張 歡， 李小安， 劉華柱， 張麗麗， 馬 歡， 黃小梅

(四川省綿陽(yáng)市中心醫(yī)院消化內(nèi)科， 四川 綿陽(yáng) 621000)

上消化道出血是肝硬化門靜脈高壓的常見(jiàn)并發(fā)癥，也是導(dǎo)致肝硬化患者死亡的主要原因之一[1]。前白蛋白(prealbumin，PA)、膽堿酯酶(cholinesterase，ChE)由肝臟合成，是反映肝功能早期損害的標(biāo)志物，多項(xiàng)研究表示血清PA、ChE水平越低表示肝功能越差[2,3]?？偰懼?total bile acid，TBA)是膽固醇在肝臟分解代謝的最終產(chǎn)物，既往研究發(fā)現(xiàn)血清TBA水平也與肝功能損害密切相關(guān)[4]。那么，血清PA、ChE和TBA水平能否與肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血有關(guān)？肝功能分級(jí)反映肝功能損害的程度，肝功能分級(jí)越高意味著肝硬化患者病情越嚴(yán)重。目前對(duì)于血清PA、ChE和TBA水平與肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血及其肝功能分級(jí)的關(guān)聯(lián)尚不清楚，值得進(jìn)一步研究。本研究旨在探討肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血患者血清PA、ChE和TBA水平特點(diǎn)，并分析血清PA、ChE和TBA與肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血患者的肝功能分級(jí)的關(guān)系，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取2019年1月至2021年4月我院收治的肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血患者273例(肝硬化出血組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合肝硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②存在門靜脈高壓，伴上消化道出血。排除標(biāo)準(zhǔn)：①Banti綜合征；②肝小靜脈閉塞癥；③血吸蟲性、藥物性、中毒性肝硬化；④既往肝小葉切除手術(shù)史；⑤合并嚴(yán)重心、腦、腎、內(nèi)分泌、血液疾病。選取同期無(wú)肝硬化病史的胃十二指腸潰瘍引起的上消化道出血患者82例(非肝硬化出血組)。選取無(wú)肝硬化病史的健康志愿者65例(健康對(duì)照組)。本研究通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有研究對(duì)象均簽署知情同意書。肝硬化出血組男178例，女95例；年齡42～73歲，平均年齡(57.63±7.12)歲；體質(zhì)指數(shù)17.56～25.29kg/m2，平均體質(zhì)指數(shù)(21.45±1.67)kg/m2；肝功能Child-Pugh分級(jí)：A級(jí)58例，B級(jí)119例，C級(jí)96例。非肝硬化出血組男50例，女32例；年齡38～70歲，平均年齡(56.33±7.08)歲；體質(zhì)指數(shù)18.02～25.34kg/m2，平均體質(zhì)指數(shù)(21.29±1.86)kg/m2。健康對(duì)照組男41例，女24例；年齡40～72歲，平均年齡(56.48±6.85)歲；體質(zhì)指數(shù)18.45～24.78kg/m2，平均體質(zhì)指數(shù)(21.03±1.72)kg/m2。3組性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

1.2方法：肝硬化出血組、非肝硬化出血組、健康對(duì)照組均于清晨采集空腹靜脈血5mL，分離血清，檢驗(yàn)血清PA、ChE、TBA水平。血清PA采用雙抗體夾心法檢驗(yàn)，試劑盒購(gòu)自寧波賽克生物技術(shù)有限公司，檢驗(yàn)儀器為800TS多功能酶標(biāo)儀(美國(guó)伯騰公司)，按照說(shuō)明書操作：檢測(cè)前調(diào)配好試劑，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成6份不同的濃度，設(shè)置6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)孔，分別加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品；設(shè)置1個(gè)空白孔，不加入任何標(biāo)準(zhǔn)品；設(shè)置1個(gè)樣本孔，加入待測(cè)血清。每孔加入生物素標(biāo)記的抗體，37℃溫育45min，加入磷酸鹽緩沖液振蕩30s洗滌5次。每孔加入親和鏈酶素，37℃溫育45min，加入磷酸鹽緩沖液振蕩30s洗滌5次。每孔加入底物，37℃避光顯色5min。每孔加入終止液，在酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度OD值。以O(shè)D值為縱坐標(biāo)(Y)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，將待測(cè)血清樣品的OD值代入可得出血清濃度。血清ChE采用速率法檢驗(yàn)，試劑盒購(gòu)自上海研啟生物科技有限公司，檢驗(yàn)儀器為Cedex Bio/HT多參數(shù)生化分析儀(美國(guó)羅氏公司)，按說(shuō)明書操作：檢測(cè)前調(diào)配好試劑，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成6份不同的濃度，設(shè)置6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)孔，分別加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品；設(shè)置1個(gè)空白孔，不加入任何標(biāo)準(zhǔn)品；設(shè)置1個(gè)樣本孔，加入待測(cè)血清，37℃下生化分析儀自動(dòng)檢測(cè)血清樣本反射強(qiáng)度變化率轉(zhuǎn)化為kU/L單位的酶活性度。血清TBA采用酶循環(huán)法檢驗(yàn)，試劑盒購(gòu)自上海研啟生物科技有限公司，檢驗(yàn)儀器為Cedex Bio/HT多參數(shù)生化分析儀(美國(guó)羅氏公司)，按說(shuō)明書操作：檢測(cè)前調(diào)配好試劑，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成6份不同的濃度，設(shè)置6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)孔，分別加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品；設(shè)置1個(gè)空白孔，不加入任何標(biāo)準(zhǔn)品；設(shè)置1個(gè)樣本孔，加入待測(cè)血清。分別加入酶循環(huán)法顯色試劑，在340nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的吸光度OD值，以O(shè)D值為縱坐標(biāo)(Y)，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，將待測(cè)血清樣品的OD值代入可得出血清濃度。

2 結(jié) 果

2.1各組血清PA、ChE、TBA水平比較：肝硬化出血組的血清PA、ChE水平低于非肝硬化出血組和健康對(duì)照組(P<0.05)，肝硬化出血組的血清TBA水平高于非肝硬化出血組和健康對(duì)照組(P<0.05)。非肝硬化出血組與健康對(duì)照組的血清PA、ChE、TBA水平比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 各組血清PA ChE TBA水平比較

2.2肝硬化出血組不同肝功能分級(jí)患者血清PA、ChE、TBA水平比較：不同肝功能分級(jí)患者血清PA、ChE、TBA水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。C級(jí)患者的血清PA、ChE水平低于B級(jí)和A級(jí)，且B級(jí)患者的血清PA、ChE水平低于A級(jí)(P<0.05)。C級(jí)患者的血清TBA水平高于B級(jí)和A級(jí)，且B級(jí)患者的血清TBA水平高于A級(jí)(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 肝硬化出血組不同肝功能分級(jí)患者血清PA ChE TBA水平比較

2.3血清PA、ChE、TBA水平與肝功能分級(jí)的相關(guān)性：血清PA水平與肝功能分級(jí)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。血清ChE水平與肝功能分級(jí)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。血清TBA水平與肝功能分級(jí)呈正相關(guān)(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 血清PA ChE TBA水平與肝功能分級(jí)的相關(guān)性

3 討 論

肝硬化是我國(guó)常見(jiàn)肝臟疾病，主要以肝炎性肝硬化為主[6]。隨著肝硬化病情的加重，患者會(huì)出現(xiàn)門靜脈高壓，引起食管胃底靜脈曲張、上消化道出血，發(fā)生率約占所有肝硬化門靜脈高壓患者的30%～70%[7]。門靜脈高壓引發(fā)上消化道出血的病理機(jī)制是肝纖維化后肝臟假小葉以及血管紊亂重構(gòu)，增加門靜脈阻力，導(dǎo)致門靜脈血流減少、血液低灌注，形成門靜脈高壓，門靜脈高壓又會(huì)影響門-體側(cè)支循環(huán)的開放，引起食管胃底靜脈曲張，曲張靜脈在受到胃酸侵蝕、粗硬食物摩擦、酒精刺激等因素容易發(fā)生破裂出血，從而發(fā)生上消化道出血[8]。國(guó)內(nèi)外有研究發(fā)現(xiàn)，肝功能損害程度與門靜脈高壓程度、食管胃底靜脈曲張破裂出血密切相關(guān)[9,10]，積極有效治療肝硬化、延緩肝硬化及門靜脈高壓病情進(jìn)展對(duì)預(yù)防上消化道出血具有重要意義。目前臨床上PA、ChE、TBA是評(píng)估肝功能損害程度的常見(jiàn)生化指標(biāo)，檢測(cè)便捷，具有實(shí)用價(jià)值。然而血清PA、ChE和TBA水平與肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血的關(guān)系尚不清楚，有待進(jìn)一步研究。

本研究以無(wú)肝硬化病史的胃十二指腸潰瘍引起的上消化道出血患者以及健康志愿者作為對(duì)照，分析PA、ChE、TBA在肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血中的臨床意義，結(jié)果顯示，肝硬化出血組的血清PA、ChE水平低于非肝硬化出血組和健康對(duì)照組，肝硬化出血組的血清TBA水平高于非肝硬化出血組和健康對(duì)照組，而非肝硬化出血組與健康對(duì)照組的血清PA、ChE、TBA水平比較無(wú)明顯差異。上述可以說(shuō)明相比胃十二指腸潰瘍引起的上消化道出血，肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血患者中血清PA、ChE呈低水平而TBA呈高水平。PA和ChE均由肝臟合成，PA是一種急性負(fù)時(shí)相反應(yīng)蛋白，評(píng)估肝功能損害的靈敏度較高。另外，有研究發(fā)現(xiàn)，PA可以作為評(píng)估上消化道出血的營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)[11]，在胃十二指腸潰瘍引起的上消化道出血患者中血清PA會(huì)有輕微下降，而在肝硬化門靜脈高壓引起的上消化道出血患者中血清PA大幅度下降。ChE是肝臟合成的一種酶，酶活性降低反映肝功能受損，有研究[12]表示肝硬化門靜脈高壓患者血清ChE明顯下降，與病情嚴(yán)重程度有關(guān)。

進(jìn)一步分析肝硬化出血組不同肝功能分級(jí)患者血清PA、ChE、TBA水平差異，本研究發(fā)現(xiàn)血清PA、ChE水平與肝功能分級(jí)具有關(guān)聯(lián)，血清PA、ChE水平與肝功能分級(jí)呈負(fù)相關(guān)，而血清TBA水平與肝功能分級(jí)呈正相關(guān)，與研究[13]報(bào)道相似。血清PA和ChE水平降低、血清TBA水平升高反映肝功能損害逐漸加重、門靜脈高壓病情加重，發(fā)生上消化道出血的風(fēng)險(xiǎn)越高。本研究推測(cè)，檢測(cè)血清PA、ChE和TBA水平或許可以評(píng)估肝功能分級(jí)，從而有助于判斷肝硬化門靜脈高壓病情程度及上消化道出血風(fēng)險(xiǎn)，但具體的臨床診斷意義還需后續(xù)大樣本研究來(lái)證實(shí)。

綜上所述，肝硬化門靜脈高壓伴上消化道出血患者的血清PA和ChE呈低水平，血清TBA呈高水平；血清PA、ChE和TBA與患者的肝功能分級(jí)密切相關(guān)。