GB 5009.268—2016）中第一法電感耦合等離子體質(zhì)譜法（Inductively Coupled Plasma-Mass Spectrometry，ICP-MS）進(jìn)行測定，儀器參數(shù)見表3，各元素線性范圍及檢出限等見表4。

表3 ICP-MS參數(shù)表

1.4.3 靈芝孢子粉重金屬污染評價方法

（1）單元素污染指數(shù)評價法[21-22]。某一重金屬元素含量相對于標(biāo)準(zhǔn)限值的比值，計算公式為

式中：Pi為重金屬單元素污染指數(shù)；Ci為各重金屬元素的實(shí)測值，mg·kg-1；Si為擬定的重金屬單元素標(biāo)準(zhǔn)限值，mg·kg-1。

（2）綜合污染指數(shù)評價法[21-22]。綜合污染指數(shù)兼顧各元素污染指數(shù)平均值和最大值，突出污染較重的樣品作用，計算方法見式（2），綜合污染程度對照表見表5。

式中：P綜為綜合污染指數(shù)；Pi為各元素污染指數(shù)的平均值；Pmax為各元素污染指數(shù)中的最大值。

表5 綜合污染程度對照表

2 結(jié)果與分析

2.1 靈芝孢子粉中各重金屬元素含量

由表6可知，35批次靈芝孢子粉中Pb、As和Hg的含量均在標(biāo)準(zhǔn)限值內(nèi)；2批次Ni和Cr含量均超過標(biāo)準(zhǔn)限值；3批次Cu含量超過標(biāo)準(zhǔn)限值；1批次Cd含量超過標(biāo)準(zhǔn)限值。

表6 35批孢子粉重金屬元素含量表（n=2）

續(xù)表6

2.2 靈芝孢子粉單元素污染、重金屬污染評價

靈芝孢子粉中Pb、Cd、As、Hg、Cu、Cr和Ni 7種重金屬單元素污染評價指數(shù)（Pi）見表7；重金屬綜合污染指數(shù)（P綜）見表8。

表7 孢子粉中單元素污染評價指數(shù)表

表8 35批孢子粉重金屬元素污染綜合評價表

3 結(jié)論與討論

市場隨機(jī)購入的35批靈芝孢子粉重金屬污染狀況結(jié)果顯示，靈芝孢子粉中重金屬元素Cr與Ni處于中度污染、Cu處于輕度污染、Cd處于警戒限。靈芝孢子粉中這4種重金屬污染應(yīng)引起關(guān)注。

Cr與Ni一般為靈芝孢子粉破壁時由所使用的的不銹鋼容器帶入[23-24]。編號34號樣品標(biāo)注為“未破壁”，但Cr與Ni均超標(biāo)，項(xiàng)目組對其進(jìn)行破壁率項(xiàng)目檢查，發(fā)現(xiàn)34號樣品實(shí)際為破壁靈芝孢子粉，其破壁率＞95%；Cu與Cd污染可能與土壤中Cu、Cd含量高有關(guān)，通過土壤-植物系統(tǒng)的遷移轉(zhuǎn)化被靈芝吸收和積累造成孢子粉中這兩種元素的污染；此次Cd的分析結(jié)果與項(xiàng)目組此前對靈芝孢子粉中4種重金屬元素（As、Hg、Pb和Cd）分析[25]中Cd分析結(jié)果一致。

根據(jù)《國家衛(wèi)生計生委辦公廳關(guān)于破壁靈芝孢子粉有關(guān)問題的復(fù)函》（國衛(wèi)辦食品函〔2014〕390號），破壁靈芝孢子粉不宜作為普通食品原料，破壁靈芝孢子粉可作為中藥飲片、保健食品或保健食品的生產(chǎn)原料使用，此次靈芝孢子粉質(zhì)量風(fēng)險分析結(jié)果提示，市場存在靈芝孢子粉產(chǎn)品加工亂象，急需引起相關(guān)部門的重視。