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        蜂王漿如何在蜂群中保持活性

        2022-02-11 12:02:45劉玉玲王志郝京玉王琦陳東海牛慶生編譯
        中國蜂業(yè) 2022年11期

        劉玉玲 王志 郝京玉 王琦 陳東海 牛慶生│編譯

        吉林省養(yǎng)蜂科學(xué)研究所,吉林132108

        蜂王漿是蜂王的主要食物來源,是由年輕工蜂的咽下腺和上顎腺分泌的,傳統(tǒng)上認(rèn)為它具有多種營養(yǎng)和藥理作用,如降壓、抗腫瘤、類胰島素、消毒作用等。

        蜂王是后天培養(yǎng)而不是天生的,用蜂王漿喂養(yǎng)蜂王幼蟲是這一過程的關(guān)鍵。沒有這種特殊的食物,幼蟲將無法正常發(fā)育。蜂王完全以蜂王漿為食,這是它們體積大、壽命長的原因。它們平均比工蜂大42%、重60%,壽命是工蜂的40倍。蜂王的壽命為4~5年,而工蜂僅為7周。蜂王每天能產(chǎn)2000~3000枚卵,卵重相當(dāng)于其體重的2.5倍。蜂王長壽的秘密和非凡的生殖能力完全是因為它的飲食—蜂王漿,這通常被認(rèn)為是蜂王和工蜂在形態(tài)和功能上存在顯著差異的主要原因。

        中國蜂王漿生產(chǎn)可追溯到20世紀(jì)50年代。1957年,無王群生產(chǎn)蜂王漿,產(chǎn)量極低。1959年,中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院將王漿生產(chǎn)確定為重點(diǎn)項目。1960~1980年期間蜂王漿產(chǎn)量為每群3天10克的低水平,是1960年時的兩倍。1979年,產(chǎn)量迅速增加,全國年產(chǎn)量達(dá)到150噸。從那時起,特別是在20世紀(jì)90年代,蜂王漿產(chǎn)量飛速增長。目前,中國蜂王漿產(chǎn)量約為每年2000噸,是世界上最大的蜂王漿生產(chǎn)國,平均每群蜂王漿產(chǎn)量為8kg,近一半蜂王漿(1000噸)用于國內(nèi)消費(fèi)。

        日本是世界第二大蜂王漿消費(fèi)國和最大的進(jìn)口國,每年從中國進(jìn)口近700噸蜂王漿,占中國蜂王漿出口總量的60%以上。

        蜂王漿有新鮮、干燥和加工狀態(tài)。一般情況下,蜂王漿從蜂群中取出后會迅速冷凍,以保持其生物活性。然而,一些養(yǎng)蜂人和消費(fèi)者指出,蜂王漿在蜂群內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定,并在34℃下發(fā)揮其生物功能正是基于這樣一個事實:在它們的發(fā)育階段,蜂王幼蟲在蜂群內(nèi)34℃的溫度下,以蜂王漿為食長達(dá)6天,并且發(fā)育良好。說明在此條件下,蜂王漿品質(zhì)穩(wěn)定,功能最佳。針對這一現(xiàn)象,主張蜂王漿應(yīng)在室溫下長期保存。

        未經(jīng)處理的蜂王漿按原樣出售和食用,也可以在-20℃或更低溫度下儲存,而凍干型,無論是純的還是與其他成分混合,通常被封裝或以片劑形式儲存在低溫或室溫下。然而,如果儲存不當(dāng),蜂王漿會變質(zhì)或變壞,蛋白質(zhì)逐漸變質(zhì),粘度和可滴定酸含量增加,失去其商業(yè)價值,這些變化可能是由美拉德反應(yīng)或脂質(zhì)氧化引起的。新鮮蜂王漿的蛋白質(zhì)由水溶性蛋白質(zhì)(WSP)和水不溶性部分組成。根據(jù)所使用的提取條件,水溶性蛋白質(zhì)(WSP)是主要組分,占總蛋白質(zhì)的46%~89%。研究蜂王漿的組成、生理活性與新鮮度之間的關(guān)系,以確定一種可用于評價蜂王漿質(zhì)量的標(biāo)志物;研究蜂王漿在貯藏過程中成分的變化可尋找新鮮度的標(biāo)志。蜂王漿的生物活性成分10-羥基-2-癸烯酸和維生素含量在40℃貯藏7天期間沒有變化,蜂王漿的特定蛋白質(zhì)即蜂王漿蛋白(RJP-1),在各種條件下(從4℃到50℃貯藏7天)逐漸降解。RJP-1的降解率與貯藏溫度和貯藏時間成正比,RJP-1純化至均一性,并鑒定為分子量為57kDa的單體糖蛋白。

        作為一種可能的質(zhì)量標(biāo)志,研究蜂王漿對雄性小鼠的抗疲勞作用。所有小鼠被迫游泳15分鐘,然后休息一段時間后,測量疲勞的最大游泳時間。與其他組相比,蜂王漿組的游泳耐力顯著增加。該組小鼠在游泳后表現(xiàn)出顯著降低的血清乳酸和血清氨的積累以及降低的肌糖原消耗。在這些試驗中,40℃儲存7天的蜂王漿組和對照組之間沒有顯著差異。結(jié)果表明蜂王漿能改善小鼠運(yùn)動后的體力疲勞,這種抗疲勞作用似乎與蜂王漿的新鮮度有關(guān),可能與57kDa蛋白的含量相關(guān)。此外,57kDa蛋白能刺激肝細(xì)胞DNA合成,延長肝細(xì)胞增殖,增加白蛋白生成。因此,57kDA蛋白可以作為蜂王漿品質(zhì)的合適標(biāo)記,57kDa蛋白質(zhì)被命名為royalactin(蜂王漿衍生的肝細(xì)胞激活蛋白)。

        用臺灣中部和南部地區(qū)意大利蜜蜂生產(chǎn)的蜂王漿進(jìn)行蜂王漿新鮮度指標(biāo)研究。新鮮蜂王漿在37℃室溫下儲存3個月,每周取樣進(jìn)行毛細(xì)管電泳分析。為了鑒定新鮮蜂王漿樣品中的蛋白質(zhì)峰,使用兩種緩沖液,使用pH2.5磷酸鹽和pH6.0檸檬酸鹽。使用pH2.5的磷酸鹽緩沖液可以分離四個峰(N1至N4),而使用pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液可以分離兩個峰(R1和R2)。對儲存樣品的分析顯示,儲存1周后,蜂王漿樣品中的蛋白質(zhì)峰模式有顯著變化;儲存在37℃的樣品比儲存在室溫的樣品有更大的變化。使用每個峰的高度進(jìn)行比較,得到3個不同的比值,N1/N2、N3/N4和R2/RI。這3個比值均可作為評價蜂王漿新鮮度的指標(biāo),R2/R1的值尤其敏感。該方法用于評價隨機(jī)購買的20個新鮮蜂王漿樣品的新鮮度,樣本的Nl/N2在1.23和1.46之間,N3/N4在0.10和0.42之間,R2/RI在0.23和0.43之間。

        研究蜂王漿在-20℃、4℃和室溫下避光貯藏7個月的品質(zhì)變化。結(jié)果表明,蜂王漿在室溫貯藏過程中,顏色、粘度、水溶性蛋白(WSP)和單糖組分發(fā)生了顯著變化,而在-20℃貯藏過程中變化不明顯。粘度和褐變強(qiáng)度隨著貯藏時間的延長而增加,并隨著環(huán)境溫度的升高而增強(qiáng)。通過凝膠過濾獲得蜂王漿WSP的兩個主要組分,而通過SDSPAGE獲得4~5個不同的蛋白質(zhì)組分。結(jié)果表明,蜂王漿在貯藏過程中的品質(zhì)劣變是由美拉德褐變反應(yīng)引起的。

        那么為什么蜂王漿在蜂群內(nèi)35℃不變質(zhì)呢?當(dāng)卵孵化時,新出現(xiàn)的幼蟲能夠自發(fā)地吮吸蜂王漿。出生卵重0.1mg,蜂王產(chǎn)下的卵直立于蜂巢底部。在卵狀態(tài)的三天里,卵慢慢地一寸一寸地向蜂巢底部傾斜,在第三天,長成新月形幼蟲出現(xiàn)在年輕工蜂為它分泌的新鮮蜂王漿的王臺上。在接下來的三天里,不管什么種姓(工蜂、雄蜂或蜂王),幼蟲都會被喂食蜂王漿。工蜂給幼蟲喂食的方法是在幼蟲身體周圍堆積蜂王漿,使蜂王漿的攝入變得容易。其實幼蟲趴在它的食物上,就是工蜂不斷為它分泌的新鮮蜂王漿。在這三天時間里,工蜂和雄蜂幼蟲的食欲很小,但每天必須攝入相當(dāng)數(shù)量的食物,這表明它們必須晝夜不停地進(jìn)食,而保育工蜂必須連續(xù)不斷地仔細(xì)照料它們。據(jù)報道,工蜂對每個幼蟲的訪問持續(xù)時間僅為2至3秒,24小時內(nèi)至少有1000次訪問。

        三天后,工蜂和雄蜂幼蟲將停止接受新鮮的蜂王漿,取而代之的是蜂蜜和花粉的混合物。相比之下,蜂王幼蟲接受大量新鮮的蜂王漿,這是它們的專屬食物,在整個幼蟲階段堆積在王臺的底部。為了觀察不連續(xù)喂食對蜂王幼蟲的影響,進(jìn)行了一個實驗。幼蟲羽化48小時后,在特制的架上裝有幼蟲的蜂王王臺被封閉在尼龍篩網(wǎng)中,這樣工蜂就不能喂養(yǎng)它們。結(jié)果,僅僅一個晚上后,蜂王漿在細(xì)胞中變干,所有的幼蟲都死了。很明顯,如果工蜂不將蜂王漿連續(xù)分泌到王臺中,那么蜂王漿在35℃的群體溫度下會在12小時內(nèi)變干。在正常情況下,幼蟲每天接受工蜂超過1000次的喂食,以確保有足夠的新鮮蜂王漿。研究表明,蜂王漿的積累在移蟲后的第一天最少,在移蟲后的第三天即72小時,達(dá)到高峰。但在第四天,幼蟲消耗了王臺中的大部分蜂王漿。養(yǎng)蜂人經(jīng)常注意到,當(dāng)處女蜂王出現(xiàn)時,蜂王王臺里會剩下一些蜂王漿。然而,這些又干又舊,沒有價值。由此可見,幼蟲在蜂王王臺中所攝取的蜂王漿是工蜂不斷分泌的新鮮蜂王漿。因此,幼蟲攝入的蜂王漿不是在35℃下儲存9天的即食餐,而是工蜂連續(xù)分泌的。

        目前,鮮蜂王漿的國際貯藏標(biāo)準(zhǔn)是-10℃,日本規(guī)定蜂王漿必須保存在-15℃到-20℃之間。2002年7月25日,中國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部發(fā)布了蜂王漿冷凍和干粉蜂王漿儲存的國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),規(guī)定新鮮蜂王漿應(yīng)保存在-18℃以下,保質(zhì)期為24個月。如果蜂王漿干粉在室溫下密封保存,保質(zhì)期為3個月,如果溫度為-5℃,保質(zhì)期可延長至24個月。根據(jù)上述討論,很明顯,除了冷凍以外,沒有什么能保證蜂王漿的質(zhì)量,特別是在保護(hù)生物活性方面,如丙種球蛋白、超氧化物歧化酶(SOD)、活性肽、類胰島素、類固醇和酶。因此,在這些條件下保存的蜂王漿可以保證保健和治療的有效性。

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